Методы анализа молока и молочных продуктов - Инихов Г.С.
Скачать (прямая ссылка):
Разведения желательны такие, чтобы оптическая плотность измеряемых растворов находилась в пределах 0,2 -0,8. Измерения производят при длинах волн 233, 262, 268, 274, 308, 315, 322 нм и разведениях, приведенных в табл. 20.
Таблица 20
Длина волны, при кото- Разведение (отношение
рой произволится измере- исходного раствора Концентрация, г\л
ние, HM к спирту)
233 ] :7 0,125
262, 268, 274 ы 0,5
308, 315, 322 Исходный раствор 1,0
Затем рассчитывают удельный коэффициент погашения образца при каждой длине волны по формуле
E
152
где є — измеренная оптическая плотность; I — толщина слоя кюветы, см; g — масса образца в растворе для измерения оптической плотности, г/л.
При расчете вносят поправки. В коэффициенте удельного погашения при 233 нм учитывают постоянную поправку 0,03, зависящую от поглощения карбоксильных групп. Коэффициенты удельного погашения при 268 и 315 нм исправляют на абсорбцию фона. При сравнительно больших количествах кислоты и оптической плотности >1 поправку не делают и тогда /(3=/(268 и /(4=/(315. В качестве контроля используют кювету с растворителем.
Определение степени окисленности молока (по Н. Крыловой, Ю. JIпсковской)
В центрифужную пробирку емкостью 40 мл отмеривают 10 мл молока, добавляют 5 мл реактива ТБК (реактив 82, б) и хорошо смешивают. Пробирку помещают на 10 мин в кипящую водяную баню, затем охлаждают в холодной воде. В пробирку прибавляют 15 мл экстракционной смеси (реактив 151), пробирку тщательно закрывают пробкой, энергично встряхивают не менее 30 сек и центрифугируют 5 мин (3000 об/мин).
Часть прозрачного раствора переносят в кювету и определяют оптическую плотность в спектрофотометре СФ-4 при длине волны 535 нм. Одновременно с исследуемым раствором проводят холостую пробу (вместо молока отмеривают 10 мл воды). Из полученной цифры оптической плотности исследуемого молока вычитают величину оптической плотности холостой пробы и получают цифру, относящуюся к молоку. Результаты выражают в единицах оптической плотности.
Определение степени окисления жира сухого молока (по Моннину и Шетти)
Выделение жира. Сухое молоко распылительной сушки. Вносят в коническую колбу с притертой пробкой на 250 мл 10 г сухого молока и 100 мл 96с/о-ного этилового спирта, взбалтывают. Спирт отгоняют на водяной бане (через холодильник). Перемешивают оставшуюся массу шпателем, прибавляют 100 мл петролейного эфира, температура кипения 40—65° С. Встряхивают и оставляют на 15 мин в темноте, затем
153
фильтруют. Ополаскивают колбу 50 мл петролейного эфира, выливают на тот же фильтр. Петролейный эфир отгоняют под вакуумом на водяной бане при 40- 50° С. Если жир не исследуют немедленно, колбу закрывают притертой пробкой и сохраняют в темном месте на холоду.
Сухое молоко барабанной сушки. В коническую колбу на 250 мл вносят 10 г сухого молока и 100 мл петролейного эфира. Закрывают и выдерживают в темном месте 30 мин, время от времени встряхивая. Фильтруют, далее поступают как при выделении жира из молока распылительной сушки.
Методика определения. Отвешивают точно 100— 150 мг жира в конической колбе с притертой пробкой на 100 мл. Для предохранения колбы от света ее закрывают черной бумагой. Прибавляют 20 мл смеси бензол-метанол (реактив 124), 0,1 мл раствора FeCl2 (реактив 126), 0,1 мл раствора JMH4CNS (реактив 125). После добавления каждого реактива встряхивают содержимое колбы.
Колбу закрывают пробкой и помещают в водяную баню при 50±2° С на 2 мин, вкладывая полоску бумаги между пробкой и горлом колбы. Затем содержимое немедленно охлаждают до температуры 18—20° С, погружая колбу на 3—4 мин в воду. Измеряют оптическую плотность раствора в спектрофотометре при 510 нм в кювете 1 см. Холостой опыт проводят таким же образом, но исключая жир. Вычитают эту величину из первой.
Градус окисления 100 мг жира рассчитывают по формуле ?-10000
где E — оптическая плотность, отсчитанная в спектрофотометре СФ-4; G — масса пробы, мг.
Можно применять обычный фотометр с фильтром для длины волны в пределах 500—525 нм.
Определение содержания насыщенных и ненасыщенных карбонильных соединений в молочном жире (по Хеник, Венка, Мутчел)
В мерную колбу на 50 мл вносят пипеткой 3 мл 4,3%-ного раствора трихлоруксусной кислоты в бензоле, 5 мл 0,05% раствора 2.4-динитроФенилгидразина (реак-
B1
С
154
тив 133) и 1 г жира в 5 мл бє^зіілдЛРеактив 134). Закрывают колбу и нагревают ее на водяной бане 30 мин при 60° С. После охлаждения до температуры 18- 200C в колбу вносят 10 мл 4%-ного спиртового раствора едкого кали и доводят до метки абсолютным этиловым спиртом (реактив 132). Содержимое колбы встряхивают и оставляют на 10 мин.
Спектрофотометрические измерения производят на спектрофотометре СФ-4 в кюветах с толщиной слоя 1 см при длине воли 430—460 нм.
Контролем является бензол.
Содержание карбонильных соединений в 1 мл молочного жира рассчитывают по формулам ненасыщенных
„ 4,204е4,с-3,266е4зо
Л =--——- MKMOЛ h ,
насыщенных
5.97ІЄ-ЗД — 4,533е4-0 Y=-'¦-мкмоль ,
S
где є — оптическая плотность (внизу указана длина волны); g —масса жира, растворенного в 5 мл бензола.
