Высокоэффективная жидкостная хроматография в биохимии - Хеншен А.
ISBN 5-03-001337-7
Скачать (прямая ссылка):
ни на обращенной неподвижной фазах. Однако, если к неподвижной фазе
добавляют ионы серебра, эти витамины образуют комплексы с различной
полярностью, так что пики их на хроматограмме могут достигать нулевой
линии [26]. К сожалению, этот метод был применен только для разделения
собственно витаминов D2 и D3, хотя, по-видимому, к нему можно прибегать и
в других аналогичных ситуациях.
При проведении хроматографического разделения витаминов рекомендуется
пользоваться внутренними стандартами с тем, чтобы можно было определить
потери на стадии подготовки пробы. Внутренними стандартами помимо
витаминов, меченных радиоактивными изотопами (см., например, [52, 47]),
Таблица 12.6. Применение ВЭЖХ для исследований метаболизма витамина
D п его производных
Разделяемые соеди Неподвижная Элюент Применение Лите
нения а фаза(r) рату
ра
D3 и многочисленные н Дихлорметан/ Стандартные 38
гидроксилированиые метанол от 0,02 растворы
метаболиты (1,24,25) до 6%
н Дихлорметан/ Стандартные 38
метанол (98 : 2) растворы
25-OH-D2, 25-ОН-Оз н ч-Гексан/2-про- Плазма 39
панол (97,5 :
: 2,5)
la-OH-D3 н Петролейный Фармацевти 40
эфир/дихл ор- ческие препа
этаи/ТГФ/"-про- раты
панол (50 : 25:
: 24 : 5)
25-OH-D3 н Петролейный Фармацевти 40
эфир/дихл ор- ческие препа
этан/ТГФ/ раты
"-пропанол
(40 : 5 : 15 : 0,6)
25-OH-npe-D3, н Петролейный Стандартные 40
25-OH-D3 эфир/дихл ор- растворы
этан/ТГФ/
ч-пропанол
(40 : 5 : 15 : 0,6)
la-OH-D3, н Петролейный Стандартные 40
la-OH-npe-D3 эфир/дихлор - растворы
этан/ТГФ/
"-пропанол
(50 : 25 : 24 : 5)
D2 и D3*, 24-OH-D2, н Скеллизольв В/ Стандартные 41
24-OH-Ds, 25-OH- 2-пропанол растворы
D2, 25-OH-D3 (97 : 5 : 2,5)
D2, D3, 25-OH-D2, Н и О, объ к-Гексан/2-пропа- Плазма 42
25-OH-D3 единен нол (94,5 : 5,5) +
ный ме +нормальная
тод фаза, метанол/
Н2О (различные
отношения) +
+обращенная
фаза
25-OH-D2 Различные н-Гексан/2-про- Полуирепара- 43
Н и О, панол (94,5 : тивиое выде
объеди : 5,5)+нормаль- ление и очи
ненный ная фаза, мета стка 25-ОН-
метод нол/2-пропанол/ D2 из плаз
Н20 (70 : 18 : мы
: 12)+обращен-
ная фаза
25-OH-D, Н (препара- ч-Гексан/2-про- Исследование 44
тнвная панол (94,5 : плазмы по
ВЭЖХ) : 5,5)+нормаль- еле очистки
О (аналити иая фаза, мета препаратив
ческая нол /2-пронапол/ ной вэжх
ВЭЖХ) Н20 (70:18:12)+
+ обращенная
