Практикум по агрохимии - 2-е изд. - Минеев В.Г.
ISBN 5-211-04265-4
Скачать (прямая ссылка):
Колбы охлаждают на водяной бане до комнатной температуры. Доливают в них 30 см3 дистиллированной воды, перемешивают и проводят осаждение белков в растворе. Для этого в колбы приливают 5 CMJ 10%-й фосфорно-вольфрамовой кислоты и после перемешивания доводят раствор до метки соляной кислотой. Осаждение белков проходит достаточно быстро, в течение 1 ч. При массовых анализах растворы можно оставить на ночь.
Гидролизат профильтровать через рыхлый фильтр в сухой химический стакан с оттянутым носиком, из него удобнее наполнять поляризационную трубку.
Провести определение угла вращения на поляриметре.
Реактивы
1. 1%-й раствор HCl: 22,6 см3 конц. HCl (d = 1,19) вливают в мерную колбу емкостью 1 дм3, предварительно налив туда 500 CMj воды, доводят до метки дистиллированной водой.
2. 10%-й раствор фосфорно-вольфрамовой кислоты.
Правила работы на поляриметре (дополнение к изложенным в разделе I, с. 28-29):
Углеводы являются ог.тически активными веществами, их прозрачные растворы отклоняют плоскость поляризованного луча, угол отклонения пропорционален концентрации определенного углевода, что позволяет рассчитать его содержание в растворе.
Для каждого углевода есть показатель [a] удельное вращение -
это угол отклонения поляризованного луча света при его прохождении через слой жидкости в 1 дм3 с содержанием 1 г оптически активного вещества в 1 см3 раствора, измеренный при температуре 20°С.
Для определения используют полутеневой поляриметр с полем зрения в виде диска, разделенного на три части разного цвета и границами раздела. Как источник света используют электрическую натриевую лампу.
Источник света и призмы прибора должны располагаться в одной плоскости, поэтому при установке прибора перед источником света помещают иглу, а перед диафрагмой анализатора - лист белой бумаги. 424
После этого источнику света придают такое положение, чтобы на бумаге получалось резкое изображение иглы, если этого нет, можно добиться лучшей чувствительности, поворачивая вправо или влево диск поляризатора.
1. Диск анализатора несколько раз устанавливают в положение «полутень» при пустом и закрытом ложе прибора, каждый раз несколько сбивая освещение и устанавливая «полутень». Положение «полутень» в нормально работающем приборе фиксируется при ±1°. Наибольшая отчетливость изображения полей достигается горизонтальным движением окуляра.
2. В начале определения в стеклянную трубку (2 дм) наливают дистиллированную воду, помещают ее в ложе прибора и устанавливают положение нулевой точки слабым вращением диска поляризатора. Берут отсчет по шкале. Среднее из 5 определений принимают за «ноль» отсчета, вносимый затем при расчетах со знаком (±).
3. В поляризационную трубку,, закрытую с одного конца стеклом и металлическим кольцом, наливают из стакана исследуемый раствор, формируя выпуклый мениск жидкости. Затем на него сбоку надвигают покровное стекло, укладывая резиновый уплотнитель, и осторожно, но плотно завинчивают металлическое кольцо. Избыточное натяжение колец не допускается, так как стекла пришлифованы. Они должны оставаться чистыми и прозрачными. Если образуются малые пузырьки воздуха, их следует перегнать в расширенную часть трубки, где они не будут мешать определению. Трубка с раствором укладывается в ложе прибора.
4. Световой пучок от источника света проходит сначала через поляризатор, а затем через трубку с раствором оптически активного вещества. Он отклоняется на некоторый угол А, который следует измерить. Для этого вращением диска анализатора вправо и влево добиваются равномерного освещения всех полей диска и исчезновения границ раздела между полями. В таком положении берут отсчет угла отклонения в градусах и по нониусу долей градуса. Для каждого раствора берется пять отсчетов и выводится среднее.
Расчет
Содержание крахмачаУо = —г—;-тг~,———— ,
у У [Ct]n-H-I-IOOO
где а - угол вращения прибора в градусах шкалы; V - объем гидролизата, CMJ; [а]о - удельное вращение углевода (фактор для крахмала средний 181), находят по таблицам; / - длина поляризационной трубки, дм; Я - навеска воздушно-сухого материала, г.
Удельное вращение для различных углеводов [a]D: глюкоза +52,8; сахароза +66,5; мальтоза +138,3; фруктоза -92,8; для крахмала пшеницы -182,7, риса-184,0, ржи-184,0.
425
Форма записи
№ образца Навеска.
г Объём гидро-лизата, см3 Отсчёт на поляриметре, град. Среднее на
поляриметре, град. Длина трубки, дм Mo Крахмал.
% Определение клетчатки весовым методом
Клетчатка - органическое вещество, на долю которого приходится 90% всей биомассы на нашей планете. Она составляет основную массу пожнивных остатков, растительного опада, лесной подстилки. Клетчатка необходима для нормальной работы желудочно-кишечного тракта человека и животных, она труднодоступный, но основной источник углерода для почвенной биоты, трансформация клетчатки - важный процесс для формирования гумуса почвы и обмена биогенных элементов в ней.
Чистая клетчатка или целлюлоза - полисахарид, нерастворимый в воде, но набухает в ней, нерастворим и в слабых кислотах.
