Молекулярные основы действия ферментов - Севери Г.А.
Скачать (прямая ссылка):
Аспирин является медленным и необратимым ингибитором фермента. В
работах Дж. Рота и др. [22, 23] с помощью изотопной метки было показано,
что аспирин необратимо реагирует с PGH-синтетазой, в результате реакции
ацильная группа переносится на белок. Обсужденные выше кинетические
данные подтверждают необратимое взаимодействие аспирина с PGH-синтетазой.
Определенную группу ингибиторов составляют вещества, быстро и обратимо
блокирующие активность PGH-синтетазы (бруфен, напроксен, бутадион). Эти
соединения действуют как конкурентные ингибиторы по отношению к
арахидоновой кислоте.
Достаточно удивительным и необычным представляются наблюдаемые в
данной работе эффекты медленного обратимого взаимодействия индометацина и
вольтарена с активным центром PGH-синтетазы. Как правило,
низкомолекулярные соединения,,обратимо образующие комплексы с белками,
реагируют с ними достаточно быстро. Скорости комплексообразования
достаточно велики, и равновесие устанавливается в микросекундном или
миллисекундном диапазоне '[32, 33]. В указанных работах проанализированы
статистические данные по константам скоростей взаимодействий белок-
органический лиганд. Наиболее часто встречаются процессы, имеющие
константу скорости около 107 М-1 с-1. Бимолекулярные стадии реакций с
константами скоростей порядка 1010 Mr1 с-1 попадают в разряд реакций,
скорость которых контролируется диффузией реагентов, в растворе. За счет
стерических эффектов или влияния электростатических взаимодействий
диффузионно контролируемый процесс с участием белковой молекулы может
быть замедлен и иметь константу скорости до 108 Мг* с-1* Реакция
образования комплекса индометацин - PGH-синтетаза имеет константу
скорости бимолекулярного взаимодействия 6,4-102 Mr1 с-1. Это значение на
семь порядков ниже диффузионно контролируемого предела. Однако в
настоящее время все
22
Таблица 3
Закономерности ингибирования эндопероксидпростагландинсинтетазы
нестероидными противовоспалительными препаратами
№ Структура и название соединения Механизм Кинетические и равновесные
п/п ингибиро параметры ингибирования
вания (32°С)
1 Аспирин медленный, A=0,17±0,01M-1c-i
о необрати
н мый
^Yc-°h ингибитор
---С---СН3
А
2 Индометацин медленный, А.! = (1,5+0,5)-Ю-3*:-1
снз°Х^ ^СНоСООН обратимый /С<-=(2,4±0,7)-Ю-вМ
с=о ингибитор К.1 = (9+1) • 10"7М (4°С)
ф
С1
3 Вольтареи медленный, ki = (7,2±1,4)-ЮаМ-1с-1
^\^СН2СООН обратимый k-i = (2+0,4) Ю:зс-i
ОС ингибитор Ki = (2,8±о,б)-ю-ад
4 Бруфен (Ибупрофен) быстрый, ^ = (1±0,1)-10-3М
СН-, обратимый,
3\ /ГЛ. 1 ' конку
)сн---СН2---<1 ')---сн---соон рентный
СН/ \---/ ингибитор
5 Напроксен быстрый, Ki = (9,5±0,6)-10-6М
С СНз обратимый, т
конку
рентный
ингибитор
1
23
Продолжение табл. 3
JVg Структура и название соединения Механизм Кинетические и равновесные
п/п ингибиро параметры ингибирования
вания <32°С)
6 Бутадиои быстрый, К,-=! (3,9±0,5)-10-4М
Н обратимый,
0=1-1---сн2---сн2---сн2---сн3 конку
¦ рентный
ингибитор
7 Анальгин быстрый, Ki= (9,8+2,2) • 10-4М
/СН;1 обратимый,
снз I-г-Г< конку
с"ААCI(tm) ¦ рентный
