Практикум по цитологии растений - Паушева З.П.
ISBN 5-10-000614-5
Скачать (прямая ссылка):
Перед тем как делать снимок с препарата, необходимо добиться, чтобы сетка и изображение объекта были видны одновременно резко. На окуляр можно поместить дымчатый свето-' фильтр, чтобы сильный свет не попадал в глаза.
К микроскопам МБС-1, МБС-2 выпускается микрофотонасадка МФН-5. Универсальная пластинчатая микрофотонасадка МФН-7 (размер пластинок 6,5X9 см) приспособлена к различным моделям микроскопов, имеющих стандартное гнездо для окулярного тубуса. Достоинство микрофотонасадки МФНЭ-1 — автоматический экспонометр. Микроскоп МБИ-15 снабжен фотокамерой с автоматическим экспонометром. При работе с микроскопом МББ-1 предпочтительнее пользоваться микрофотонасадкой МФН-11, но можно и МФН-7, МФН-8, МФН-9, МФН-12, а с микроскопами «Биолам Р», кроме МФН-12, еще и МФН-7 и МФН-8.
Во время микрофотосъемки можно использовать обычные осветители (ОИ-19, ОИ-9м) или специально предназначенный для фотосъемки (ОИ-24, лампа 12В, 100 Вт).
Существуют специальные приборы для микрофотосъемки — микрофотоустановки ФМН-3 и ФМН-2. Прибор ФМН-3
Микрофотонасадка
Рис. 17.
МФН-12:
1 — фотокамера; 2 — визирная трубка; ¦3 — вертикальный тубус.
(рис. 18) имеет пластинчатую фотокамеру (размер пластинок 9x12 см) с раздвижным мехом, фотозатвор, осветитель с лампой накаливания мощностью 170 ватт и светофильтрами, зеркальную насадку для фокусирования изображения и визуальную насадку, которую устанавливают вместо тубуса на микроскопе и в нее вместо окуляра помещают гомаль. Прибор ФМН-2 — универсальный, он предназначен для фотографирования как микро-, так и макрообъектов. Этими приборами удобнее всего делать снимки с микроскопом МБИ-3, но можно применять и рабочие биологические микроскопы.
Кроме микрофотонасадок и микрофотоустановок, с микроскопом можно использовать малоформатные зеркальные фото-
~ аппараты типа «Зенит» («Зе-нит-С» и «Зенит-ЗМ») со специальными приспособлениями в виде колец (не путать с удлинительными кольцами, выпускаемыми для фотоаппаратов; они непригодны для микрофотосъемки!) или .переходными муфтами, которые насаживают на тубус микроскопа. Для фотосъемки фотоаппарат с удаленным объективом соединяют с тубусом микроскопа при помощи этих колец или муфт.
Иногда для микрофотосъемки приспосабливают вертикаль-
Рис. 18. Прибор для микрофотосъемки ФМН-3:
i — основание; 2 —> микроскоп; 3—4 визуальная насадка с раздвижным мехом; 5 — зер-кальная насадка; 6 — осветитель; 7 ~ трансформатор к осветителю.
ную пластинчатую фотокамеру с раздвижным мехом, удалив из нее объектив. Микроскоп ставят под фотокамерой так, чтобы окуляр был против центра отверстия объектива и центра матового стекла. Используют осветитель ОИ-24.
Перед любой микрофотосъемкой тщательно удаляют пыль с микроскопа. Освещение препаратов устанавливают по Келеру. В момент фотосъемки лампе осветителя дается максимальный накал. Микрофотографирование препаратов с небольшим увеличением ведут с низкоапертурным конденсором.
При подборе светофильтров учитывают их назначение. Черно-белые объекты можно фотографировать без них или с зелеными и синими светофильтрами, усиливающими контраст. Препараты, на которых преобладают светло-синие и голубые тона, фотографируют с оранжевым светофильтром, а красные— с зеленым. Для окрашенных препаратов необходимы объективы-апохроматы. Если во время микрофотографирования применяют иммерсионный о'бъектив, диафрагму конденсора оставляют открытой. Иммерсионное масло не должно иметь пузырьков.
Большое значение придается центрированию системы (источник света — оптическая ось микроскопа — центр матового стекла) и установке на резкость по матовому стеклу. Эти операции тщательно выполняют до съемки.
Выбор экопозиции в микрофотографии зависит от многих причин: источника света и светофильтров, комбинации объектива и окуляра (экспозиция обратно пропорциональна квадрату апертуры), среды между препаратом и объективом, объекта, фотоматериала и др. Удобно устанавливать выдержку автоматическим экспонометром. Если его нет, то выдержку подбирают.
При использовании пластинчатых микрофотонасадок после установки освещения и проверки на резкость по матовому стеклу выключают свет, вставляют кассету с фотопластинкой и выдвигают ее шторку на У4. Экспонируют, например, 5 с (по секундомеру) с включенным светом. Гасят свет, выдвигают шторку еще на V4 и вновь дают ту же экспозицию, повторяют эту операцию еще два раза. В результате на одной фотопластинке будет четыре экспозиции: 20, 15, 10 и 5 с. После ее проявления выбирают необходимое время экспозиции. Пленочными микрофотонасадками делают несколько пробных снимков с разной экспозицией, проявляют их и выбирают лучший.
Правильная передача тонов фотографируемого препарата зависит, кроме экспозиции, от фотоматериалов и их обработки после фотосъемки. Лучше всего иметь набор низкочувствительных мелкозернистых фотопластинок, отличающихся по спектральной светочувствительности, назначению, контрастности (нормальные и контрастные). Ортохроматические диапозитив-
ные или орторепродукционные фотопластинки желательно иметь двух сортов: полутоновые и штриховые (более жесткие). Орторепродукционные пластинки используют для съемки малоконтрастных препаратов. Ортохроматические и панхроматические пластинки применяют для правильной цветопередачи окрашенных препаратов.
