Практикум по цитологии растений - Паушева З.П.
ISBN 5-10-000614-5
Скачать (прямая ссылка):
К источнику света предъявляют ряд требований, из которых самые важные: яркость, форма, размеры светящегося тела, световая отдача, срок службы, наличие коллектора (собирательной линзы для сужения светового потока) и трансформатора. Изменение напряжения в сети всего на 1% снижает срок службы ламп на 13%. Наибольшей яркостью обладают источники света со светящимся телом небольшого размера.
При подборе ламп необходимо учитывать, что в самой оптической системе микроскопа происходят потери света из-за рассеяния, поглощения и отражения, причем пыль на линзах усиливает рассеяние. Потери света, по некоторым расчетам, могут составить до потока излучения. Все это ухудшает качество изображения.
Современные осветители (ОИ-19, ОИ-9м) имеют электрическую лампочку, заключенную в светонепроницаемый кожух, коллектор (повышает выход света), диафрагму поля зрения и светофильтры. Для удобства осветитель крепят на штативе и снабжают металлической планкой, при помощи которой его располагают на определенном расстоянии от зеркала микроскопа. Правильно налаженное освещение дает возможность наиболее полно использовать разрешающую способность микроскопа и получить хорошее качество изображения (рис. 12).
При установке освещения не нужно стремиться к тому, чтобы освещать объект с избытком, так как лишний свет не участвует в построении изображения, но снижает его контрастность за счет рассеяния и других причин. Конденсор выполняет очень важную функцию — увеличивает изображение источника света для заполнения световым потоком апертуры объектива. Исследователь должен так установить осветитель» чтобы коллектор передал изображение источника света на апертурную диафрагму, всю ее заполнив светом. Если это условие не выполнено, возможности микроскопа реализуются не полностью.
Наиболее равномерное освещение поля зрения под микроскопом с минимальным рассеянием достигается при установке света по принципу Кёлера, т. е. так, чтобы апертуры объектива и конденсора соответствовали друг другу. Рационального освещения объекта легко достигнуть, работая с осветителями ОИ-19 и ОИ-9м. Они обеспечивают равные апертуры коллектора осветителя, конденсора и объектива. Так, для объективов больших увеличений (20Х и более) подбирают конденсор.
с апертурой 1,4, для объективов малых увеличений — конденсор с апертурой 0,3. В конденсоре осветителя ОИ-14 для работы с объективом малого увеличения есть специальная очковая линза с апертурой 0,3, которая ввинчивается в верхнюю часть конденсора после удаления оправы. Если не заменить конденсор с апертурой 1,4 на конденсор 0,3, то при установке света не удается осветить все поле зрения при малом увеличении (например, с осветителем ОИ-19).
Чтобы равномерно осветить поле зрения микроскопа, добиться минимального рассеяния света, правильно заполнить светом апертуру объектива, выполняют следующие правила.
1. На расстоянии 250 мм перед микроскопом (Биолам Р, МБР-3) устанавливают осветитель (ОИ-19, ОИ-9м) при помощи соединительной планки. Удаляют матовое стекло под конденсором, а сам конденсор ставят в верхнее положение на уровне столика микроскопа. В конденсоре ОИ-14 необходимо' совместить индекс шкалы с нулевым делением. Осветитель соединяют с трансформатором, который включают в сеть. Световой поток от осветителя направляют на плоское зеркало. Добиваются четкого изображения нити накала источника света на закрытой диафрагме конденсора путем перемещения патрона лампочки вдоль оси. При этом необходимо удалить матовое стекло из осветителя и закрыть его диафрагму, иначе трудно получить четкое изображение нитей лампы (во время этой операции на зеркало помещают кружок белой бумаги). После того как нить лампы спроектирована, вставляют матовое стекло в прорезь осветителя.
2. Фокусируют микроскоп на исследуемый объект путем перемещения тубуса при открытых диафрагмах осветителя н конденсора.
3. Закрывают диафрагму осветителя и качанием зеркала добиваются ее изображения (светлый круг) в поле зрения микроскопа (см. рис. 12,/). Затем изображение отверстия диафрагмы наводят на резкость перемещением конденсора (2) и устанавливают светлый круг в центр поля зрения при помощи зеркала (3).
4. Открывают диафрагму осветителя так, чтобы освещенный круг немного выходил за пределы поля зрения микроскопа (4).
5. Вынимают окуляр, закрывают диафрагму конденсора и смотрят в тубус. Необходимо увидеть закрытую диафрагму конденсора в выходном зрачке объектива. После этого диафрагму начинают открывать до тех пор,' пока ее отверстие не совпадет с границами выходного зрачка объектива. Для повышения контрастности изображения диафрагму можно открыть до 2/з выходного зрачка объектива. Затем окуляр помещают » тубус. Светофильтр вставляют в прорезь осветителя. Силу
освещенности препарата регулируют реостатом осветителя или нейтральными светофильтрами.
6. Изучение препарата начинают с малого увеличения, затем переходят к более сильному сухому объективу и в последнюю очередь, если это необходимо, к иммерсионному. При замене объективов на более сильные заново устанавливают свет, поскольку последние имеют большую апертуру.
