Методы анализа молока и молочных продуктов - Инихов Г.С.
Скачать (прямая ссылка):
Определение содержания фосфора в молоке (Международный стандарт FiI — IDF 42: 1967)
Перед анализом доводят температуру молока до 20±2°С и тщательно перемешивают. Если жир не распределяется равномерно, нагревают пробу до 40° С, осторожно перемешивают и охлаждают до 20±2°С. Затем 10 г молока в фарфоровой или кварцевой чашке выпаривают на кипящей водяной бане досуха, ожигают в муфельной печи при температуре 500—550° С до получения белой золы. Золу охлаждают, чашку закрывают часовым стеклом. Содержимое растворяют в 2—3 мл 1 н. соляной кислоты, разводят водой и переносят мерную колбу на 100 мл, перемешивают, фильтруют.
10 мл фильтрата переносят в другую мерную колбу на 100 мл, доводят водой до метки. 5 мл раствора переносят в мерную колбу на 25 мл, добавляют 2 мл хлорной кислоты (реактив 89) 2 мл раствора амидола (реактив 90), 1 мл раствора молибденовокислого аммония (реак-
155
тив 31, б). Объем доводят до 25 мл водой, смешивают. Через 15 мин измеряют оптическую плотность в 1 см кювете в спектрофотометре при 700 нм.
Холостой опыт проводят так же, применяя вместо 5 мл раствора 5 мл воды.
Для построения калибровочного графика в четыре мерные колбочки на 25 мл калиброванной пипеткой вливают 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 и 10 мл раствора KH2PO4 (реактив 91), что соответствуют 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900 и 1000 мкг фосфора. Затем добавляют в каждую колбу в тех же количествах, что при опыте по 2 мл хлорной кислоты, 2 мл амидола и 1 мл молибдата аммония, доводят водой до 25 мл, перемешивают и через 15 мин измеряют оптическую плотность. По оси абсцисс откладывают содержание фосфора в мкг, по оси ординат — оптическую плотность.
Содержание фосфора на 100 г молока находят по формуле
где g — масса фосфора, найденная по калибровочному графику, содержащаяся в 50 мг молока, мкг; g\ — масса фосфора в холостом опыте, мкг; G — масса молока, взятого для озоления.
Разница между параллельными определениями не должна превышать 0,003 г фосфора в 100 г молока.
Определение содержания фосфора в твердых и плавленых сырах полумикрометодом
Общее количество фосфора. В коническую колбу емкостью 25 мл отвешивают точно 0,25 г хорошо перемешанной растертой пробы сыра, опускают несколько небольших кусочков фарфора и пипеткой вливают 2 мл концентрированной серной кислоты. Осторожно нагревают под тягой до прекращения образования пены, дают остыть до комнатной температуры и прибавляют несколько капель 30с/о-ного пергидроля.
Затем нагревают, охлаждают, повторяя эту операцию до тех пор, пока содержимое колбы не станет совершенно прозрачным и бесцветным. После охлаждения колбы горлышко ее промывают 2 мл воды, снова нагревают
156
колбу для удаления воды и продолжают кипятить 30 мин для полного освобождения от перекиси водорода. Охлажденную жидкость переливают в мерную колбу на 50 мл, обмывают первую колбу водой, сливая ее в мерную колбу. Объем доливают водой до метки. I мл полученного раствора переносят в мерную колбу на 50 мл, добавляют 25 мл воды и 20 мл раствора гидразинсуль-фатмолибдата (реактив 135).
Колбу помещают в кипящую баню на 15 мин для установления постоянной окраски. Затем раствор охлаждают до 20° С и определяют оптическую плотность (не позже чем через 1 ч по приготовлении раствора) при длине волны 700 нм, сравнивая показания с холостой пробой.
Для построения калибровочного графика 10 мл стандартного раствора монофосфата калия (реактив 91) в колбе емкостью 100 мл разбавляют водой до метки. В 5 мерных колб на 50 мл вливают 0, 1, 2, 5, 10 мл разведенного стандартного раствора и воды столько, чтобы объем в каждой колбе составил 25 мл. Затем в каждую колбу приливают по 20 мл раствора гидразинсульфатмо-либдата (реактив 135) и воду до метки. Далее поступают, как описано выше.
Содержание фосфора находят по формуле ,,
где g — количество фосфора, полученное по калибровочному графику, мг; gi — масса пробы сыра, г.
Общее количество фосфора в растворимых соединениях. 5 г сыра растирают с 50 мл воды, нагретой до 45° С, выдерживают 2 ч, центрифугируют, жидкость декантируют на фильтр в мерную колбу на 100 мл. Осадок дважды промывают водой, каждый раз центрифугируя и сливая жидкость в ту же мерную колбу. Содержимое колбы доводят водой до метки. Затем отбирают 5 мл полученного раствора для сжигания и проводят исследования как при определении содержания общего количества фосфора.
Количество фосфора в белках (казеине). 50 мл отцентрифугированного фильтрата, полученного при установлении количества в растворимых соединениях, вносят в колбу на 100 мл, прибавляют 3,3 мл
157
75%-ной трихлоруксусной кислоты для осаждения белков. Через 10—15 мин осадок отфильтровывают (фильтр с белой лентой), промывают водой, подкисленной трихлоруксусной кислотой (3 г кислоты на 50 г воды). Фильтрат (сыворотку) собирают в мерную колбу на 100 мл, доливают водой до метки для определения количества фосфора в сыворотке. Промытый осадок растворяют в 0,1 н. растворе NaOH и собирают в мерную колбу на 25 мл. Из этого раствора берут 5 мл для сжигания и проводят исследования как при определении содержания общего количества фосфора.
