Молекулярные основы действия ферментов - Севери Г.А.
Скачать (прямая ссылка):
фракция с повышенной пьезолабильностью.
На отрезке времени от 1 до 5 мин инактивация происходит с измеримой
кинетикой первого порядка, но тем не менее с очень высокой константой
скорости 37,5 -10~4 с-1. Это примерно в 60 раз больше, чем наблюдали в
своих опытах с ЛДГ из мышц свиньи Шаде и др. [26]. Вероятнее всего
причина заключается в значительно более низкой концентрации ЛДГ в наших
опытах, из-за. чего фермент был менее стабилен. Действительно, в то время
как в [39] фермент при с=2,5 мкг/мл за 150 ч стояния при 1 атм терял
всего 20% активности, в нашем растворе с концентрацией 0,3 мкг/мл
активность падала на 40% за 19 ч.
В заключение отметим, что после декомпрессии частично активированной
ЛДГ немедленного возрастания активности не наблюдается. Между тем
согласно (5) если активационный объем АУФ ферментативной реакции отличен
от нуля, то сразу после снятия давления константа скорости реакции должна
вернуться к значению ko. Следовательно, в наших опытах с ЛДГ АУФ-0, а
инактивация под давлением происходит только из-за диссоциации тетрамерной
ЛДГ на неактивные димеры и мономеры субъединиц [39].
Для определения парциального мольного объема ассоциации субъединиц AVs
согласно (24) и (26) необходимо проводить измерения v после достижения
равновесия при разных давлениях. Это не входило в цель данной работы, так
как не требует быстрого запуска реакции под давлением - главного
назначения описанного прибора.
ЛИТЕРАТУРА
1. Johnson F. Н., Eyring Н., Stover В. J. (1974) in The Theory of Rate
Processes in Biology and Medicine, p. 273-369, Wiley, N. Y.
2. JaenickeR. (1981) Ann. Rev. Biophys. Bioeng. 10, 49-67.
3. Laidler K. J. (1951) Arch. Biochem. 30, 226-236.
4. Laidler K. J., Bunting P. S. (1973) The Chemical Kinetics of Enzyme
Actions (2nd edn.), p. 471, Clarendon Press, Oxford.
5. Harrington W. F., Kegeles G. (1973) Methods Enzymol. 27, 306-345.
6. Kegeles G., Rhodes L., BethuneJ. L. (1967) Proc. Natl. Acad. Sci.
U.S.A. 58, 45-51.
7. Chernyak V. Ya" Kozhanova Z. E., Chernyak В. V., Kozlov I. A. (1979)
Eur. J. Biochem. 98, 585-589.
8. Ten Eyck L. F., Kauzmann W. (1967) Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 58"
888-894.
9. Heremans K. (1979) in High Pressure Science and Technology, v. 1
(Tim-merhaus K. D. and Barber M. S., eds.), p. 699-705.
10. Mori Id E. (1981) Advances Protein Chem. 34, 93-166.
11. Эмануэль H. М., Кнорре Д. Г. (1969) Курс химической кинетики. 2-е
изд. Высшая школа, М.
12. Гоникберг М. Г. (1969) Химическое равновесие и скорость реакций при
высоких давлениях. 3-е изд. Химия, М.
13. Kratky О., Leopold Н" StabingerH. (1973) Methods Enzymol. 27, 98-
110.
174
14. Эдсалл Дж. (1956) в кн. Белки (ред. Г. Нейрат, К- Бэйли), т. 2, с.
191, ИЛ, М.
15. Kuntz I. D. Jr., Kauzmann W. (1974) Advances Protein Chem. 28,
239_345.
16. Nemethy G., Peer W. J, Scheraga H. A. (1981) Ann. Rev. Biophys.
Bioeng. 10, 459-497.
17. AsanoT., le Noble W. J. (1978) Chem. Rev. 78, 407-489.
18. Chernyak В. V., Chernyak V. Ya., Gladysheva Т. B. et al. (1981)
Biochim. Biophys. Acta 635, 552-570.
19. Penniston J. T. (1971) Arch. Biochem. Biophys. 142, 322-332.
20. Paladini A. A., Weber G. (1981) Biochemistry 20, 2587-2593.
21. Muller K-, Lfldemann H.-D., Jaenicke R. (1981) Biochemistry 20, 5411-
5416.
22. Johnson F. H., Eyring H. (1970) in High Pressure effects on cellular
processes, p. 1-44, Acad. Press, N. Y.
23. Mustafa Т., Moon Th. W., Hochachka P. W. (1971) Amer. Zool. 11, 451-
466.
24. Schmid G., Lfldemann H.-D., Jaenicke R. (1975) Biophys. Chem. 3, 90-
98.
25. Carter J. V., Knox D. G., Rosenberg A. (1978) J. Biol. Chem. 253,
1947-1953.
26. Schade В. C., Rudolph R., Lfldemann H.-D., Jaenicke R. (1980)
Biochemistry 19, 1121-1126.
27. Ш a x о в с к о й Г. П., Э л ь я н о в Б. С., П р о х о р о в Н. И.
(1972) Приборы и техника эксперимента, № 2, 164-166.
28. Grieger R. A., Eckert С. А. (1970) AJChE J. 16, 766-770.
29. Kegeles G. (1978) Methods Enzymol. 48, 308-320.
30. Heremans K., Snauwaert J., Rijkenberg J. (1980) Rev. Sci. In-
' strum. 51, 806-808.
31. Черняк В. Я-, Драчев В. А. (1983) Бюллетень открытий и изобретений, №
26, 134-135. Авт. свидет. № 1029014.
32. Moon Т. W., Mustafa Т., Hochachka P. W. (1971) Amer. Zool. 11, 473-
478.
33. Schmid G., Liidemann H.-D., Jaenicke R. (1978) Eur. J. Biochem.
86 219_224.
34. Swezey R. R., Somero G. N. (1982) Biochemistry 21, 4496-4503.
35. Jaenicke R., Knof S. (1968) Eur. J. Biochem. 4, 157-163.
36. Schade В. C., Lfldemann H.-D., Rudolph R. et al. (1980) Biophys.
Chem. 11, 257-263.
37. Hardman M. J., Coates J. H., Gutfreund H. (1978) Biochem. J. 171,
215-223.
38. Duggleby R. G., Morrison J. F. (1977) Biochim. Biophys. Acta 481,
297-312.
39. Schmid G., Lfldemann H.-D., Jaenicke R. (1979) Eur. J. Biochem. 97,
407-413.
СЕДИМЕНТАЦИЯ АКТИВНОГО ФЕРМЕНТА
В. Я. Черняк
(Межфакультетская проблемная научно-исследовательская
