Практикум по агрохимии - 2-е изд. - Минеев В.Г.
ISBN 5-211-04265-4
Скачать (прямая ссылка):
Ход анализа
Навеску воздушно-сухого материала, грубого размола предварительно пропущенного через сито с диаметром отверстий 2 мм берут на аналитических весах (1 ± 0,0001 г), помещают в сухую коническую колбу на 300 CMj. В колбу приливают 30 см" смеси концентрированной азотной и уксусной кислот (1:20), плотно закрывают резиновой пробкой с обратным холодильником. Предварительно пробки покрывают фольгой или целлофаном, так как резина в этих условиях разрушается.
Колбу помещают на кипящую баню на 1 - 2 ч, периодически перемешивая содержимое. Надосадочная жидкость в процессе выщелачивания и окисления органики приобретает красно-бурую окраску, а навеска осветляется.
Рыхлый бумажный фильтр подбирают по диаметру воронки Бюх-нера и вырезают так, чтобы диаметр фильтра был больше нее на 2 см. Фильтры доводят до постоянного веса при 105°С, взвешивают с точностью до 0,0002 г и помещают в эксикатор.
Готовят воронку Бюхнера для горячего фильтрования. Бумажный фильтр осторожно укладывают на дно воронки, формируя «блюдце» с загнутыми краями. Воронку вставляют в колбу Бунзена.
Для плотного прилегания к воронке фильтр слегка смачивают горячей водой. Пропускают сначала кипящую воду, чтобы нагрелась воронка. Затем фильтруют горячую суспензию из конической колбы. Для отсасывания надосадочной жидкости подключают водоструйный насос.
Осадок клетчатки количественно переносят на фильтр и на фильтре 4-5 раз промывают горячей дистиллированной водой. Воду
426
тщательно отсасывают. Затем отключают насос и клетчатку промывают два раза, используя по 10 см" раствора горячей 0,2 M спиртовой щелочи, которая извлекает смолы, дубильные вещества, остатки жира, воска, частично белок.
Осадок после этого еще 4-5 раз промывают горячей дистиллированной водой, тщательно отсасывают воду, подключая насос. Чистую клетчатку обрабатывают после этого 10 см3 этилового спирта для обезвоживания.
Фильтр с осадком осторожно вынимают из воронки, помещают на часовое стекло, высушивают в шкафу при 1050C до постоянного веса, помещают в эксикатор и взвешивают. Обычно проводят два-три взвешивания.
Расчет
(а-Ь)'100
Содержание клетчатки [%] = -^-~ }
где а - масса фильтра с осадком, г; b - масса фильтра, г; H- масса навески, г.
Форма записи
№ образца Навеска, г Масса фильтра, г Масса фильтра с сухой клетчаткой, г Масса сухой клетчатки,г % клетчатки
1 2 3
Реактивы
1. Смесь кислот по объему конц. азотной (d = 1,4) 1 часть и уксусной кислоты 80%-й 20 частей, готовится непосредственно перед работой.
2. 0.2 M раствор спиртовой щелочи: 4 г щелочи растворить предварительно в небольшом объеме воды, добавить спирт до объема 500 см3.
Определение пектиновых веществ
Пектины - полисахариды, содержащиеся в плодах, корнеплодах, растительных волокнах. В определенных соотношениях с органической кислотой и сахаром, пектины образуют желе и студни, что широко используется в кондитерской промышленности. Максимальное содержание пектиновых веществ находится в белой части кожуры цитрусовых -до 30% на сухое вещество. В основе строения пектиновых веществ лежит полимерная цепочка остатков галактуроновой кислоты, соединенных кислородными мостиками, связь (1-4), в отличие от крахмала и клетчатки, где гликозидная связь устанавливается между остатками глюкозы.
Пектиновая кислота. Если часть ионов водорода в карбоксильной группе замещаются в кислоте на метальную группу - получаем пектины, при замещении на Ионы кальция, магния - пектаны, т.е. соли пектовой кислоты, в растительных объектах пектовая кислота связана с крахмалом,
427 целлюлозой и другими полисахаридами, такие соединения называют протопектинами. Пектиновые вещества в виде нерастворимого в воде протопектина находятся в стенках растительных клеток. Жесткость недозрелых плодов в значительной степени обусловлена присутствием протопектинов в большом количестве. При созревании эти соединения разрушаются и переходят в растворимое состояние. В клеточном соке в основном содержатся пектины и пектаны.
Примерное содержание пектиновых веществ в процентах от сухого вещества: томаты - 2,9; картофель - 2,0; морковь - 10,0; репа - 12,0; редис - 26,9. Существуют объемные, весовые и колориметрические методы их определения.
Пектиновые вещества переводят в раствор в виде пектиновой кислоты. Затем проводят осаждение кислоты раствором хлористого кальция. Полученный осадок промывают, высушивают, определяют вес пектата кальция и рассчитывают содержание пектиновой кислоты.
Ход анализа.
Навеску 25 ± 0,2 г свежего растительного материала растирают в фарфоровой ступке до однородной массы. Затем извлекают растворимые углеводы трехкратной обработкой этиловым спиртом. Первый раз используют 95%-й этанол, затем 80%-й. После этого навеску обрабатывают ацетатом и подсушивают на воздухе.
Осадок переносят в коническую колбу, приливают 100 см3 дистиллированной воды при t = 45°С, и выдерживают при этой температуре на водяной бане 30 мин. Содержимое колбы переносят в центрифужную пробирку и центрифугируют.
Надосадочную жидкость сливают через бумажный складчатый фильтр в мерную колбу на 250 CMj. Извлечение повторяют, добавляя 70 см3 и 70 смJ воды. Полученные экстракты объединяют в мерной колбе, доводят до метки. Этот раствор пригоден для определения водорастворимых пектинов - раствор 1.
