Биохимия мембран. Рецепторы клеточных мембран. Том 4 - Кульберг А.Я.
Скачать (прямая ссылка):
(ДНФ). В материале, "снятом" с поверхности клеток с помощью трипсина,
содержатся
79
фрагменты рецепторов, которые специфически взаимодействуют с указанными
иммобилизованными лигандами. То, что эти фрагменты рецепторов содержат
радиоактивную метку, свидетельствует об их биосинтезе клетками-мишенями.
Помимо способности фиксироваться на упомянутых лигандах, трипсиновые
фрагмен-ты рецепторов, включившие^ радиоактивность, связываются с
иммобилизованными гомологичными антителами к тем же лигандам (А. Я.
Кульберг и др., 1985; Л. Н. Бартова и др., 1986).
В качестве примера можно привести результаты изучения фрагментов
рецепторов, "снятых" трипсином с поверхности фиб-робластов. Как следует
из рис. 11, радиоактивный материал, связывающийся с иммобилизованным АРС,
способен взаимодействовать с иммобилизованными антителами кролика против
АРС. Действительно, после пропускания материала, "снятого" с поверхности
фпброластов, через иммобилизованные анти-АРС-аптитела, в вытекающей из
колонки жидкости примерно на 70% снижается содержание белка, способного
взаимодействовать с иммобилизованным АРС. В аналогичных опытах на клетках
линии P388Di было показано, что один и тот же продукт специфически
связывается с гаптеном и антителами к этому гапте-ну. Так как клетки
линии однородны и являются потомками одной трансформированной клетки,
можно заключить, что обе составляющие изучаемых трипсиновых фрагментов
белков цитоплазматической мембраны продуцируются одной и той же клеткой.
Поскольку мембранные^ДелшТг-распаанающие те или иные лиганды, обозначают
как рецепторы, то белкгГмембраиьГ взаи-модействующие с антителами
против_лигандд, правомерно обозначить как антирецепторы.
Из предыдущего следует, что один и тот же продукт, содержащийся в
растворе после обработки клеток трипсином, обладает лигандсвязывающими
свойствами и способностью взаимодействовать с антителами к тому же
лиганду. Означает ли это, что оба свойства присущи одному и тому же
белку? Экспериментальные данные, полученные при изучении макрофагального
рецептора для Clq, позволили дать ответ на этот вопрос (А. Я. Кульберг и
др., 1986).
Как было показано, Fab-фрагменты антител против Clq не способны
заблокировать непосредственно на клеточной поверхности активный центр
рецептора для Clq (см. с. 151). Вместе с тем этим свойством обладают Fab-
фрагменты антител против антител к Clq, т. е. фрагменты
антиидиотипических антител. Ингибирующим действием обладают также Fab-
фрагменты ан-тивариотипических (анти-Кд) антител. Все это может означать,
что рецептор для Clq на клеточной поверхности пространственно изолирован
от антирецептора, комплементарного антителам против Clq.
Иная ситуация наблюдается при изучении внеклеточной части рецептора для
Clq, изолированной в результате обработки макрофагов трипсином. Как и в
других экспериментах, макро-
80
фаги культивировали в присутствии изотопа глицина. Внеклеточный участок
рецептора изолировали с использованием иммобилизованного Clq. Полученный
препарат обладал свойством фиксироваться на иммобилизованных антителах
против Clq (А. Я. Кульберг, Н. Д. Ивановска, И. А. Тарханова, 1986). Тем
самым в изолированном виде внеклеточный участок рецептора для Clq вел
себя подобно изолированным внеклеточным участкам рецепторов для АРС и
ДНФ, т. е. соединял в себе свойства как рецепторного, так и
аптирецепторного белков.
Эти данные позволяют сделать важное заключен!^ будучи пространственно
изолированными на клеточной поверхности рецептор и антирецептор способны
своими внеклеточными участ-
ками взаимодействовать между сабля; такое взаимодействие
реализуется, в частности, в рягтипрр после "срезания" внеклеточных
участков рецептора и антиреиептора с помощью трипсина. Описываемое
взаимодействие происходит, как представляется, по типу взаимодействия
идиотип-аптиидиотип. Носителем нднотипспецифпческих структур является
активный центр рецептора (см. разд. 3.3). Что касается аптирецептора, то
по признаку сродства к антителам против данного лиганда его следует
рассматривать в качестве носителя антиидиотипических структур.
Обнаружение антирецепторов и продукция этих мембрано-связанпых белков
теми же клетками, которые синтезируют комплементарный ему рецептор,
крайне важно для понимания биологической роли рецепторов в регуляции
клеточного гомеостаза (см. гл. 6). Эти данные существенны также для
объяснения механизма обмена клеточных рецепторов. Становится понятным
механизм спонтанной макроагрегации рецепторов, которая происходит без
участия агентов, способных извне "сшивать" определенные рецепторы.
Как известно, положение рецепторного белка в мембране клетки не является
постоянным, он как бы плавает в ней, медленно перемещаясь в плоскости
мембраны (J. Schlessinger, 1980). В ходе этих перемещений ранее
разобщенные рецептор и комплементарный ему~антирецептор могут сблизиться
и прореагировать посредством своих внеклеточных участков. Это приведет к
