Молекулярная биология клетки - Уилсон Дж.
ISBN 5-03-001999-5
Скачать (прямая ссылка):
неизменной.
Литература: Horio, Т.;
Hotami, Н. Visualization of the dynamic instability of individual
microtubules by dark-field microscopy. Nature 321:605-607,
1986.
Промежуточные филаменты
11-26
A. кератины
Б. виментин
B. десмин
Г. глиальный фибриллярный кислый белок
Д. нейрофиламенты
Е. ядерные ламины
11-27
A. Правильно.
Б. Неправильно. Промежуточные филаменты крайне плохо растворимы и
образуют остаток после экстракции клеток растворами неионных детергентов
и солей в высокой концентрации.
B. Правильно.
Г. Неправильно. Белки всех цитоплазматических промежуточных
филаментов кодируются генами одного мультигенного семейства.
Д. Правильно.
Е. Правильно.
Ж. Неправильно. Некоторые совершенно здоровые, живые клетки,
например, те глиальные клетки, которые образуют в центральной нервной
системе миелин, полностью лишены цитоплазматических промежуточных
филаментов. Однако даже в этих клетках есть ядерные ламины.
3. Правильно.
11-28 Сегмент ядерного ламина С, обозначенный как виток 1А, "ложится" на
гептадный повтор в 9 позициях из 11 (см. рис.
11-31), что считается очень хорошим совпадением. Для образования
"витого каната" совпадение не обязательно должно быть полным. Два других
отмеченных сегмента (виток 1Б и виток 2,
Цитоскелет 449
Рис. 11-31. Структура гептадного повтора в области "витка 1А" ядерного
ламина С (ответ 11-28). Гидрофобные аминокислоты, соответствующие
положениям А или D гептадного повтора, обозначены знаком плюс. Начало
гептадного повтора выбрано так, чтобы число совпадений было максимальным.
Г идрофобные
аминокислоты * * ***** * * * * * * **
Виток 1A DLQELNDRLAVYIDRVRSLETENAGLRLRITESEEW
Гептадный повтор-д-D----А-D----А-D-----А-D----А-D-----А
Соответствие + + + + + + - + + - +
рис. 11-20) не столь хорошо соответствуют гептадному повтору, но
все же вполне достаточно, чтобы структура типа "витой канат" могла
образоваться.
Литература: McKeon, F.D.; Kirschner, М. W; Caput, D. Homologies
in both primary and secondary structure between nuclear envelope and
intermediate filament proteins. Nature 319:463-468, 1986.
11-29
A. В результате обработки щелочной фосфатазой остается только три
пятна-по одному для ламина каждого типа, поскольку щелочная фосфатаза
отщепляет от ламинов все фосфатные группы. Ламины одного типа попадают в
различные точки геля, если к ним присоединено разное число фосфатов.
Заряд фосфатных групп изменяет общий заряд молекулы ламина, а вместе с
тем и ее миграцию в условиях, когда миграция определяется зарядом
молекулы.
Б. Необработанная смесь ламинов из интерфазных и митотических клеток
позволяет наилучшим образом продемонстрировать общее число возможных
типов молекул ламинов. Ламин С, например, в такой необработанной смеси
выявляется как четыре пятна, разделенных равными промежутками. Самое
правое пятно на рис. 11-21 (с самым большим положительным зарядом)
соответствует единственному пятну ламина С, остающемуся после обработки
щелочной фосфатазой. Следовательно, это пятно состоит из молекул ламина
С, не несущих ни одной фосфатной группы. Равные промежутки между
соседними пятнами ламинов С позволяют считать, что они образованы
молекулами, несущими соответственно одну, две или три фосфатных группы-в
порядке возрастания отрицательного заряда (хотя в принципе они могли бы
нести две, четыре и шесть фосфатных групп, а также любые количества,
кратные 1, 2 и 3). Сравнение спектра интерфазных ламинов с картиной общей
смеси показывает, что в интерфазных клетках молекулы ламина С либо не
фосфорилированы, либо несут лишь одну фосфатную группу. В митотических же
клетках выявляются ламины С с двумя и тремя фосфатными группами на
молекулу.
При анализе форм ламина А можно видеть, что в интерфазных
клетках молекулы его также не фосфорилированы или фосфорилированы лишь
однократно, а в митотических они содержат по три фосфатные группы.
("Пропуск" в цепочке ламинов из общей смеси говорит о том, что
дифосфатная форма ламина А практически не встречается.) Анализ ламина В
указывает на присутствие нефосфорилированной формы в интерфазных клетках
и моно-, а возможно, и дифосфатной формы-в митотических клетках.
B. Клетки были помечены с помощью 35S-метионина (а не 32Р-фос-фата)
для того, чтобы можно было увидеть положения всех ламинов, в том числе и
тех, которые фосфата не содержат. Если бы клетки метили 32Р-фосфатом, то
трех пятен, остающихся после обработки щелочной фосфатазой, не было бы
видно.
Г. Хотя эти результаты выглядят весьма убедительным свидетельством
того, что фосфорилирование играет важную роль
29-1428
в разборке ламиновой сети, однако до настоящего доказательства
они "не дотягивают". Известно много примеров белков, состояние
