Методы анализа молока и молочных продуктов - Инихов Г.С.
Скачать (прямая ссылка):
143
Фильтруют в колориметрическую пробирку, нагревают 5 мин при 85° С, прикрыв пробирку пробкой. Раствор охлаждают до 20° С, переливают в кювету. Интенсивность окраски определяют в электрофотоколориметре по калибровочному графику или сравнением со стандартным раствором.
Калибровочный график строят по окраске растворов сгустков молока, полученных из цельного молока с известным содержанием сомо, из восстановленного — с таким же содержанием сомо и из смеси цельного и восстановленного молока.
Стандартный раствор приготовляют смешиванием 2н. раствора CuSO4, 0,25 и. раствора FeCl3 и 0,2 н. раствора CoCl2 в 1%-ном растворе HCl в таких соотношениях, чтоб по окраске он соответствовал раствору сгустка молока с известным содержанием восстановленного. При соблюдении указанных условий центрифугирования, температуры и времени нагревания определение производится с точностью до 5%.
Так как степень окраски восстановленного молока зависит от температуры сушки молока, точность метода может снижаться в зависимости от качества применяемого сухого молока.
СПЕКТРОФОТОМЕТРИЯ
Спектрофотометрия основана на тех же законах све-топоглощения, что и колориметрия, однако при спектро-фотометрии используется поглощение света определенной длины волны. Оптическая схема прибора СФ-4 показана на рис. 58. Свет от источника / (обычная лампа накаливания при работе в видимой области спектра и водородная лампа для ультрафиолетовой области) попадает на зеркальный конденсатор 2, затем на плоское зеркало 3. Зеркало отклоняет пучок лучей на 90° и направляет его в щель 4, защищенную кварцевой пластинкой 5. Свет, прошедший через щель, попадает на зеркальный объектив 6, который посылает параллельный пучок света на кварцевую призму 7.
Одна из граней призмы посеребрена, поэтому разложенный в спектр пучок света отражается и направляется обратно на объектив 6, который фокусирует лучи на выходной щели 4. Призма соединена специальным меха-
144
низмом со шкалой длин волн. Поворачивая призму вращением соответствующей рукоятки на выходе монохроматора, получают монохроматический пучок света заданной длины волны. Пучок света проходит щель 4, собирается кварцевой линзой 8, проходит через один из выдвижных светофильтров 5 и попадает в кювету 10. Из кюветы W лучи, пройдя через защитное кварцевое стекло 11, при открытой шторке 12 попадают на один из фотоэлементов 13 (сурьмяно-цезиевый для работы в области 220-—650 нм и кислородно-цезиевый для работы в длинно-волновой части спектра).
Фототок, возникающий в фотоэлементе под действием падающих на него лучей, усиливается радиолампами и передается на миллиамперметр.
Практически на спектрофотометре измеряют оптическую плотность или процент пропускания исследуемого раствора относительно дистиллированной воды. Предварительно строят градуировочный график так же, как и при фотоколориметрических измерениях.
Є S ID 13
Рис. 58. Оптическая схема спектрофотометра СФ-4:
1 — источник света; 2 — зеркальный конденсатор; 3 — плоское зеркало; 4 — щель; 5 —кварцевая пластинка; 6 — объектив; 7 — призма; 8 — линза; 9 — светофильтр; 10 — кювета; // — кварцевое стекло; 12- шторка; 13 — фотоэлементы.
Правильность фотометрической шкалы спектрофотометра проверяют стандартными растворами, спектральное пропускание которых установлено с достаточной точностью. Рекомендуются водные растворы сернокислой меди для области 550—750 нм (реактив 43, д), сернокислого кобальта аммония для области 400—600 нм (реактив 73) и хромовокислого калия для области 215—-500 нм (реактив 74). Пропускаемость (в %) ПРИ толщине слоя для стандартных растворов 10 мм при 25° С приведена в табл. 19.
145
Таблица 19
Сернокислая медь
Сернокислый кобальт аммоний
Хромовокислый калий
Длина водны,
HM
Сернокислая мель
Сернокислый кобальт аммоний
97,9 «8,6 98,9 99,2 99,4 99,5 93.fi 99,6 99,7 99,7 9Э,7
99.7
99,7
99,1 99,1 98,9 98,5 98,0 97,2 96,2 95,0 92,5 88,7 83,7
78,9
75.6
68,0 50.9 31,9 23,2 18.0 18,9 37,2 70.5 90,0 86,7 71,5 48,5 28,0 14,8 10,2 11,8 20,7 41,0 63,5 74,8 82,4 88,4 92.8
96,1
98.1
480 490 500 510 520 530 540 550 560 570 580 590 600 610 620 630 640 650 660 670 680 690 700 710 720 730 740 750
99,7 99,6 99,4 99,1 98,7 98,2 97,5 96,5 96,1 93,5 91,4 88,8 85,5 81,6 77,2 71,9 66,1 59,7 53,2 46,6 40,6 34,8 29,7 25,6 22,1 19.3
1I'1
15,2
73,3 71,3 68,6 67,0 67,8 61,6 77,4 83,7 89,2 93,2 95,3 96,4 96.9 97,2 97,4 97,5 97.5 97,6 97,8 98,0 98,3 98,5 98,8 98,9 99,1 99.3 99,3 99,4
Спектрофотометр СФ-4 (рис. 59) перед началом измерения прогревают 10—20 мин. Устанавливают в рабочее положение осветитель и включают источник света. Ставят переключатель 14 в положение «включено» и рукояткой 15 устанавливают потенциометр чувствительности в среднее положение (4—5 поворотов от крайнего левого или правого положения); при работе в ультрафиолетовой области спектра потенциометр чувствительности ставят в крайнее левое положение. Устанавливают нужную длину волны, вращая шкалу за рукоятку S в сторону увеличения длин волн.
Исследуемые образцы помещают в кюветы так, чтобы в одном положении каретки луч проходил через кю-146
