Технология чистых помещений. Основы проектирования, испытаний и эксплуатации - Уайт В.
ISBN 5-9900044-1-9
Скачать (прямая ссылка):
скорость загрязнения = число частиц-носителей микроорганизмов х площадь изделия время воздействия на изделие
площадь чашки Петри время отбора пробы на чашку Петри
Пример: Чашка Петри диаметром 14 см (площадью 154 см2) размещается непосредственно около места наполнения контейнеров. Количество микроорганизмов на её поверхности после 4 часов экспонирования равно 3. Количество микроорганизмов, которые могут попасть в контейнер с площадью горловины 1 см2 за время, пока контейнеры отрыты (в среднем 10 мин), рассчитывается следующим образом:
3 х— X = 0,0008 154 60x4
(т.е. возможно загрязнение 8 контейнеров из 10 000)
Контроль количества микроорганизмов
175
14.3 Отбор микробиологических проб с поверхности
Существует несколько методов взятия микробиологических проб с поверхностей, но чаще всего в чистых помещениях используются два из них. Это контактный метод и метод мазка.
14.3.1 Пробоотбор на контактную поверхность
Контактные пластины и полоски используются в случае, если поверхности чистого помещения, с которых берутся пробы, относительно ровные. В качестве контактных пластин рекомендуются чашки RODAC (Replicate Organism Detection And Counting - обнаружение и подсчет размножения организмов) типа представленных на рис. 14.5. Обычно они имеют диаметр 55 мм; внутренняя чашка закрывается крышкой, которая входит в предназначенный для неё паз. Если во внутреннюю чашку залить от 15,5 до 16 мл агара, то сформируется агаровый мениск, выступающий над краями.
Для отбора пробы агар прикладывают к поверхности чистого помещения. Микроорганизмы внедряются в агар, а после инкубации чашки в течение заданного времени они размножатся и сформируют колонии, которые можно будет подсчитать. После использования дезинфицирующих веществ на поверхности может оставаться осадок, который также попадет в пробу. Осадок может остановить рост микроорганизмов, и, чтобы этого не случилось, в агаровую среду следует вводить химические вещества, нейтрализующие действие дезинфицирующих веществ.
крышка
агар
паз дл крышки
Рис. 14.5. Контактная пластина
176
Технология чистых помещений
Контактные агаровые полоски (strips) типа представленных на рис. 14.6 также используются для взятия проб с поверхностей. Для этого полоски вынимают из контейнера, в котором они находятся, и прикладывают к поверхности, с которой отбирается проба. Микроорганизмы внедряются в агаровую среду, и после инкубации определяется количество образовавшихся колоний.
14.3.2 Взятие мазков
Для взятия проб с неровных поверхностей обычно используют миниатюрные тампоны из такого материала, как, например, хлопок. В простейшем варианте стерильным тампоном протирают поверхность чистого помещения (как это показано на рис. 14.7), а затем проводят тампоном по поверхности агаровой среды. Далее агар инкубируется и определяется количество микроорганизмов. Для повышения эффективности и воспроизводимости метода тампон можно смочить стерильной жидкостью, например, солевым раствором1, а пробу брать
1 Рекомендуется стерильный физиологический раствор - 0,9% водный раствор хлористого натрия (Прим. ред.).
Контроль количества микроорганизмов
177
с поверхности определенной площади. Для повышения эффективности переноса микроорганизмов с тампона рекомендуется опустить его в жидкость и встряхнуть.
Iavv* Vi*,'
»ж
^ V* А' Л
Рис. 14.7. Отбор пробы с помощью тампона
14.4 Отбор микробиологических проб у персонала
Персонал - основной источник распространения микроорганизмов в чистом помещении, поэтому необходимы периодические проверки, чтобы удостовериться в том, что никто из работающих внутри чистого помещения не является источником аномально большого количества микроорганизмов. Если обнаружены слишком высокие концентрации микроорганизмов в воздухе, на поверхностях или внутри изделия, также может возникнуть необходимость поиска оператора, являющегося их источником. Обычно для этого используются следующие методы:
• Отпечатки пальцев. Оператор кончиками пальцев или рукой в перчатке нажимает на агаровую пластину или слегка проводит по ней, после чего определяется количество микроорганизмов.
12—2705
178
Технология чистых помещений
• Контактные пластины или полоски. Пробы со спецодежды оператора берут, прижимая к одежде пластину или полоску. Это лучше делать при выходе операторов из чистого помещения.
• Камера «Боди-бокс». Если человек в повседневной одежде находится в камеру «Боди-бокс» и выполняет физические упражнения, то можно определить скорость генерации им микроорганизмов (см. раздел 19.6.1).
Благодарности
Рис. 14.2 приводится с разрешения фирмы International pbi, рис. 14.3 приводится
с разрешения фирмы Biotest.
15
Защита от загрязнений при эксплуатации чистых помещений
Первые главы этой книги посвящены проектированию и устройству чистых помещений. В последующих разделах описаны измерения, которые проводятся в чистом помещении для контроля его работы как на начальном этапе эксплуатации, так и в дальнейшем. В последних семи главах я намерен обсудить принципы организации работы в чистом помещении, которые позволяют свести к минимуму риск загрязнения. Тема данной главы включает источники загрязнений и пути их распространения в чистых помещениях, а также методы защиты от загрязнений (Contamination Control).
