Практикум по цитологии растений - Паушева З.П.
ISBN 5-10-000614-5
Скачать (прямая ссылка):
В метафазе I отсутствует ядерная оболочка, биваленты собраны в экваториальной зоне и прикреплены к нитям веретена двумя центромерами. Ядрышко отсутствует. Биваленты короткие и утолщенные, интенсивно окрашены.
В анафазе I каждый бивалент распадается на две гомологичные хромосомы, направляющиеся к разным полюсам.
В телофазе I (рис. 77, а) хромосомы конденсированы. В конце этой фазы у злаковых происходит цитокинез. Из одной клетки образуются две, значительно отличающиеся по форме от исходной. Обе клетки (диада) вступают в интеркинез. ,
Следует обратить внимание, что в течение первого деления мейоза изменяется форма клеток, вступивших в мейоз. Они постепенно округляются, особенно в метафазе, анафазе и телофазе, что хорошо наблюдать у злаковых культур. В интеркинезе обе клетки диады имеют форму плосковыпуклых линз. Их содержимое окружено каллозой (полисахарид 1,3-|3-глюкан). В течение первого деления мейоза уменьшается' содержание РНК, идет элиминация рибосом. В профазе I разрушаются клеточные стенки и заменяются оболочками из каллозы.
Во втором делении мейоза восстанавливается уровень рибосом. Метафаза II отличается от метафазы I тем, что одновременно в двух клетках видно веретено деления. В экваториальной плоскости каждого веретена находится группа хромосом (рис. 77,6). Хромосомы метафазы II более длинные, чем метафазы I.
В анафазе II хроматиды расходятся, и когда расхождение завершается, то в обеих клетках одновременно четко видны полюса с хромосомами.
В телофазе II хромосомы на полюсах теряют свою форму, постепенно формируются ядро и ядрышко. После цитокинеза возникает тетрада гаплоидных микроспор. Каллоза растворяется фер-
Рис. 77. Первое (а) и второе (б) мейотические деления в пыльнике ржи (ми-чрптомпые препараты),
Рис. 78, Тетрады микроспор:
а — в пыльнике ржи; б— в иылышке гречихи (микротомцые препараты).
ментами в конце периода образования тетрад. На этом заканчивается второе деление мейоза и переход от спорофита к гамето-фиту.
Тетрады микроспор разных видов растений имеют неодинаковый внешний вид. У ржи, пшеницы, лилии все микроспоры тетрады расположены в одной плоскости, так как оси фигур делящихся клеток во втором делении ориентированы параллельно. Форма каждой микроспоры напоминает сектор круга (рис. 78,а). Это так называемый изобиллатеральный тип тетрад.
У гречихи, вики клетки тетрады расположены в разных плоскостях, так как фигуры делящихся клеток во втором делении перпендикулярны др'уг другу. Этот тип расположения тетрад называют тетраэдрическим (рис. 78,б).
При анализе мейоза учитывают время заложения клеточной перегородки. У однодольных растений чаще встречается сукцес-сивный (последовательный) тип образования тетрад, когда перегородки в телофазе закладываются как в первом, так и во втором делениях мейоза. Интеркинез при этом может быть длительным. У двудольных растений чаще (но не всегда) наблюдается симультанный (одновременный) тип образования тетрад — когда четыре клетки возникают сразу после завершения двух делений мейоза. Интеркинез при этом сокращен. Встречается, хотя и редко, промежуточный тип образования тетрад микроспор, при котором перегородка после первого деления мейоза закладывается не полностью и последующее развитие протекает по симультанному типу.
Изучение микроспорогенеза в пыльниках
на давленых препаратах
Молодые колосья пшеницы до выколашивания (когда до выхода колоса из листового влагалища остается около 3 см) или бутончики других культур фиксируют по Карнуа или уксусным алкоголем в течение 10—12 ч. Материал промывают и хранят в 70— 80%-м растворе этилового спирта или оставляют в фиксаторе, но помещают его в холодильник. Можно использовать для тех же целей фиксатор Ньюкомера. В этом случае фиксированный материал через сутки нужно перенести в свежий фиксатор и хранить в холодильнике.
Пинцетом извлекают пыльники из цветков и помещают их на предметное стекло. Свежий или зафиксированный пыльник дробят на мелкие кусочки или готовят мазок при помощи пинцета. Содержимое пыльника окрашивают ацетокармином с подогревом препарата на спиртовке. Нередко зафиксированные пыльники до окрашивания выдерживают около 30 мин в 4%-м растворе железоаммонийных квасцов, промывают водой и помещают в тигель с ацетокармином и переносят на сутки в термостат.
Хорошие результаты получают при окрашивании пыльников по Фёльгену. Для этого зафиксированные пыльники промывают водой, затем споласкивают 1 н. раствором НС1 и помещают на гидролиз в 50%-й раствора НС1 на 20 мин, а затем в реактив Шиффа на 1—2 ч. Просмотр содержимого пыльников на предметном стекле ведут в капле 45%-го раствора уксусной кислоты. Удачный препарат окантовывают парафином или переводят в постоянный. Препарат после окраски можно заключить в раствор Гойера: подогреть 10 мл Н20, растворить в ней 6 г гуммиарабика, 3,2 г глицерина, 40 г хлоралгидрата.
Для подсчета числа хромосом можно использовать метафазу первого деления мейоза, когда хорошо видны биваленты хромосом. Например, у кукурузы обнаруживается 10 бивалентов. Для определения 2п число бивалентов умножают на 2.
