Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Лурия Е.А. -> "Кроветворная и лимфоидная ткань" -> 45

Кроветворная и лимфоидная ткань - Лурия Е.А.

Лурия Е.А. Кроветворная и лимфоидная ткань — М.: Медицина, 1972. — 158 c.
Скачать (прямая ссылка): krovetvornayailimftkan1972.djvu
Предыдущая << 1 .. 39 40 41 42 43 44 < 45 > 46 47 48 49 50 51 .. 68 >> Следующая

Хлорамфеникол (ингибитор синтеза РНК) подавлял образование антител in vitro. Сопоставляя результаты воздействия хлорамфеникола на разные этапы иммунного ответа in vitro, можно сделать вывод, что он ингибирует продукцию антител, действуя на какой-то ранней фазе иммунного ответа, т. е. не исключено, что в эту реакцию вовлечена информационная РНК (Ainbrose, Coons, 1963).
Таким образом, даже теми методами, которые позволяют добиться лишь переживания или заведомо неполноценного сохранения лимфоидной ткани in vitro, удалось получить весьма важные результаты.
При использовании органных культур достигается длительное сохранение и пролиферация лимфоцитов. В таких культурах можно, очевидно, рассчитывать на полноценный вторичный иммунологический ответ.
Действительно, в органных культурах на плотах из бумаги фрагменты лимфатических узлов от кроликов с выработанной иммунологической памятью обнаруживали значительный синтез антител на 9-й день, если антиген вводили в среду в момент эксплантации. Антителообразование продолжалось около месяца (Тао, 1964). Интересно отметить, что анамнестический ответ in vitro вызывали в этой системе не только добавлением антигена, но и ФГА. Пролиферативная активность культур, получивших антиген или ФГА (которая определялась по включению Н3-тимидина), была' очень высокой. Во фрагментах лимфоидной ткани обнаруживались клетки типа гемоцито-бластов, а также зрелые и незрелые плазматические клетки.
Интересные результаты были получены при культивировании в органных культурах фрагментов лимфатических узлов и селезенки от иммунизированных бараньими эритроцитами кроликов (Hannoun, Bussard, 1966; Bussard, Hanno-un, 1966). Из эксплантатов входе культивирования освобождаются два типа клеток: свободные элементы, которые
находятся в суспензии и дегенерируют в течение нескольких дней, и те, которые прикрепляются к стеклу и сохраняют иммунологическую активность на протяжении 3 недель. Методом локального гемолиза в геле проводилось определение продукции антител индивидуальными клетками. На стекле было обнаружено несколько клеточных типов: крупные эпи-телиоидные клетки, макрофаги, фибробласты и бластоид-ные элементы. Оказалось, что клетки, прикрепившиеся к поверхности стекла и дающие бляшку гемолиза, имеют различную морфологию: это плазматические клетки, более уплощенные и, вероятно, изменившие форму в результате контакта со стеклом; ретикулярные клетки с отростками, ядра которых содержат 1—2 ядрышка, и двухъядерные (или тесно ассоциированные) клетки.
Длительный вторичный ответ удалось получить в органных культурах фрагментов лимфоцитов и селезенки кроликов, иммунизированных бычьим сывороточным альбумином (BSA) (Ortiz-Muniz, Sigel, 1967). Пики антител в среде культур лимфатических узлов приходились на 12-й, 42-й, 48-й день культивирования. Однако даже на 108-й день в среде удается определить антитела. В основном синтезировались 7S антитела.
В культурах селезенки титр антител достигал максимума к 12-му дню и сохранялся на том же уровне до 42 дней, затем интенсивность антителообразования снижается, но и на 84-й день можно определить антитела в среде.
Из эксплантатов выселялись базофильные элементы, имеющие морфологию лимфобластов. Они продолжали синтезировать антитела и при переносе в новую культуру.
Отмечено, что для длительного синтеза антител необходимо применение гомологической сыворотки. Образование антител на безбелковой среде слабее и более кратковременное.
Первичный синтез антител in vitro
При воспроизведении первичного иммунного ответа in vitro, требующего прохождения не только продуктивной, но и индуктивной фазы иммунитета, встретились большие трудности. Они обнаружились на примере работ Stevens, McKenna (1957, 1961).
Эти авторы за сутки до извлечения селезенки вводили кроликам внутривенно эндотоксин сальмонелл. Затем фрагменты селезенки инкубировали в течение часа с антиге-
ном — бычьим гамма-глобулином. Титры антител, которые авторы определяли методом гемагглютинации, наблюдались на 1-е, 2-е, 3-и сутки культивирования. Stavitsky (1961) показал, что в экспериментах Stevens и McKenna клетки селезенки выделяют неспецифический белковый материал, который связывается с антигеном, и неясно, синтезируется ли это вещество de novo в условиях эксперимента или оно освобождается из клеток.
Первые положительные результаты по индукции первичного иммунного ответа получил Fishman (1959, 1961). В основу своих исследований он положил тот факт, что первичный ответ складывается из двух последовательных фаз: сначала антиген фагоцитируется и перерабатывается макрофагами, затем от макрофагов к клеткам-предшественникам передается переработанный материал. В отпечатках, сделанных из лимфатических узлов иммунных животных, Thiery наблюдал группы лимфоцитов, окружающих макрофаги. Оставалось, однако, неясным, требуется ли непосредственный клеточный контакт для осуществления передачи иммунологических сигналов от макрофагов к лимфоцитам.
Fishman инкубировал in vitro перитонеальные макрофаги крыс и кроликов с антигеном — бактериофагом Т2 в течение 30 минут. Затем приготовленный из макрофагов го-могенат добавлялся к культурам лимфоцитов в чашках Петри на синтетической среде с инсулином.
Предыдущая << 1 .. 39 40 41 42 43 44 < 45 > 46 47 48 49 50 51 .. 68 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed