Физиологически активные полимеры - Платэ Н.А.
Скачать (прямая ссылка):
Для терапии конъюгированные антигены представляют наибольший интерес как индукторы антител, нейтрализующих экзо- и эндогенные биологически активные соединения. В работе [208] было показано, что иммунизация животных КА, содержащими в качестве гаптенов остатки ФАВ, действующих на центральную нервную систему (морфин, фенобарбитал, аминазин и т. д.), может повысить устойчивость организма к токсическим дозам этих ФАВ. Индукция антител к морфину КА и возникновение толерантности к нему описаны в [210]. Интересно, что естественная толерантность к опиоидам также связана с иммунологическими механизмами. Аналогичные исследования проведены для КА, полученных из ксантина, кофеина, теофил-лина и других ФАВ. Более детально иммунологическая инактивация экзогенных веществ рассмотрена в [215]. Особенно важна такая инактивация с целью профилактики и лечения отравлений, а также наркоманий, вызванных злоупотреблением наркотиками. Нейтрализация эндогенных вазоактивных веществ — холестерина, брадикинина, ангиотензина П, альдосте-рона стероидных гормонов и сердечных гликозидов — демонстрирует широкие возможности использования метода иммунологической детоксикации с помощью КА. Предложен иммуно-фармакологический метод контрацепции, основанный на нейтрализации физиологического действия хорионического гонадотропина высокоспецифичными к нему антителами, полученны-
ми с помощью р-субъединицы гормона, ковалентно связанной с гетерологичным носителем — столбнячным токсином [216].
Логическим развитием работ по КА явились исследования по созданию искусственных или синтетических вакцин против бактериальных и вирусных инфекций, которые связаны с наличием отчетливо выраженных антигенов. Применяемые ныне вакцины биологического происхождения имеют ряд существенных недостатков, таких как недостаточная чистота, иммунизация организма многочисленными ненужными для лечения антигенами и т. д. Искусственная или синтетическая вакцина должна содержать антигенную детерминанту и адъювант соответствующей силы [217]. Для белковых и полисахаридных антигенов оказалось возможным выявить антигенные детерминанты — фрагменты структуры этих биополимеров, которые при соответствующих условиях могут служить гаптенами и в составе КА вызывать биосинтез антител, специфичных к исходным белкам или полисахаридам [218]. Эти антигенные детерминанты могут быть либо выделены из соответствующих биополимеров (для искусственных вакцин), либо получены путем синтеза (для синтетических вакцин). То же относится и к полимерам-носителям: возможно применение белков или антигенных синтетических полимеров, например мульти-поли- (Д?-аланил) -поли-(?-лизина). В качестве адъюванта используют либо полный адъювант Фрейнда, либо Ы-ацетилмурамил-?,-аланил-/)-изоглутамин (мурамилдипептид), свободный или связанный ковалентно с тем же полимером-носителем [219]. Таким образом, макромолекулы искусственной или синтетической вакцины имеют типичную структуру «прививочного» ФАП. В общем случае к полимеру-носителю присоединены боковые группы: им-муногенная детерминанта (гаптен), иммуноадъювант и функциональные группы, обеспечивающие растворимость всей системы в воде.
Так как антигенная детерминанта представляет собой фрагмент биополимера, то в зависимости от способа его включения в макромолекулу будут образовываться антитела с разной специфичностью. Например, трипептид Туг—Ala—Glu в составе регулярного полипептида (4.77) вызывает биосинтез группоспецифичных антител к а-спирали. Тот же трипептид, связанный с концами разветвлений мульти-поли- (D, L аланил) поли-(L-лизина) (4.78), индуцирует биосинтез строго специфичных антител на указанную трипептидную последовательность, которые не реагируют на иную а спиральную структуру [220].
На этой основе с использованием фрагмента яичного лизо-цима, называемого «петлей», был приготовлен первый полностью синтетический антиген, в котором «петля» была связана с концами разветвлений [221]. Полученные с его помощью в присутствии полного адъюванта Фрейнда антитела реагировали
(Туг—Ala—Glu—)n
M = 100 тыс., а-спираль (4.77)
M= 75 тыс.,мулвтицепнои.
(4.78)
n<vm-?-Lys
с «петлей» только в том случае, если последняя сохраняла дисульфидный мостик, который обеспечивал нативную конформацию пептида, т. е. антитела были специфичны к структуре и конформации антигенной детерминанты. Эти работы открыли путь к получению синтетических вакцин.
В качестве модели был использован колифаг MS-2 — РНК-содержащий вирус. Его антигенная детерминанта — 20-членный пептид — был синтезирован и ковалентно связан с N-koh-цевыми группами упоминавшегося мультицепного полимера-носителя. Полимерной системой иммунизировали животных в полном адъюванте Фрейнда и получили антитела, нейтрализующие колифаг почти столь же эффективно и специфично, как и антисыворотка, вырабатываемая животными в ответ на введение нативных субъединиц фага. Вместо полного адъюванта Фрейнда можно использовать неполный адъювант вместе с пептидогликаном из Bacillus megaterium, ковалентно связанным с антигеном. Синтетический антиген (пептид + полимер), связанный с мурамилдипептидом, можно вводить просто в фосфатном буфере, так как он содержит все необходимые компоненты для стимуляции специфического иммунного ответа [222]’. Смесь синтетического антигена с мурамилдипептидом действует заметно слабее.
