Молекулярная биология клетки - Уилсон Дж.
ISBN 5-03-001999-5
Скачать (прямая ссылка):
этом процессе G-белка; подавление образования арахидоновой кислоты
коклюшным токсином подтверждает это. Однако токсин-чувствительный G-
белок, по-видимому, нетождествен тому белку, который активирует
фосфолипазу С, поскольку на ее активацию коклюшный токсин не влияет. В то
же время эти эксперименты не проясняют связи между G-белком и
фосфолипазой А2.
Литература: Burch, R. М.; Luini, A.; Axelrod, J. Phospholipase А2
and phospholipase С are activated by distinct GTP-binding proteins in
response to a,-adrenergic stimulation in FRTL5 thyroid cells. Proc. Natl.
Acad. Sci. USA 83, 7201-7205, 1986.
Механизмы действия циклического AMP и ионов кальция
12-19
A. сАМР-зависимая протеинкиназа (А-киназа)
Б. кальмодулин
B. кальмодулин-зависимые протеинкиназы (Са-киназы)
Г. гуанилатциклаза
12-20
A. Неправильно. Повышенное содержание сАМР в мышечных клетках
способствует расщеплению гликогена и подавлению его синтеза.
Б. Правильно.
B. Правильно.
Г. Неправильно. Ферменты, удаляющие фосфатные группы из белков,
называются фосфатазами. Фосфорилазы разрывают связи, присоединяя фосфат
(аналогично гидролазам, которые разрывают связи, присоединяя воду).
Д. Правильно.
Е. Правильно.
Ж. Правильно.
3. Неправильно. Во всех клетках содержатся протеинфосфатазы, которые
в конце концов выключат эту киназу.
12-21
А. Если бы А-киназа была в клетках хомячка необходимым ферментом, то
невозможно было бы получить мутанты, лишенные активности А-киназы,-они
были бы нежизнеспособны. След о-
вательно, в этих клетках А-киназа незаменимым ферментом не является
(точно так же, как и в ряде других клеточных линий, для которых были
получены аналогичные мутанты). Однако из этого не следует, что без А-
киназы может обойтись и целый организм. Существует множество примеров
того, как дефект фермента, имеющий минимальные последствия для клеток в
культуре, оказывался весьма тяжелым для целого организма.
Б. Мутации, приводящие к элиминации каталитической субъединицы, делают
клетки нечувствительными к высоким концентрациям сАМР, и, следовательно,
резистентными к сАМР. Эти мутации рецессивные, поскольку в присутствии
каталитической субъединицы дикого типа чувствительность к сАМР у них
восстанавливается. (Может казаться, что мутации, элиминирующие
регуляторные субъединицы, будут приводить к таким же эффектам. Однако в
отсутствие регуляторных субъединиц А-киназа будет активна постоянно, что
приведет к летальным последствиям: избыток А-киназной активности является
причиной гибели клеток при высоких концентрациях сАМР. Таким образом,
клеточные линии без регуляторных субъединиц просто нельзя было получить.)
Несколько труднее объяснить доминантные мутации. В общем
доминантность указывает на измененную активность, а не на полную ее
потерю. Доминантные мутации были обнаружены и в регуляторных, и в
каталитических субъединицах. Возможная доминантная мутация в регуляторной
субъединице-это та, которая увеличивает сродство к каталитической
субъединице. Такой мутант может реагировать только на повышенный уровень
сАМР (необходимый для вытеснения прочно связанной регуляторной
субъединицы). Доминантность мутации будет обусловлена тем, что мутантные
регуляторные субъединицы, связываясь с каталитическими при низких
концентрациях сАМР, вытесняют нормальные регуляторные субъединицы.
Еще труднее объяснить доминантные мутации в каталитической
субъединице. Возможно, мутантные каталитические субъединицы связываются с
регуляторными более прочно, изменяя чувствительность киназы как целого к
сАМР. Такая мутация будет выявляться как доминантная в том случае, если
при соединении мутантной каталитической субъединицы с нормальной
каталитической субъединицей образуется гетеродимер, который связывается с
регуляторной субъединицей так же, как мутантный. При этом смесь из равных
количеств мутантных и нормальных каталитических субъединиц будет
проявлять А-киназную активность на уровне 1/4 от нормальной А-киназной
активности (только 1/4 часть каталитических димеров будет состоять из
двух каталитических субъединиц дикого типа).
В. Приведенные результаты в целом подтверждают мнение (пока еще спорное),
что все эффекты сАМР реализуются с участием А-киназы, но для
доказательства этой гипотезы данных недостаточно. В сходных работах, где
использовались другие линии клеток, также были выделены мутанты по А-
киназе. В клетках, полностью лишенных А-киназы, не наблюдается ни один из
обычных эффектов с АМР. Таким образом, на сегодня нет данных, которые
доказывали бы, что в эукариотических клетках существует какая-то мишень
для действия сАМР, отличная от А-киназы.
Межклеточная сигнализация 465
Литература: Gottesman, М. М. Genetics of cyclic-AMP-dependent
protein kinases. In Molecular Cell Genetics (М. M. Gottesman, ed.), pp.
711-743. New York: Wiley, 1985.
12-22
A. Разница в поведении киназы легких цепей миозина, выделенной в
