Биосенсоры: основы и приложения - Тёрнер Э.
Скачать (прямая ссылка):
при pH 8,3 [8].
Путем окисления декстрана перйодатом, взаимодействия продукта реакции с
глицином и борогидридом натрия, а затем сочетания с N6 '(Ы-(2-
амтюэтил)пропион-aMH;j)-NAD f (связующим агентом служит 1-этил-3-(3-
диметиламинопропил)карбоди-имид) получается связанное с декстраном
производное NAD + , активность которого в реакциях, катализируемых ADH и
LDH, почти равна активности свободного NAD + [!]¦
!-(c)
!=(c)
Ковалентное
связывание
•(c)
'¦(c)
Адсорбция
\
Адсорбция и сшивание
Рис. 6.2. Методы иммобилизации ферментов.
6 1145
Захват носителем Микроинкапсулирование
82
Глава 6
Фирма Genetics International использовала электрод с адсорбированным на
нем ферроценом в качестве подложки для глюкозооксидазного электрода [13].
Ранее [14] эта же фирма запатентовала медиаторные соединения, содержащие
не менее двух органических циклов, при использовании электродов из
углеродной пасты или твердого углерода.
Приведенные примеры иллюстрируют четыре основных подхода в иммобилизации
ферментов (рис. 6.2):
1) физическая адсорбция на твердой поверхности;
2) захват в полимерном геле или в микрокапсулах;
3) поперечное связывание с помощью бифункциональных агентов (часто в
сочетании со способами 1) и 2));
4) ковалентное связывание с реакционноспособной нерастворимой подложкой.
Данные об использовании различных методов иммобилизации ферментов в
ферментных электродах и других устройствах приведены в табл. 6.1 и 6.2.
Таблица 6.1. Методы иммобилизации, используемые для изготовления
ферментных электродов и термисторов
Метод Фермент Литература
Необратимая адсорбция на графите D-глюкозооксидаза [18]
Соиммобилизация с FAD на саже, связанной с теф- [37]
лоном -
Сшивание при помощи глутарового альдегида с бычь- Уреаза [38]
им сывороточным альбумином на электроде Pd - PdO
Сшивание при помощи глутарового альдегида с бычь- D-глюкозооксидаза
[46]
им сывороточным альбумином на платине [31]
Реакция с нерастворимым коллагеном, медиатор диме- -"-
тилсуберимидат L-лизиноксидаза [36]
Захват в желатиновом слое
Соиммобилизация D-глюкозооксидаза и каталаза [И]
Соиммобилизация путем сшивания глутаровым альде- То же [45]
гидом с бычьим сывороточным альбумином на Pt
фольге
Адсорбция на частицах СаС03 Бактерии, окисляющие нитрит [34]
Погружение мембраны с иммобилизованной уреазой Уреаза [39]
в этилендиамин или полилизин
Сшивание при помощи глутарового альдегида с по- Г люкозооксидаза [25]
ристой поликарбонатной пленкой [26]
Захват между Pt пластинкой и пленкой из полиэтилен-
фталата
Прямое О-алкилирование найлона 6 Уреаза [4]
Захват между целлофановой диализной и проницаемой Аспарагиназа [32]
для NH3 мембранами
Соиммобилизация на полосках активированного кол- Люцифераза и FMN-
[5]
лагена оксидоредуктаза
Соиммобилизация путем адсорбции на стеклоуглероде FAD и глюкозоокси-
[28]
со средним размером пор даза
Реакция с конканавалином А, связанным с агарозой, Аскорбатоксидаза, (3-
[27]
активированной цианогенбромидом фруктофура нозидаза (ферментный
термистор)
Связывание при помощи глутарового альдегида со (З-О-Г алактозидаза,
[27]
стеклом с контролируемыми размерами пор D-галактозооксидаза (ферментный
термистор)
Иммобилизация биологических компонентов в оиосенсорах
83
Продолжение таблицы 6.1
Метод Фермент Литература
Связывание при помощи глутарового альдегида с же- L-лизиндекарбоксилаза
[41]
латином на С02-чувствительном электроде
Иммобилизация при помощи глутарового альдегида на Алкогольоксидаза, ка-
[43]
электроде Кларка или аналогичном ему талаза
Иммобилизация путем покрытия фермента, закреплен- Г люкозооксидаза [17]
ного на и-бензохинон-углеродном пастовом электроде,
нитроцеллюлозной пленкой
Соиммобилизация с акцептором электронов феррициа- [20]
нидом калия на расплетенной найлоновой ткани
Иммобилизация на мембране, помещенной на плати- Уриказа или глюкозо-
[40]
новом электроде оксидаза
Соиммобилизация на ариламинированном стекле с Р-Фруктофуранозида-
[24]
контролируемыми размерами пор за/мутаротаза
Иммобилизация при помощи глутарового альдегида на Аденозиндиаминаза
[6]
поверхности электрода
Иммобилизация на пористой поликарбонатной мем- Алкогольоксидаза [9]
бране
Иммобилизация глутаровым альдегидом в соответст- Оксалатоксидаза [Ю]
вующем буферном растворе между двумя мембранами
из эфира целлюлозы
Иммобилизация на пористой стороне ацетилцеллюлоз- L (+ )-Лактатоксидаза
[42]
ной мембраны
Таблица 6.2. Методы иммобилизации, используемые в других устройствах *
Метод Система Литература
Взаимодействие конканавалина с агарозой, активированной цианогенбромидом
Взаимодействие с агарозой, активированной тиольными группами, и анти
(иммуноглобулин 0)-антителом путем тиол-дисульфидного обмена
Использование глюкозооксидазы в качестве метки в иммуноферментном анализе
- активной пленкой с ферментом покрывают непосредственно газоселективную
мембрану электрода
Иммобилизация иммуноглобулинов на поверхностях диоксида кремния, покрытых
