Справочник по производству спирте. Сырье, технология и технохимконтроль - Яровенко В.Л.
Скачать (прямая ссылка):
Все эти условия регламентированы. Регламенты на производство указанных культур разработаны ВНИИПрБ.
Ниже приводятся составы питательных сред и режимы выращивания глубинным способом в производственных ферментаторах наиболее часто встречающихся на производстве культур End. bispora, Asp. batatae-61 и Вас. diastaticus.
Производственная питательная среда для культивирования End. ibispora имеет следующий состав (в %):
Кукурузная мука 2,5
Соевая мука 1,5
Кукурузный экстракт 1,5
Дигндроортофосфат калия (диаммоннйфос- 0,5 фат)
Подсолнечное масло или китовый жир (пено- 0,05 гаситель)
Вода 93,95
Режим выращивания следующий: температура среды 26-28° С, продолжительность 72-84 ч, частота вращения мешалки 200- 220 мин-1, расход стерильного воздуха 20-30 м3/ч иа 1 м3 среды.
При выращивании культуры гриба Asp. batatae-61 питательная среда имеет следующий состав (в %):
Грубый фильтрат барды 97,3
Мука 1,5
Кукурузный экстракт 0,5
Нитрат аммония 0,5
Карбонат магния 0,2
Обогащенная питательная среда содержит следующие компоненты (в % по массе):
Грубый фильтрат барды 94,1
Кукурузная мука 4,0
Нитрат аммония 1,0
Кукурузный экстракт 0,5
Карбонат кальция 0,2
Карбонат магния 0,2
Режим выращивания следующий: температура среды 30-32° С, продолжительность 60 ч, расход воздуха иа аэрацию при использовании лучевых аэраторов 15-20 м'/ч на 1 м3 среды.
При выращивании термофильной бактериальной культуры Вас. diastaticus питательная среда имеет следующий состав (в % по массе):
Кукурузный крахмал 0,3
Кукурузная мука 0,0
Карбонат кальция 0,2
Нитрат аммония 0,4
Кукурузный экстракт 0,5
Вода 98,0
Для доведения рН среды до 7,0 в нее добавляют раствор карбоната или гидроксида натрия.
Режим выращивания следующий: температура среды 60-62° С, продолжительность 6-8 ч, расход воздуха при распылении через форсунку 40 м3/ч на 1 м3 среды. Температура подаваемого стерильного воздуха 60-65е С, давление в ферментаторе 0,015-0,020 МПа.
ВЫРАЩИВАНИЕ КУЛЬТУР МИКРООРГАНИЗМОВ-ПРОДУЦЕНТОВ ФЕРМЕНТОВ - ПОВЕРХНОСТНЫМ СПОСОБОМ
Для производства осахарнвающих препаратов Амилоризин Пх и Глюкаваморин Пх применяют поверхностный способ выращивания продуцентов Asp. oryzae 740-А2 и Asp. awamori-673. Для их производства используютси чистые культуры специально отобранных штаммов плесневых грибов, которые допущены Министерством здравоохранения СССР к применению.
Процесс производства препаратов Глюкаваморин Пх и Амилоризин Пх состоит из следующих стадий: выращивание маточной культуры, выращивание посевной культуры в растильиых камерах, стерилизация питательной среды, раскладка питательной среды, выращивание культуры гриба в растильиых камерах, дробление, сушка и упаковка готовых препаратов.
Выращивание маточной культуры. Маточная культура выращивается по схеме: культура гриба в пробирке->маточная культура в малых колбах вместимостью 0,25 л->-маточиая культура в больших колбах вместимостью 1 л.
Полученные из Харьковского филиала ВНИИПБП чистые культуры микроорганизмов Asp. oryzae 740-А2 и Asp. awamori-673 рассевают на агаризованиую среду. Выращивание ведется 3- 4 сут при температуре 30° С. К концу процесса активность культур в пробирке должна составлять для Asp. oryzae АС=410ч-440, для Asp. awamori DiA=IOO ед./г.
Для приготовления агаризованной среды 10%-иая вытяжка из отрубей выдерживается в течение 1 ч на кипящей водяной бане, фильтруется через марлю, смешивается в соотношении 1:1с вытяжкой из солодовых ростков, выдержанной в течение 1 ч прн температуре 30° С и отфильтрованной через марлю. В полученной среде расплавляется 2,0-2,5% агара. Отрубно-ростковын агар стерилизуется при давлении 0,1 МПа в течение 30-40 мин.
Культура гриба в пробирке хранится в холодильнике при температуре 6-100C в течение 1-1,5 мес.
Культура гриба, выращенная в пробирках, служит для засева среды в малых маточных колбах. Среду в больших колбах засевают посевным материалом из малых колб. Расход суспензии составляет не менее 2 мл для малых и 5 мл для больших колб. Состав среды в малых и больших колбах одинаков: при выращивании маточной культуры в колбах в качестве питательной среды используются пшеничные отруби. Влажность засеянной среды в колбах должна составлять 45-50%. Количество среды в малых колбах составляет не менее 10, в больших--не менее 25 г.
Колбы со средой для культуры Asp. awamori стерилизуют в течение 1 ч прн давлении 0,1 МПа. Режим выращивания гриба для больших и малых колб одинаков.
После засева маточных колб их содержимое тщательно встряхивается для равномерного распределения конидий по всей поверхности среды, и колбы помещаются в термостат с температурой 3O0C на 3-4 сут. Маточная культура гриба Asp. oryzae выращивается по тем же схеме и режимам, что и при производстве Глюкаваморина Пх.
Активность культур в малых маточных колбах должна составлять: для Asp. oryzae AC = 380-=-420, для Asp. awamori ГлА = = 100-нІбО ед./г; в больших маточных колбах: для Asp. oryzae AC = 380-^-420, для Asp. awamori ГлА = 100-И60 ед./г.
Готовая маточная культура может храниться до 1 мес при температуре 6-10е С.
