Кроветворная и лимфоидная ткань - Лурия Е.А.
Скачать (прямая ссылка):
То же 93, 115
В культурах костного мозга, селезенки и перитонеального экссудата нормальных доноров присутствие туберкулина в среде не влияло на процесс колониеобразования (табл.7). Культуры от сенсибилизированных доноров без добавления туберкулина в питательную среду имели обычную морфологию. Однако введение в среду туберкулина вызывало существенное изменение эффективности колониеобразова-ния некоторой категории сенсибилизированных культур. Из данных табл. 7 видно, что присутствие туберкулина не влияет на число колоний в культурах селезенки и костного мозга от вакцинированных морских свинок. Лишь у одного донора, взятого на 27-й день после вакцинации адъювантом Фрейнда, клетки костного мозга и селезенки обнаружили снижение интенсивности колониеобразования соответствен-
но
Рис. 41. Подавление образования колоний фибробластов в культурах клеток перитонеального экссудата туберкулнн-чувствительных морских свинок н присутствии туберкулина в питательной среде. Слева контрольная культура, справа культура, в среду которой добавлен туберкулин.
но и 2 и 3 раза. В то же время в культурах перитонеального экссудата вакцинированных доноров добавление туберкулина приводит к резкому угнетению колониеобразовання (рис. 11). Степень подавления числа колоний в культурах экссудата от морских свинок, иммунизированных живой вакциной БИЖ, составляет от 4 до 130, а при культивировании перитонеального экссудата от доноров, сенсибилизированных за 35 дней до получения клеточных суспензий путем введения адъюванта Фрейнда, достигает 77 раз. В некоторых культурах в присутствии туберкулина происходит практически полное подавление образования колоний. Вместе с тем в культурах экссудата, взятого на 18-й и 27-й деньиос-ле сенсибилизации адъювантом Фрейнда, присутствие туберкулина практически не снижает эффективности коло-ннеобра ювания. Обращает иа себя внимание тот факт, что введение донорам адъюванта Фрейнда влияет на увеличение числа колониеобразующих клеток среди перитонеальных макрофагов. Столь же резкое подавление эффективности колониеобразованпя, как в культурах клеток перитонеального экссудата, наблюдается и в культурах клеток лимфатических узлов от сенсибилизированных доноров
в присутствии туберкулина в среде. Тот факт, что в культурах костного мозга и селезенки подавление эффективности колониеобразования (ЭКО) практически не отмечается, а в культурах клеток перитонеального экссудата и лимфатических узлов оно выражено в резкой степени, может зависеть от количества иммунокомпетентных клеток в каждой из этих популяций при подкожной иммунизации.
По сравнению с другими моделями описанная система имеет две особенности.
1. Эффект подавления учитывается не по переживанию клеток-мишеней, а по их способности к образованию клонов, т. е. по интенсивности их пролиферации.
2. Эффект подавления проявляется в данном случае в собственной клеточной популяции: клетки-мишени не добавляются в систему извне, а являются членами исследуемого клеточного коллектива.
Подавление миграции макрофагов
Кооперативное взаимодействие клеток в иммунологически активных клеточных популяциях ярко выступает и в другой модели: в феномене задержанной миграции макрофагов.
Эта модель позволяет анализировать роль и поведение не только лимфоцитов, но и макрофагов в иммунологических процессах. При эксплантации in vitro лимфатических узлов, селезенки и взвеси клеток перитонеального экссудата от доноров с выработанной реакцией ЗПЧ в присутствии специфического антигена наблюдается подавление миграции макрофагов (Carpenter, 1963; David a. oth., 1964). Если для культивирования использовать материал от донора, вырабатывающего только антитела, то в присутствии антигена миграция макрофагов не тормозится.
Показано, что уже малое количество иммунных лимфоцитов, составляющих незначительный процент в популяции, обусловливает ингибирование миграции макрофагов. Феномен сохраняется и при разведении в 50 раз перитонеального экссудата от донора с реакцией ЗПЧ перитонеальными макрофагами от неиммунного животного. При этом миграция макрофагов подавляется во всей популяции (Bloom a. oth., 1966; David, 1966). Полученные данные позволяют выдвинуть предположение, что торможение миграции макрофагов осуществляется при помощи гуморального медиатора, который образуется при контакте иммунных лимфоцитов с ан-
тигеном, а не является результатом непосредственного клеточного взаимодействия. На такую возможность указывает подавление миграции макрофагов из несенсибилизирован-ных фрагментов лимфоидных органов при культивировании их в том же сосуде, что и фрагментов от гиперчувствитель-ных доноров в присутствии антигена. Другими словами, в питательной среде из-под культур лимфатических узлов, гиперчувствительных к бычьему гамма-глобулину морских свинок, при добавлении антигена образуется фактор, препятствующий выселению макрофагов из неиммунных лимфатических узлов (Halpern a. oth., 1967).
Фактор, ингибирующий миграцию макрофагов, появляется в среде через 6—8 часов контакта лимфоцитов с антигеном и продолжает продуцироваться в течение 4 дней (Thor a. oth., Svejcar a. oth., 1968). Показано, что появление фактора, ингибирующего миграцию макрофагов, в среде блокируется ингибиторами белкового синтеза. Отсюда следует, что фактор синтезируется в клетках de novo, а не просто освобождается при контакте с антигеном. Известны некоторые биохимические характеристики фактора, ингибирующего миграцию макрофагов. Фактор не диализуется и выдерживает нагревание при 56° в течение 30 минут. На него не оказывают действия РНК-аза и ДНК-аза, но он разрушается протеолитическими ферментами. Молекулярный вес фактора, ингибирующего миграцию макрофагов, составляет 60 ООО — 80 ООО. При изучении в электрофорезе показано, что фактор, ингибирующий миграцию макрофагов, содержит альбумин и а-глобулин.
