Кроветворная и лимфоидная ткань - Лурия Е.А.
Скачать (прямая ссылка):
Для объяснения механизма взаимодействия иммунных лимфоцитов с клетками-мишенями выдвинуто предположение о том, что иммунный лимфоцит несет на своей поверхности детерминанту антитела, которая обусловливает специфическое соединение лимфоцита с клеткой, имеющей соответствующий антиген (Pappenheimer, Scharff, 1959). Эта гипотеза нашла экспериментальное подтверждение и уточнение в ряде исследований (Б. Д. Брондз, 1962, 1963, 1964, 1968, 1969; Govaerts, 1960; Rosenau, Moon, 1961).
Используя для иммунизации аллотрансплантаты донора, отличающегося по ряду антигенов тканевой совместимости локуса Н-2 от линии реципиента, Б. Д. Брондз (1969) получал цитотоксический эффект в культурах клеток реципиента при добавлении иммунных лимфоцитов. Если в качестве мишеней использовались клетки третьей линии, содержащие 1 из 4, 2 из 6 или 5 из 8 донорских антигенов, чужеродных для реципиента, цитотоксический эффект не наблюдался. В случае, если клетки-мишени содержали 5 из 6 или 8 из 9 соответствующих антигенов (по которым различались донор и реципиент), в культурах происходил иммунный лизис клеток-мишеней, однако цитотоксический эффект был снижен. При добавлении к культурам клеток-мишеней двух популяций лимфоцитов, каждая из которых иммунна к части аллоантигенов, цитотоксический эффект не наблюдается. Отсюда была выдвинута гипотеза о поливалентной специфичности иммунных лимфоцитов, способных оказывать цитотоксический эффект на клетки-мишени лишь при полном или почти полном соответствии аллоантигенов этих клеток и антидетерминант лимфоцитов.
Однако имеются некоторые возражения против данного объяснения механизма ЦЭ, оказываемого лимфоцитами на клетки-мишени. Показано, что ядра иммунных лимфоцитов, максимально освобожденные от цитоплазмы, способны разрушать клетки-мишени (Г. Я. Свет-Молдавский, И. Ю. Черняховская, 1969). Эти авторы считают, что гибель мишеней обусловлена миграцией нуклеиновых кислот и рибосом от иммунных лимфоцитов в клетку-мишень.
Цитотоксический эффект в культурах можно воспроизвести, используя лимфоциты от неиммунного донора при соблюдении специальных условий (Perlmann a. oth., 1968; Holm, Perlmann, 1967). Если на клетки, находящиеся во взвеси или в монослое, нанести антиген (тиреоглобулин или сывороточный альбумин), который сорбируется на их поверхности, а затем ввести в инкубационную среду специфическую антисыворотку, то на поверхности клеток образуется комплекс антиген — антитело. При введении в эту систему неиммунных сингенных, аллогенных или ксеногенных лимфоцитов происходит налипание их на клетки, несущие этот комплекс. В дальнейшем наблюдается лизис клеток-мишеней. И в этом случае для лизиса необходим прямой контакт клеток-мишеней с лимфоцитами, которые в ходе реакции остаются живыми. Реакция ингибируется анти-метаболитами и антилимфоцитарными сыворотками. Предполагается, что для действия лимфоцитов на обработанные клетки-мишени необходимо, чтобы лимфоцит был активирован комплексом антиген — антитело, находящимся на поверхности мишени.
Специфическое воздействие на популяцию неиммунных лимфоцитов оказывают вещества, стимулирующие появление митозов. К ним относятся ФГА (Holm, Perlmann, 1965,
1967, 1969; Moller, 1965; Hellstrom, Hellstrom, 1967), стреп-толизин, фильтрат стафилококка (Holm, Perlmann, 1965) и другие агенты. Оказалось, что лимфоциты, стимулированные данными веществами, кроме повышения митотической активности и реакции бласттрансформации, проявляют цитотоксическую активность при добавлении их к клеткам-мишеням. Цитотоксический эффект коррелирует с уровнем синтеза ДНК и с реакцией бласттрансформации лимфоцитов, индуцированных митогенами. Можно предположить, что изменения в свойствах поверхности и в подвижности активированных лимфоцитов вовлечены в эту реакцию.
Цитотоксический эффект in vitro представляет собой двухступенчатую реакцию, включающую активацию лим-
фоцитов и лизис мишеней. В том случае, если популяция лимфоцитов получена от предварительно иммунизированного донора, синтез белка в лимфоцитах необходим для воспроизведения цитотоксического эффекта в культуре. При использовании других моделей (образовании комплекса антиген—антитело на поверхности мишени и при активации лимфоцитов митогенами) синтез белка не является необходимым условием для воспроизведения цитотоксичес-кой реакции. Однако во всех описанных системах необходим непосредственный контакт лимфоцитов с клетками-мишенями.
Существенно, что при воспроизведении модели разрушения мишеней лимфоцитами от предварительно иммунизированного донора на каждую клетку-мишень налипает большинство добавленных в культуру лимфоцитов, между тем как иммунные клетки составляют лишь незначительную часть лимфоидной популяции. Таким образом, присутствие нескольких процентов сенсибилизированных клеток обусловливает прилипание неиммунной популяции лимфоцитов к клеткам-мишеням. Механизм этого явления остается невыясненным. Вероятно, он осуществляется под воздействием каких-то гуморальных факторов.
Лизис клеток-мишеней in vitro может происходить не только в результате их прямого контакта с лимфоцитами, но и под действием цитотоксических веществ, которые вырабатываются при известных условиях культивирования. Так, в культурах лимфоцитов, полученных от доноров с предварительно выработанной реакцией замедленной повышенной чувствительности (например, к туберкулину, бычьему гамма-глобулину, яичному альбумину и др.), в присутствии этого антигена в культуральной среде накапливается цитотоксическое вещество, разрушающее клетки-мишени, хотя они и не имеют отношения к антигену, используемому для сенсибилизации (Ruddle, Waksman, 1968).
