Практикум по агрохимии - 2-е изд. - Минеев В.Г.
ISBN 5-211-04265-4
Скачать (прямая ссылка):
Фильтруют раствор в горячем состоянии через асбестовый фильтр, помещенный в трубку Аллена, в большую колбу Бунзена с помощью водоструйного или вакуумного насоса.
Промывают осадок закисной меди 7-8 раз малыми порциями горячей дистиллированной воды и количественно переносят его на фильтр.
? Осадок на фильтре должен быть покрыт водой, на воздухе не оставляют!
Осадок, промытый, с трубкой Аллена переносят на малую, приблизительно 250 см"", чистую колбу Бунзена. Растворяют осадок в трубке при выключенном насосе железоаммиачными квасцами (около 10 -15 см"), приливая их в коническую колбу, так как там могут быть следы закиси меди, а затем выливают в трубку. Осторожно растворяют осадок с помощью малой стеклянной палочки. Содержимое трубки промвают 5 -6 раз малыми порциями горячей воды при включенном насосе.
Раствор и промывные воды в малой колбе Бунзена не охлаждая, осторожно, при слабом перемешивании титруют раствором перманганата 0,02 или 0,05 н. до слабо-розовой окраски.
Расчет
1 CMj 0,1 н. KMnO4 соответствует 6,36 мг Cu. а см" • Nx KMnO4 соответствует Хмг Cu где а - объем перманганата (см"), пошедшего на титрование; X - количество меди в осадке (мг). По таблицам Бертрана находим:
XОм. соответствует а (мг) глюкозы, а далее:
г л го/1 a-P- 100
Содержание моносахаров [%] = ———jqqq— •>
где: а - мг глюкозы по таблицам Бертрана (см. ПРИЛОЖЕНИЕ, табл. 25); P - разведение 200/20; H - навеска воздушно-сухого вещества, г; 1000 - пересчет мг в г.
417
Определение суммы Сахаров растворимых углеводов
Ход анализа
Берут 50 CMj фильтрата в мерную колбу на 100 см3, приливают цилиндром 5 см" концентрированной HCl и ставят на водяную баню, предварительно нагретую до 800C.
В контрольную колбу налить 50 CMJ ВОДЫ И 5 см3 кислоты, опускают термометр, ставят на баню.
Гидролиз Сахаров проводят в бане при постоянном помешивании при температуре 68 - 70° С в течение 5 мин. по песочным часам.
Охлаждают раствор, добавляют 2-3 капли фенолфталеина, далее нейтрализуют его малыми порциями сухой соды, используя объем 100 мг на кончике скальпеля (до слабо-розовой окраски). Каждую порцию соды тщательно перемешивают круговым движением колбы не отрывая ее донышко от стола. Не допускать бурного вспенивания раствора. Доводят раствор до метки водой, тщательно перемешивают.
Используют раствор для определения суммы Сахаров. Так как в
растворе после гидролиза находятся только моносахариды, определение
ведут по методике, изложенной выше.
п Л Г0/1 В Р-100
Содержание суммы Сахаров [%] = ^ ^ ^
где В - мг глюкозы по табл. Бертрана (см. ПРИЛОЖЕНИЕ, табл. 25); P - разведение P = (200 • 100)/(50 • 20); H - навеска воздушно-сухого материала, г.
Далее можно рассчитать содержание непосредственно дисахаридов:
% дисахаридов = (% суммы Сахаров -% моносахаридов) ? 0,95
(0,95 - поправочный коэффициент, так как одна молекула сахарозы дает при гидролизе 0,95 молекулы глюкозы).
Определение небелкового азота и углеводов из одной навески
Суммарное количество небелкового азота в растительном материале удобно определять из одной навески с углеводами. При таком ходе анализа обеспечивается достаточно высокая точность определения.
Ход анализа
50 см" фильтрата помещают в колбу Кьельдаля с широким горлом, упаривают до 5-7 см" на электроплитке, охлаждают. Приливают в колбу Кьельдаля 7 см" концентрированной серной кислоты й озоляют раствор до бесцветного состояния. Обычно катализатор не добавляют.
Содержимое колбы Кьельдаля количественно переносят в отгонный аппарат и проводят определение на микрокьельдале или переносят в
418
соответствующую мерную колбу и проводят колориметрическое определение аммиачного азота с реактивом Несслера (см. с. 151 - 153).
Реактивы.
1. 4%-й раствор (CH3COO)2Pb.
2. 10%-й раствор Na2SO4.
3. HCl концентрированная (d= 1,12).
4. Натрий углекислый (сода) Na2CO3 ? H2O.
5. Фенолфталеин.
6. 4%-й раствор CuSO4.
7. Щелочной раствор сегнетовой соли C4H4O6KNa • 4H2O: 200 г «х.ч.» соли переносят в мерную колбу на 1 дм3, приливают ~ 300 см3 воды, добавляют 150 см3 «х.ч.» KOH или NaOH, доводят до метки. Отфильтровывают раствор через трубку Алена или стеклянный тигель-фильтр № 3 Или № 4.
8. Раствор железоаммиачных квасцов, подкисленный серной кислотой (NH4J2SO4 ? Fe2(SO4J3 ? 24H2O: 81 г квасцов переносят в мерную колбу на 1 дм3, растворяют в ~ 500 см3 воды, осторожно добавляют 108,7 см3 концентрированной серной кислоты, доводят до метки. Или вместо квасцов берут 50 г Fe2(SO4)} ? п H2O.
9. Раствор KMnO4 0,02 н. готовят из фиксанала.
Определение растворимых углеводов фотометрически с пикриновой кислотой (модификация Соловьева)
Моносахариды, имеющие альдегидную или кетонную группировку, могут восстанавливать динитросоединения, при этом образуются интенсивно окрашенные соединения. Окраска пропорциональна количеству углеводов в реакции, поэтому возможно их колориметрическое определение.
Используют реакцию восстановления пикриновой кислоты (2,4,6-тринитрофенола) в пикраминовую.
NO2 ОН
/ \ О // \
NO2 NO2 II NO2 NH2
