Справочник по производству спирте. Сырье, технология и технохимконтроль - Яровенко В.Л.
Скачать (прямая ссылка):
Постепенно, во избежание вскипания среды, открывается вентиль на выхлопной линии, давление в аппарате медленно снижается до 0,03-0,05 МПа. Затем в аппарат постепенно подается стерильный воздух для поддержания в нем избыточного давления 0,02-0,03 МПа, а в рубашку аппарата поступает холодная вода.
После охлаждения массы до 27 С производится засев среды посевной культурой, полученной на второй стадии, в количестве 0,5-1,0%. Засев ведется через посевной лючок с соблюдением условий стерильности прн минимальном движении окружающего воздуха.
Перед засевом прекращается подача воздуха в аппарат и одновременно закрывается вентиль на выхлопной линии. Вокруг посевного лючка зажигается факел из ватных тампонов, смоченпых спиртом, лючок открывается и через зону огня вносится посевная культура из колб. После этого лючок быстро закрывается, включается подача воздуха и приоткрывается вентиль на выхлопной линии. В аппарате устанавливается избыточное давление 0,02-0,03 МПа.
Интенсивность аэрации среды контролируется через смотровое стекло с учетом показаний расходомера.
Показатели питательной среды должны быть в пределах:
рН 5,2-5,7
Концентрация сухих веществ, % 5,5-6,0 Температура, °С 27-28
Процесс выращивания посевного материала должен проходить при следующих условиях:
Температура внутри аппарата, °С 27
Давление в аппарате в процессе 0,02-0,03
роста, МПа
Расход воздуха на аэрирование 16
1 м3 питательной среды, м3/ч
Способ перемешивания Двухъярусной тур-
бинной мешалкой, ш=350 мин-1
Температура воздуха иа входе в 35-40
аппарат, "С 24
Продолжительность выращивания, ч
Спускная линия, пробоотбориый узел и нижний спускной вентиль в течение всего периода ферментации должны находиться под паром. Температура в процессе ферментации поддерживается автоматически путем подачи холодной и теплой воды в рубашку.
В готовой посевной культуре не должно быть посторонней микрофлоры; мицелий должен представлять собой длинные ветвистые гифы с однородной протоплазмой, биомасса - средней густоты и равномерно распределенная в объеме пробы.
Производственный цикл посевного аппарата складывается из следующих операций (в ч):
Мойка и осмотр аппарата 1,0-1,5
Проверка на герметичность 0,5-1,0
Проверка давления н стерилизация аппарата 2,5
Загрузка средой 0,5
Подъем давления и стерилизация питательной 1,5 среды
Охлаждение и засев питательной среды 2,0-3,0
Выращивание посевной культуры 18-24
Передача посевной культуры в ферментатор 0,5
Общая продолжительность цикла 25-34
Через 12 ч от начала выращивания и перед посевом в ферментатор с соблюдением условий стерильности отбираются пробы из инокулятора для определения рН, концентрации сухих веществ, загрязненности посторонней микрофлорой. При обнаружении посторонней микрофлоры культуру из аппарата сливают и посевную культуру готовят заново. Перед сливом инфицированную культуру стерилизуют в течение 2 ч паром при температуре 126-132? С и давлении 0,18-0,2 МПа й подают на биологическую очистку.
Допускается хранение посевной культуры в течение нескольких часов в инокуляторе в охлажденном виде (12-15°С). При этом в рубашку инокулятора подаетси вода, аэрация сохраняется посто-
ві
янно. Количество выделяемого биологического тепла в процессе роста культуры составляет 5000-6300 кДж/ч на 1 м3.
Производственное выращивание культуры. Процесс выращивания глубинной культуры Asp. awamori-466 в производстве осуществляется в ферментаторе из нержавеющей стали в стерильных условиях при постоянном перемешивании и аэрировании среды. Технологический цикл состоит нз следующих операций: подготовка ферментатора к приему питательной среды, приготовление питательной среды, стерилизация питательной среды, охлаждение и засев питательной среды в ферментаторе, ферментация.
Ферментатор, в котором выращивается глубинная культура, снабжен рубашкой для обогрева и охлаждения, аэрирующим устройством, подводами для пара, посевной н спускной линиями, гильзой для манометра н термометра, узлом отбора проб, пеногаснтель-ным бачком и индивидуальным воздушным фильтром.
Подготовка ферментатора к приему питательной среды производится следующим образом. После освобождения от культуральной жидкости ферментатор моют водой из шланга, осматривают снаружи и внутри. Затем аппарат вместе с прилегающими к нему коммуникациями проверяют на герметичность воздухом при давлении 0,07 МПа с помощью мыльной пены.
При полной герметизации аппарата и прилегающих коммуникаций приступают к их одновременной стерилизации. Для стерилизации ферментатора острый пар подают на аэратор, линию подачи питательной среды, спускную линию и линию передавливания посевного материала. Нагрев аппарат, закрывают вентиль иа выхлопной воздушной линии и поднимают давление. Стерилизацию ведут при температуре 120-1250C1 давлении 0,2 МПа в течение 1 ч. Избыточное давление сбрасывается через выхлопной вентиль.
По окончании стерилизации отключают от ферментатора 13 пе-ногасительный бачок и индивидуальный воздушный фильтр и охлаждают аппарат до 50-55° С. Поддерживая давление в аппарате 0,02-0,03 МПа, сливают образовавшийся конденсат и приступают к приему стерильной и охлажденной до 27° С питательной среды.
