Практикум по аналитической химии. Анализ пищевых продуктов - Кореиман Я.И.
ISBN 5-89448-184-8
Скачать (прямая ссылка):
Время удерживания зависит от природы вещества, природы и типа сорбента, температуры колонки и испарителя, размеров колонки, природы и скорости газа-носителя.
Рис. 37. Дифференциальная хроматограмма: туд. - время удерживания вещества; h - высота пика; f-i()t5 - ширина пика, измеренная на середине высоты; 0 - момент ввода пробы
В основе идентификации веществ находятся:
¦ сравнение времени удерживания определяемого компонента и стандартного вещества при условии, что анализ выполнен в строго идентичном режиме;
¦ сопоставление времени удерживания определяемого компонента с табличными данными;
¦ применение веществ-тестеров, их добавление к пробе увеличивает параметры хроматографического пика.
Количественный анализ. Количественные характеристики хроматограммы - высота и площадь поверхности пика. Площадь пика пропорциональна количеству вещества, ее рассчитывают как произведение высоты пика (h) и ширины (|Ыо,5), измеренной на середине высоты:
S = h • Цо>5.
Методы количественного определения.
Метод нормировки. Рассчитывают площади всех пиков, сумму площадей пиков принимают за 100 %. Массовую долю каждого компонента в смеси (со;, %) вычисляют по формуле:
где Sj — площадь пика определяемого компонента, мм2; ^Sn -
i«l
сумма площадей всех пиков, мм2.
Метод абсолютной градуировки. Для серии стандартных растворов в идентичных условиях получают хроматограммы и рассчитывают площади пиков. Строят градуировочный график в координатах S = f (с). По хроматограмме анализируемого вещества рассчитывают площадь пика и по градуировочному графику находят его концентрацию. Этот метод наиболее пригоден для серийных анализов.
Метод внутреннего стандарта. В анализируемую пробу вводят известное количество стандартного вещества, образующего на хроматограмме отдельный пик. Измеряют параметры пиков стандартного и анализируемого веществ, рассчитывают площади пиков. Массовую долю компонента в пробе ((л)., %) вычисляют по формуле:
СО; = -^-*Г*100,
о
°сг
где Sj и SC1 - площади пиков анализируемого и стандартного веществ соответственно, мм2; г - отношение массы стандарта к массе пробы.
Лабораторная работа № 67 АНАЛИЗ СМЕСИ СПИРТОВ
Определение основано на непосредственном хроматографировании смеси алифатических спиртов с последующим их детектированием пламенно-ионизационным детектором. Разделение смеси спиртов происходит вследствие различной растворимости компонентов в неподвижной жидкой фазе (полиэтиленгликоль,) при движении газообразной смеси в потоке газа-носителя.
Ц ,е л ь работы: овладеть навыками идентификации и определить содержание спиртов в смеси методом газожидкостной хроматографии.
Приборы, посуда и реактивы
Хроматограф с пламенно-ионизационным детектором.
Хроматографическая колонка (длина 3000 мм, диаметр 4 мм).
Неподвижная фаза - полиэтиленгликоль Carbowax 4000 в количестве 15 % от массы твердого носителя.
Твердый носитель неподвижной фазы - диатомитовый кирпич с диаметром частиц 0,25-0,50 мм.
Газ-носитель - гелий.
Микрошприц вместимостью 10 мм3.
Металлическая линейка.
Анализируемая смесь спиртов.
Условия хроматографирования: температура испарителя 150 °С; температура термостата колонки 150 °С; температура термостата детектора 180 °С; скорость газа-носителя и водорода 100 см3/мин; скорость воздуха 500 см3/мин; скорость движения ленты самописца 10 мм/мин.
Порядок выполнения работы
Анализ. Перед выполнением работы необходимо изучить инструкцию к хроматографу. Включают прибор согласно инструкции. После установления на хроматограмме стабильной нулевой линии в канал испарителя микрошприцем вводят анализируемую смесь спиртов, объем пробы 1,00 мм3. Получают хроматограмму, которая описывает зависимость аналитического сигнала от времени удерживания. Отключают прибор согласно инструкции. По хроматограмме выполняют качественный и количественный анализ. Варианты хроматограмм представлены на рис. 38-45.
Обработка хроматограммы.
¦ По полученной хроматограмме находят время удерживания для каждого компонента смеси:
где t - расстояние с момента ввода пробы до появления максимума на хроматограмме, мм; и - скорость движения ленты самописца, мм/мин.
? По времени удерживания спиртов (табл. 27) идентифицируют спирты, содержащиеся в анализируемой смеси.
Таблица 27
Время удерживания спиртов
Спирт Туд,, с Спирт V» с
СНзОН 75 С4Н9ОН 270
С2Н5ОН ‘ 90 И30-С4Н9ОН 320
С3Н7ОН 130 С5Н,,ОН 390
И30-С3Н7ОН 200 C6Hi3OH 480
? Методом нормировки находят содержания спиртов в пробе. Для этого измеряют геометрические параметры пиков и рассчитывают цлощади всех пиков на хроматограмме, сумму площадей пиков принимают за 100 %,
