Молекулярные основы действия ферментов - Севери Г.А.
Скачать (прямая ссылка):
Очевидно, что ингибитор может взаимодействовать со свободной формой
фермента Xt или с различными интермедиатами ферментсубстратных
превращений.
Кинетические закономерности ингибирования двухсубстратной реакции с
немультиплицирующим механизмом ^суммированы в табл. 1. В ней приведены
кинетические схемы взаимодействия ингибитора с ферментом, уравнения
стационарной скорости реакции в обратной форме, а также координаты точки
пересечения прямых зависимости l/v от l/5t или от 1 jS2 при различных
концентрациях ингибитора (если такая точка пересечения существует).
Рассмотрены механизмы, по которым ингибитор взаимодействует с одной из
форм активного центра (Xi, Х2, Хз, Х4), с какими-либо двумя, тремя
формами либо со всеми четырьмя состояниями активного центра.
Вариация стадий взаимодействия ингибиторов с интермедиатами
ферментативной реакции приводит к 14 различным механизмам.
Проводя экспериментальное изучение зависимости скорости реакции от
концентрации субстратов и ингибитора, механизмы реакций можно в
значительной степени дискриминировать. Анализ данных, приведенных в табл.
1, показывает, что все представленные механизмы приводят к шести
различным вариантам зависимостей скорости от концентрации первого или
второго субстрата
13
Таблица 1
Закономерности ингибирования двухсубстратной
реакции. Случай упорядоченного
механизма для немультиплицнрующих субстратов, схема Х2 -*¦ Х3
% Х^
Kt
к,
№
п/п
Стадии взаимодействия с ингибитором
Уравнение стационарной скорости
Координата точки
пересечения прямых при различных концентрациях ингибитора
зависимость 1/и от 1/S,
зависимость 1/а от 1/Sa
*1
X4-I-/ ^ Х4/
*1
kiSi
К,
к.
knSz
+
1 _1_
kl k2
к 1
к,
+-'1-
k<i bnS [I
' /
+
E о
+
К,
k%S 2 ?g _ Ki
"ёг +~*г+ 1+тг)
1
A1S1
+ -t(,+~k
+
(1/S1)n=0
(1/S,)" = 0
Продолжение табл. 1
№ Стадии взаимодей Координата точки пересечения пряных при
различных
концентрациях ингибитора
n/n ствия с ингибитором^ зависимость I/o от 1 /Si зависимость 1/в от
l/S2
Ж "
к)
(О
5 '*!+/ ^ xj
*2+/ к<2)
^ лу
6 A'i+Z "(D
Ki
- XJ
Х3+У кР
^ х3/
7 Xi+/ "}"
^ Хг1
Х4+/ к\2)
^ XJ
8 *2+/ 4"
^ Х,1
¦^з+/ к!2)
^ XJ
9 Хп~\~[ Jcj1"
^ Х2!
Xi+r *.(2)
к*
^ х4/
А.
V
1
А
и
/Ci
ftiSi
I
к<2>
Т К<'>
, /Г*
+
+ ¦
К!
+
А
t)
ftiS,
Jk_
kiSz
К!
+
1+'
1+
1
к<'>
У
/с<2>
/
Kj'>
?n_
II
+
A
tl
2J2
Kl
+
Kz
+
k2S2 k*i
+ ~r~ + "1
+
г
+x +
^2^2 +¦ *2 кр )
*1 ¦+ 1 Л I '
СО *1 \ 1 к}" ,
-сГ
к2 (у- / ' 1+4-
1+'
/
^2)
+
+
(1/SO"--
K<'>
(1/S1)"= -¦
Kj2) Kx
к к\ик"
(I/Sl)n =
k2S2Kl2)Ki
kjKW
hK^K,
(11&г)п~ -
к,К\2)К, К a
мср>
10
11
12
x3+/ kP
- x3/
Х4+/ *j2)
--- x4/
