Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Кэтти Д. -> "Антитела. Методы. Книга 1" -> 64

Антитела. Методы. Книга 1 - Кэтти Д.

Кэтти Д., Райкундалия Ч., Браун Дж., Линг Н.Р. Антитела. Методы. Книга 1 — М.: Мир, 1991. — 287 c.
ISBN 5-03-002363-1
Скачать (прямая ссылка): metodikn11991.djvu
Предыдущая << 1 .. 58 59 60 61 62 63 < 64 > 65 66 67 68 69 70 .. 122 >> Следующая

одну антигенную детерминанту. Такие антитела не обладают преципитирующими
свойствами. В таком случае преципитация антигена достигается при
использовании комбинации моноклональных антител различной специфичности,
которые распознают две различные детерминанты на молекуле белка.
Дальнейшие исследования возможностей использования моноклональных антител
неожиданно встретили затруднения, обусловленные распознаванием
моноклональными антителами только нативной формы антигена. Например,
моноклональные антитела к клеточным антигенам часто не распознают
антиген, перенесенный на нитроцеллюлозную мембрану с полиакриламидных
гелей после проведения электрофореза растворимых клеточных экстрактов в
присутствии ДСН. В данном случае антиген денатурируется и поэтому не
связывается с антителами. Подобным образом моноклональные антитела,
которые окрашивают клетки в суспензии, могут оказаться непригодными для
иммуногистологических исследований парафиновых срезов зафиксированного
формалином материала. Эти соображения наводят на мысль, что как выбор
метода скрининга, так и природа материала, используемого для иммунизации
мышей, являются важными факторами, влияющими на свойства полученных в
конечном итоге моноклональных антител.
Серологические свойства моноклональных антител не всегда можно
предсказать по известным серологическим свойствам адсорбированных
поликлональных антисывороток. В случае поликлональных реагентов
взаимодействие с антигеном осуществляется благодаря комбинированному
эффекту различной специфичности антител, которые 6 совокупности
идентифициру-
150
Глава 3
f
ют определенные типы клеток или белков и не распознают другие образования
и структуры. Моноклональные антитела к. корпускулярным антигенам или
гликопротеинам могут проявлять неожиданные серологические свойства, а
именно окрашивать различные клетки или же связывать большое число
разнообразных гликопротеинов. Такие антитела, как правило, распознают
специфические углеводные структуры, которые могут входить в состав самых
разнообразных белков. Примером служит углеводная структура З-фукозил-Ы-
ацетиллактозамина, которая может быть обнаружена в кислом гликопротеине
а-1, лактоферрине, а-амилазе секрета околоушной железы, цервикальном
муцине и в секреторном компоненте. Моноклональные антитела различной
специфичности могут найти практическое применение во многих областях
биологии и медицины. С помощью серологических исследований следует
предварительно определить, что определенные моноклональные антитела
действительно проявляют специфичность именно в данной тестирующей
системе.
В целом использование моноклональных антител в экспериментальных и
клинических исследованиях помогает устранить проблему, связанную с
неспецифическими реакциями обычной поликлональной антисыворотки,
обусловленными присутствием посторонних антител, а также связыванием с
антигеном компонентов неиммуноглобулиновой природы. Однако, как было
сказано выше, исследователю может потребоваться более одного препарата
моноклональных антител, специфичных к определенному антигену, с тем чтобы
использовать такую комбинацию антител для проведения широкого спектра
экспериментов.
10. Перспективы исследований
Гибридомная технология интенсивно развивается. По-видимому, менее чем
через десять лет будет получено около 10& различных типов моноклональных
антител различной специфичности, синтезированных гибридомами, полученными
при слиянии клеток крыс и мышей. Большинство из этих гибридом будет
рассредоточено во всем мире по отдельным лабораториям. Очевидно, в
пределах различных центров некоторые виды гибридом будут многократно
дублироваться. Это создает проблему иного плана, чем просто явное
повторение. Важным свойством моноклональных антител является то, что они
могут быть получены в количествах, достаточных для снабжения ими большого
числа лабораторий, занимающихся сходными или дополняющими данную тему
анализами. Результаты этих исследований можно сопоставить и сравнить.
Однако часто различ-
Моноклональные антитела мыши
ные лаборатории используют свои собственные моноклональные антитела для
идентификации одного и того же антигена. Это определенно затрудняет
возможность сопоставлять данные, полученные в различных центрах. Данная
проблема может быть решена с помощью проведения международных рабочих
совещаний, на которых несколько лабораторий имеют возможность сравнить
свойства моноклональных антител при использовании различных технических
приемов. Например, было получено множество различных моноклональных
антител к человеческим лейкоцитарным антигенам. Два рабочих совещания
(Париж, 1983; Бостон, 1984) организовали тестирование моноклональных
антител к антигенам Т-, В-лимфоцитов и клеток миелоидного ряда в
цитологической, гистологической и биохимической системах. В результате
различные образцы МКА, реагирующие с одним и тем же дифференцировочным
антигеном, объединили в группы (кластеры), которым присвоили определенный
Предыдущая << 1 .. 58 59 60 61 62 63 < 64 > 65 66 67 68 69 70 .. 122 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed