Практикум по агрохимии - 2-е изд. - Минеев В.Г.
ISBN 5-211-04265-4
Скачать (прямая ссылка):
Подготовка растений к анализу Среднюю пробу плодов, кочанов, клубней, листовых овощей доставляют с поля в лабораторию, обмывают водой, просушивают фильтровальной бумагой или марлей. Поскольку средняя проба составляется примерно из 10-20 экземпляров, измельчение всего материала представляет значительные трудности, поэтому корни и клубнеплоды делят 430 предварительно на сегменты. Например, клубень картофеля по вертикали делят на 6 - 8 частей и для анализа от каждого клубня берут одну из таких частей. При этом необходимо учитывать, чтобы отношение сердцевины корнеплода к его периферийной части оставалось бы примерно таким, как в целом корнеплоде.
Мелкие плоды и ягоды измельчают целиком. У листовых овощей в анализ берут половину листа от каждого растения, разделяя лист по средней жилке.
Полученный растительный материал измельчают на кафельной или пластмассовой пластинке ножом из нержавеющей стали или пластмассовой терке. Для сочных плодов можно применить гомогенизатор тканей. Недопустимо применение железных и медных предметов, поскольку железо и медь катализируют разрушение аскорбиновой кислоты. Две параллельные навески из одного образца берут на часовом стекле на технических весах.
Определение аскорбиновой кислоты (витамина С) по Мурри
Аскорбиновая кислота в растениях образуется из углеводов. Прорастание семян сопровождается интенсивным накоплением и в темноте и на свету аскорбиновой кислоты. Так, при прорастании семян ячменя в темноте содержание ее через день составляло 0,6 мг на 100 г сухой массы, через три дня - 1,7, через пять дней - 5,8, а через восемь -8,8 мг. Количество витамина С в листьях растений достигает максимума в фазе цветения, а затем резко снижается.
Накопление аскорбиновой кислоты в растениях в сильной степени зависит от условий их выращивания. В листьях, стеблях, плодах растений, выращенных в северных районах, витамина С значительно больше, чем в растениях, возделываемых на юге. В растительной продукции, выращенной в теплицах (защищенном грунте), витамина С значительно меньше, чем в продукции открытого грунта.
Растения на легких почвах содержат больше аскорбиновой кислоты по сравнению с теми же сортами растений, выращенных на тяжелых почвах.
Условия питания растений также оказывают значительное влияние на содержание в растениях аскорбиновой кислоты. Фосфорно-калийные удобрения обычно повышают содержание витамина С в растениях, а азотные удобрения, наоборот, понижают.
Больше всего витамина С в зеленых растениях, свежих овощах и фруктах. При хранении плодов и овощей содержание аскорбиновой кислоты понижается; значительная часть ее разрушается также при варке пищи.
431
31. Содержание витамина С в некоторых плодах и овощах (в мг на 100 г сырого веса)
Картофель 10-20 Яблоки 5-30 Белокочанная капуста 10-40 Вишня 5-15 Капуста цветная 50-150 Виноград 0-5 Морковь 5-10 Чёрная смородина 100-400 Томаты 20-40 Лимон 40-60 Лук репчатый 5-20 Шиповник 1000-4000 Лук зелёный 40-60 Зерно злаков 0 Аскорбиновая кислота H8C6O6, M = 176, обладает сильными восстановительными свойствами. В растительном организме легко осуществляется переход аскорбиновой кислоты в дегидроаскорбиновую и обратная реакция, поскольку в молекуле имеются 2 энольные группы
TO1 Г О 1
O=C -C=C-CH-CHOH - 2H+ О O=C-C - C-CH-CHOH
I I I II II I
ОН ОН CH2OH О О CH2OH
Водные экстракты растений, содержащие аскорбиновую кислоту, восстанавливают раствор синей краски 2,6-дихлорфенол-индофенол в бесцветное соединение. Эта реакция и составляет основу метода определения аскорбиновой кислоты.
Ход анализа
Навеску измельченного материала, 1-3 г для зеленых листьев и 5 -10 г для корнеплодов, берут на технических весах и помещают в фарфоровую ступку.
На кончике скальпеля добавляют кварцевый песок и приливают из цилиндра 20 см3 1%-й соляной кислоты, раствор кислоты прибавляют порциями по 5 см3 в процессе растирания.
Содержимое ступки растирают пестиком до гомогенной массы, растирание длится не более 10 мин. Носик ступки с наружной стороны смазать вазелином. В ступку приливают 5-10 см3 2%-го раствора мета-фосфорной кислоты для фиксации извлеченной аскорбиновой кислоты.
Гомогенат из ступки количественно переносят в мерную колбу на 100 см3, пользуясь воронкой без фильтра и стеклянной палочкой. Ступку, пестик и палочку многократно споласкивают 2%-м раствором мета-фосфорной кислоты, сливая промывную жидкость в ту же колбу, перемешивая содержимое колбы, и метафосфорной кислотой доводят до метки.
Содержимое колбы оставляют на 10 - 15 мин для лучшей экстракции аскорбиновой кислоты и осаждения белков. Гомогенат фильтруют через рыхлый бумажный фильтр в сухую коническую колбочку Или стакан на 100 см". 432
Из фильтрата берут пипеткой две параллельные пробы по 10 -20 см" и переносят в малые фарфоровые чашечки, диаметром 6-8 см, их содержимое титруют из микробюретки объемом 2-5 CMj синей краской 2-6-дихлорфенолиндофенола до появления ясно-розовой окраски, не исчезающей 1 мин. Каждую каплю краски размешивают стеклянной палочкой. Если фильтрат окрашен, то титрование проводят следующим образом: 5-10 см3 фильтрата помещают в пробирку и прибавляют 2 см3 дихлорэтана. Титруют в пробирке, слегка встряхивая, до окрашивания капли дихлорэтана на дне пробирки.
