Кроветворная и лимфоидная ткань - Лурия Е.А.
Скачать (прямая ссылка):
2. РЕАКЦИЯ ЗАМЕДЛЕННОЙ ПОВЫШЕННОЙ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ (ЗПЧ) IN VITRO
Основные закономерности реакции замедленной повышенной чувствительности in vivo и задачи исследования этого процесса в культурах in vitro
Реакция лимфоидной ткани на чужеродные антигены проявляется не только в антителообразовании, но и в развитии замедленной повышенной чувствительности. Наиболее выражен этот тип иммунологического ответа при трансплантации чужеродной ткани и при внутрикожном введении антигенов. Клетками, непосредственно осуществляющими реакцию ЗПЧ, являются лимфоциты. Они инфильтрируют трансплантат или участок кожи, содержащий чужеродный антиген, и вызывают разрушение тканей. Гуморальные антитела не играют существенной роли в этом процессе. Важно отметить, что ряд аутоиммунных заболеваний (болезнь Ха-шимото, острый гломерулонефрит, ревматический полиартрит и др.) протекает по типу реакции замедленной повышенной чувствительности. В этих случаях иммунологическая активность лимфоидной ткани Направлена против тканевоспецифических антигенов собственного организма.
Морфология реакции ЗПЧ хорошо изучена на модели отторжения аллотрансплантатов. В регионарном лимфатическом узле наблюдается ряд последовательных морфологических изменений. В течение первых суток в малых лимфоцитах регионарного лимфатического узла появляются вакуоли, окруженные однослойной мембраной. Через 48
часов вакуолизированные клетки исчезают. На 4—5-й дёнь в корковой зоне лимфатического узла скапливаются большие пиронинофильные лимфоидные клетки; они имёют 11—20 мк в диаметре, одно или несколько ядрышек, пузырьковидное ядро. Цитоплазма этих клеток резко базо-фильна, содержит много свободных рибосом и, как правило, лишена эргастоплазмы. Количество этих клеток увеличивается к 11-му дню. Они не связаны с вторичными фолликулами, а располагаются в корковой области между ними. Накопление крупных пиронинофильных клеток в лимфатических узлах совпадает с периодом резорбции аллотрансплантата.
Отторжение трансплантата осуществляется за счет малых лимфоцитов с гипертрофированной цитоплазмой и гистиоцитов, инфильтрирующих трансплантат. Процесс инфильтрации начинается с 5—8-го дня. Разрушение чужеродной ткани происходит при тесном контакте с лимфоцитами, причем многие лимфоидные клетки гибнут сами. Подробный анализ клеточных реакций при ЗПЧ приведен в книге А. Я. Фриденштейна и И. Л. Черткова «Клеточные основы иммунитета» (1969).
Многие стороны реакции трансплантационного иммунитета и замедленной повышенной чувствительности остаются до сих пор неизученными. Так, неизвестно, каковы клеточные механизмы распознавания чужеродных антигенов при индукции реакций ЗПЧ, необходим ли непосредственный клеточный контакт между лимфоцитами и отторгаемой тканью и каков механизм разрушения аллогенного трансплантата; чем отличаются отношения иммунного и неиммунного лимфоцита с клеткой-мишенью. Показано, что в зоне отторжения трансплантата одновременно присутствуют и иммунные и неиммунные лимфоциты. Происходит ли при этом взаимодействие внутри популяции лимфоцитов, а также каковы их соотношения с макрофагами-гистиоцитами?
Для решения этих и ряда других вопросов естественно обратиться к моделям, воспроизводящим реакцию ЗПЧ или отдельные ее звенья in vitro. При этом следует иметь в виду важное практическое значение разработки in vitro модели ЗПЧ, позволяющей оценить степень иммунологической совместимости потенциальных доноров и реципиента. Создание адекватных систем в культуре ткани может также помочь в решении ряда проблем, связанных с диагностикой аутоиммунных заболеваний.
Бласттрансформация и распознавание антигенов in vitro
В монослойных культурах лейкоцитов периферической крови от двух индивидуумов или двух несингенных животных происходит бласттрансформация лимфоцитов, в результате которой возникают крупные базофильные клетки, аналогичные наблюдаемым в ФГА-стимулированных культурах (Bain a. oth., 1964; McLaurin, 1965; Elves a. oth., 1966; Schwarz, 1966). В отличие от ФГА-стимулированных культур, где бласты составляют до 95% от всех лимфоцитов, а реакция делается максимально выраженной на 2—3-и сутки, в смешанных культурах лимфоцитов трансформации подвергается лишь 10—20% лимфоцитов, а максимальная реакция наблюдается через 6—7 суток (Caron, Sarkany,
1966). В культурах лимфоцитов от однояйцевых близнецов трансформации не происходит (Bair a. oth., 1964; Chalmers a. oth., 1966).
Если культивировать совместно лимфоциты Fi гибридов с ¦ лимфоцитами одной из родительских линий, то бласт-трансформации подвергаются лимфоциты только родительской линии, которые иммунизируются антигенами второй родительской линии, в то время как лимфоциты Fi гибрида не претерпевают трансформации. Более интенсивную бласт-трансформацию можно получить путем предварительной иммунизации одного из аллогенных партнеров изоантигенами другого (Rubin a. oth., 1964; Opperheimer a. oth., 1965). В то же время, если культивировать лимфоциты от взаимо-толерантных доноров, реакция бласттрансформации in vitro не наблюдается, а морфология культур аналогична нести-мулированным культурам от одного донора. Приведенные данные и тот факт, что введение пуромицина полностью тормозит бласттрансформацию в смешанных культурах, указывают, что бласттрансформация лимфоцитов является проявлением в культуре ткани первичного иммунологического ответа на трансплантационные антигены. Эта реакция не приводит к деструкции лимфоцитов, а останавливается на этапе образования клеток с морфологией иммунобластов. Другими словами, в смешанных культурах лимфоцитов первичный иммунологический ответ на трансплантационные антигены проявляется в виде бласттрансформации.
