Молекулярная биология клетки - Уилсон Дж.
ISBN 5-03-001999-5
Скачать (прямая ссылка):
чувствительных к глюкокортикоидам элементов расположено между
нуклеотидами -240 и - 50. Это предположение подтверждается
экспериментальными данными, которые суммированы в пункте Б.
Б. Обобщенную последовательность для связывания рецептора
глюкокортикоидов можно "вычислить", сравнив частоты появления G, С, А и Т
в каждом положении связывающихся последовательностей, как это показано на
рис. 12-18. Индивидуальные нуклеотиды, присутствующие на данном месте
более чем в половине последовательностей, приведены сразу под частотами.
В литературе сообщалось о двух обобщенных последовательностях,
связывающихся с рецептором глюкокортикоидов (AGAA / TCAGT / А и AGAACA).
Литература: Payvar, F.; DeFranco, D.; Firestone, G. L.; Edgar,
B.; Wrange, О.; Okret, S.; Gustafsson, J-A.; Yamamoto, K. R. Sequence-
specific binding of glucocorticoid receptor to MTV DNA at cites within
and upstream of the transcribed region. Cell 35, 381-392, 1983.
Scheidereit, СGeisse, S.; Westphal, H.M.; Beato, M. The
glucocorticoid receptor binds to defined nucleotide sequences near the
promotor of mouse mammary tumor virus. Nature 304, 749-752, 1983.
458 Глава 12
Рис. 12-18. Частота встречаемости G, С, А и Т в каждом из положений
связывающихся последовательностей (ответ 12-11). Звездочкой (?) отмечены
нуклеотиды, встречающиеся в 10 и более последовательностях. В первой
обобщенной последовательности показаны те основания, которые представлены
в данном положении более чем в половине из 11 последовательностей данного
набора; там, где указаны два основания, нижнее тоже часто встречается в
данном положении.
1. С С А А G G А G G G G А С А G т G G С Т G G А С т А А Т А G
2. G G А С Т А А Т А G А А с А Т т А Т Т С Т С С А А А А А С Т
3. Т С G Т Т Т Т А А G А А с А G т Т Т G Т А А С С А А А А А С
4 . А G G А т G т G А G А С А А G т G G Т Т Т С с т G А С Т Т G
5. А G G А А А А Т А G А А С А С т С А G А G С т с А G А Т С А
6. С А G А G С Т С А G А Т с А G А А С С Т Т т G А Т А С С А А
7. С А Т G А т т с А G С А с А А А А А G А G с G Т G Т G с С А
8. С Т G Т Т А т т А G G А с А Т С G Т С С Т т т С С А G G А С
9. с С Т А G Т G т А G А Т с А G т С А G А Т с А G А Т Т А А А
10. G А Т С А G Т с А G А т с А G А Т Т А А А А G С А А А А А G
11. т Т С С А А А т А G А т с С Т т т т Т G С т Т Т Т А А Т С Т
А 2 3 2 5 4 4 4 1 * 0 8 6 1 •к 1 3 3 3 1 4 2 2 2 2 5 8 6 4 6 4
С 5 3 1 3 0 1 0 3 0 0 1 1 * 1 1 1 2 1 3 2 1 5 3 5 1 0 2 2 4 2
G 2 3 5 1 3 3 1 2 1 •к 2 0 0 0 6 0 3 2 4 1 3 1 3 1 2 1 2 1 0 3
Т 2 2 3 2 4 3 6 5 0 0 0 4 0 0 3 7 3 5 3 4 5 3 3 3 3 2 1 4 1 2
Обобщенная
последовательность
AGAACAGT
Т
А А
А
С
12-12
A. Вызываемое циклогексимидом изменение в картине образования пуфов
обусловлено его действием на синтез белка. Этот результат указывает на
то, что для "выключения" ранних пуфов и "включения" поздних необходим
новосинтезированый белок. Вероятно, этот белок должен быть продуктом
гена, находящегося в одном из ранних пуфов.
Транскрипция межлинечных пуфов нечувствительна к обработке
циклогексимидом. Можно предположить, что эти пуфы "выключаются"
непосредственно под действием комплекса рецептора с экдизоном. (По-
видимому, выключение опосредуется белком, поскольку сам экдизон
недостаточно велик, чтобы вступать в специфические взаимодействия
непосредственно с ДНК.)
Б. Немедленное уменьшение ранних пуфов после удаления экдизо-на
указывает на то, что для поддержания этих генов в активном состоянии
требуется постоянное присутствие комплекса экдизон-рецептор.
Преждевременная активация поздних пуфов в этих условиях-
результат неожиданный. Если бы активация поздних пуфов зависела только от
продуктов ранних пуфов, они должны были бы включаться в то же время, что
и обычно (или даже с некоторой задержкой из-за низкого уровня "раннего"
продукта). Преждевременная активация указывает на то, что комплекс
экдизон-рецептор в действительности действует как ингибитор, подавляя
активацию до того момента, пока концентрация предполагаемого "раннего"
продукта не достигнет некоторого критического уровня. Удаление экдизона
способствует индукции пуфов при более низкой концентрации "раннего"
продукта.
B. Эти наблюдения представлены в виде схемы на рис. 12-19. Комплекс
экдизон-рецептор связывается с регуляторными участками как межлинечных,
так и ранних и поздних пуфов. В межлинечных пуфах связывание вызывает их
выключение, в ранних пуфах связывание вызывает их включение, а поздние
пуфы поддерживаются за счет связывания в выключенном (неактивном)
состоянии. Продукт одного или нескольких ранних пуфов связывается с
регуляторными участками ранних и поздних пуфов, что приводит в конечном
итоге к выключению ранних пуфов и включению поздних.
Рис. 12-19. Схема, иллюстрирующая связь между присоединением комплекса
экдизон-рецептор (ЭР) и активностью генов (ответ 12-12).
