Методы анализа молока и молочных продуктов - Инихов Г.С.
Скачать (прямая ссылка):
Экстракт переносят в сухую колбу, добавляют 5—¦ 10 г свежепрокаленного сернокислого натрия и высушивают 20 мин при периодическом взбалтывании до получения совершенно прозрачного раствора. Высушенный экстракт фильтруют через складчатый фильтр в колбу для отгонки. Фильтр промывают несколькими порциями сухого диэтилового эфира. Эфир после подсушивания над безводным СаСІг отгоняют на водяной бане в токе
149
инертного газа досуха. Остаток неомыляемых веществ растворяют в 10 —15 мл бензола и количественно переносят в мерную колбу емкостью 25 мл. Объем доводят до метки бензолом.
Подготавливается адсорбционная колонка с диатомитом (реактив 131) (слой высотой 3,5 см, диаметр 1,5 см). Из раствора неомыляемых пипеткой отбирают 10 мл и пропускают через колонку при слабом разрежении или легком давлении инертного газа.
Токоферолы элюируют 15 мл бензола, весь злюат количественно переносят в мерную колбу емкостью 25 мл. Объем бензолом доводят до метки и получают основной раствор токоферолов. 2 мл этого раствора переносят пипеткой в мерную колбу емкостью 25 мл, добавляют около 20 мл бензола и 1 мл ортофенантролина или а — а'-дипиридила. Колбу закрывают пробкой, и содержимое тщательно перемешивают. Затем добавляют по каплям 1 мл 0,1%-ного раствора хлорного железа, быстро доводят бензолом содержимое колбы до метки, перемешивают и ставят в темное место на 10 мин. Растворы фотометрируют на спектрофотометре СФ-4, сравнивая с контрольным измерением при 490 нм.
По калибровочному графику находят соответствующее количество токоферола. Содержание токоферолов рассчитывают по формуле
р-25-25-100 X = - мг%,
где g — содержание токоферолов, найденное по графику, мг; 25 и 25 — первое и второе разведение; 100 — пересчет на 100%; G— навеска, г; v — количество основного раствора, взятое на колонку, мл; Vi — количество испытуемого раствора, взятое для проведения реакции, мл.
Определение содержания жирных кислот в молочном жире
Кислоты с сопряженными двойными связями (по М. Залашко). В мерную с притертой пробкой колбу на 50 мл отвешивают 0,16—0,18 г профильтрованного молочного жира и добавляют до метки химически чистый n-гексан (температурой кипения 68—
150
68,5°С). При определении содержания диеновых кислот полученный раствор жира разбавляют п-гексаном в соотношении 1:4 — 1:8 (чем больше содержание кислот, тем больше разбавление). Для установления количества триеновых кислот в мерную колбу на 25 мл отвешивают около 0,5 г жира и доводят гексаном до метки.
В кварцевые кюветы с толщиной слоя в 1 см наливают растворы и отсчитывают оптическую плотность в спектрофотометре СФ-4 для диеновых кислот при длине волны 232 нм, для триеновых — 268 нм и для тетраено-вых — 301 нм.
Содержание кислот с сопряженными двойными связями рассчитывают по формуле
где є — оптическая плотность раствора жира, найденная по калибровочному графику; С -— навеска жира в 100 мл п-гексана, г; е\$м— значение оптической плотности для чистых кислот с сопряженными связями (для диеновых 1190, тридиеновых 1930, тетраеновых 2850).
Точность анализа для диеновых кислот составляет ±1,97с/о, для триеновых ±1,06% и для тетраеновых ±3,10%. Для определения значения є измеряют оптическую плотность 1%-ного раствора определенной чистой кислоты с сопряженными связями при толщине слоя I см.
Полиненасыщенные жирные кислоты (по Н. Крыловой и Ю. Лясковской). Перед определением содержания полиненасыщенных жирных кислот проводят изомеризацию для перевода кислот с изолированными связями в кислоты с сопряженными связями. В стаканчики 14ХЮ мм с точностью до 0,0002 г отвешивают около 0,1 г исследуемого молочного жира. В пробирки с притертыми пробками из стойкого стекла (размером 20X150 мм) отвешивают 11 г 6,6%-ного раствора KOH в этиленгликоле. Пробирки помещают в штатив, погружают на глубину 11,5 см в жидкость ультратермостата или бани температурой 1800C и нагревают 20 мин. В пробирки опускают стаканчики с навесками жира. Две пробирки оставляют в качестве контрольных (в них опускают пустые стаканчики) для взвешивания.
151
Вынимают каждую пробирку из бани, энергично перемешивают содержимое вращательным движением в течение 5 сек и снова ставят в баню. К концу первой минуты нагревания пробирки вынимают из бани и проверяют раствор. Если раствор прозрачен, пробирки помещают в баню, если нет, что указывает на неполное омыление, то встряхивают пробирки 2—3 раза и только тогда помещают в баню. За 1 мин нагревания встряхивание повторяют до тех пор, пока омыление не пройдет полиостью и раствор не станет прозрачным.
Через 25 мин нагревания при 180±0,5°С, считая с момента опускания образца в 6,6%-ный раствор KOH в этиленгликоле, пробирки вынимают и быстро охлаждают, поместив в сосуд с холодной водой. Содержимое пробирок количественно переносят в мерные колбы па 100 мл с притертыми пробками и доводят до метки этиловым спиртом (оптической чистоты). После этого колбы оставляют в холодильнике при температуре около 4° С на 10—12 ч.
Затем содержимое колб нагревают до 18—20" С, фильтруют через бумажный фильтр, разводят до нужной концентрации этиловым спиртом. На спектрофотометре СФ-4 измеряют оптическую плотность или процент пропускания исследуемого раствора.
