Практикум по цитологии растений - Паушева З.П.
ISBN 5-10-000614-5
Скачать (прямая ссылка):
При экспонировании на фотоэмульсии образуется скрытое изображение объекта. Затем в процессе проявления засвеченное галоидное серебро фотоэмульсии восстанавливается в металлическое; частицы металлического серебра увеличиваются во много раз, и скрытое изображение становится видимым. Остатки галоидного серебра, чувствительные к свету, необходимо удалить при обработке фиксажем.
Обрабатывают фотоматериалы после определенной экспозиции в метолгидрохиноновом проявителе Чибисова и кислом фиксаже.
Состав метолгидрохинонового контра- Состав кислого фиксажа
стного проявителя Чибисова
Вода До 1000 мл Вода До 1000 мл
Метол 1 г Гипосульфит (тио-
Сульфит натрия безвод- сульфат) натрия 250 г
пый 26 г Метабисульфит ка-
Гидрохинон 5 г лия 25 г
Сода безводная 20 г
Бромат калия 1 г
Время проявления п,ри 20°С для негативных пленок — 6— 8 мин, репродукционных и диапозитивных пластинок — 4, фотобумаги— 2 мин. Время закрепления в фиксаже—5—10 мин.
Если контраст негатива невысокий, для получения наибольшего количества деталей для фотопластинок, кинофотопленок и фотопленок применяют метолгидрохиноновый мелкозернистый проявитель с бурой (Д-76). Состав его следующий:
Вода (30—45 °С) 750 мл
Метол 2 г
Сульфит натрия безводный 100 г
Гидрохинон 5 г
Бура кристаллическая 2 г
Вода холодная До 1 л
Время проявления в бачке—18 мин, в кювете—14.
При съемке препаратов во время наблюдений методом темного поля или фазового контраста используют средне- и высокочувствительную пленку «Изопанхром 18». Для окрашенных препаратов обычно применяют изоортохроматические фотоматериалы, но, если на препарате имеются участки красного цвета, лучшие результаты дают панхроматические и изопанхромати-чески$ фотоматериалы. Снимки на последних получаются более
выразительными. В последнее время в микрофотографии используют негативные пленки, предназначенные для микрофильмирования (Микрат-300), мелкозернистые, с высокой разрешающей способностью.
Состаз проявителя для пленки Микрат-300
Метол 5 г
Сульфит натрия безводный 40 г
Гидрохинон ' 6 г
Поташ (карбонат калия) 40 г
Бромат калия 6 г
Вода До 1000 мл
Температура проявления 20°С. Время проявления 6 мии. Можно использовать проявитель Д-76, но при этом время проявления увеличивается в 2,5—3 раза.
Состав фиксажа для пленки Микрат-300
Гипосульфит натрия 250 г
Сульфат натрия безводный 25 г
Серная кислота (плотность 1,84) 5 мл
Вода До 1000 мл
Очень важно в микрофотографии определить увеличение изображения. Для этого на столик микроскопа после фотосъемки препарата помещают объект-микрометр, который проектируется на матовое стекло фотокамеры. Объект-микрометр фотографируют при той же комбинации окуляра и объектива, что и снимок, а затем точно измеряют одш> деление и переносят на снимок. Можно объект-микрометр не фотографировать, ио точно измерить одно его деление на матовом стекле. В обоих случаях после этого необходимо вычислить отношение размера деления объекта-микрометра на стекле фотокамеры к действительной его величине. Например, на матовом стекле размер одного деления объекта-микрометра равен 5 мм, а в действительности— 0,01 мм. Разделив первое число на второе (5:0,01), получим увеличение изображения. Оно равно 500.
Если фотосъемку ведут камерой с раздвижным мехом и во время съемки используют окуляр и объектив микроскопа, то определить масштаб изображения можно по формуле
В= VmVo^-j, (11)
где В — масштаб изображения; У0б и К0« — увеличение объектива и окуляра; К — длина камеры; Р — расстояние наилучшего видения (250 мм).
МЕТОДЫ НАБЛЮДЕНИЯ ПРИ ПОМОЩИ МИКРОСКОПА
Обычно световой поток от источника света при отсутствии препарата образует в поле зрения микроскопа равномерный фон — «невозмущенный свет». Если положить на предметный столик
препарат, то неоднородные частицы объекта, отличающиеся друг от друга и от окружающей среды по поглощению света и показателю преломления, образуют рассеянный свет, который и создает изображение. В результате наложения рассеянного и иевозмущенного света возникает интерференция, определяющая в зависимости от соотношения фаз и амплитуд световых колебаний контраст освещенности изображения.
