Клетки в морфогенезе - Исаева В.В.
ISBN 5-02-005760-6
Скачать (прямая ссылка):
выше особенностями оогенеза, делают ее объектом для исследования цитоскелета ооцитов.
Высокая концентрация фибриллярного актина обнаружена и в ядрах ооцитов Henricia hayashi, Echinocardium cordatum и Mactra sulcataria-!'!аЖ0РНЫЙ белок клеточных ядер. Данные о внутриядерной
ler Jiang полУчены как на соматических клетках (см.: Schind-
(см • Thibault и я! 1987^ так и на ооцитах млекопитающих
1985- Scheer 1986) и I! Шфибий (Scheer et al., 1984; Scheer, Dabauvalle,
-Ss (BSpudich й al" 1988)- AK™"““e s
хромосом типа ламповых щетТ ^ Р°ЦеССЫ транскрипции в петлях Scheer, 1986) и ядеоно-пит™ 00Читов амфибий (Scheer et al., 198 ,
1986); фибриллярный акт„™3тлГЧеСКИЙ тРаиспоРт (Schindler, Jiang,
крупными, функционально акптш00 ВЫЯвляется именно в ооцитах
При несомненной Ми яДРами.
го “ нности осевых различий поляризованного
распределения фибриллярного актина, как и ориентация анимально-вегетативной оси ооцитов иглокожих, локализацией прикрепления ооцита в яичнике остается неясным конкретное положение анимального и вегетативного полюсов ооцита относительно структур яичника. Маркер анимального полюса яиц - полярное тельце (тельца) появляется у ооцитов иглокожих после потери их контакта со структурами яичника и, как правило, после утраты морфологического маркера полюса прикрепления. Данные о соответствии места прикрепления ооцита анимальному или же, наоборот, вегетативному полюсу яйца иглокожих противоречивы и основаны главным образом на косвенных фактах (см.: Равен, 1964; Иванова-Казас, 1978; Schroeder, 1980; Smiley, Cloney, 1985). Лишь для голотурии Stichopus californicus прослежена преемственность полюсов и установлено соответствие морфологически маркированного места прикрепления ооцита к фолликулярному эпителию анимальному полюсу яйца (Smiley, Cloney, 1985).
Так или иначе, локализация места прикрепления ооцита в яичнике детерминирует возникновение локальной же особенности организации кортикальной сети фибриллярного актина и глобальной поляризации его распределения в яйцевой клетке.
ПАРАДОКСАЛЬНЫЙ ЭФФЕКТ ЦИТОХАЛАЗИНА:
АКТИВАЦИЯ ЯИЦ И АМЕБОИДНАЯ ПОДВИЖНОСТЬ ООПЛАЗМЫ
Итак, становление и поддержание анизотропии ооплазмы, по-видимо-му, зависит прежде всего от морфофункциональной организации кортикальной сети фибриллярного актина. Цитохалазины, нарушающие, как известно, структуру и функции актиновых филаментов, широко применяются в качестве ингибиторов различных зависимых от актиновых филаментов проявлений клеточной и субклеточной подвижности, в частности, оплодотворения и цитотомии, что весьма подробно исследовано на морском еже (Longo, 1980, 1986; Schatten, Schatten, 1981; Schatten, 1982, 1984; Cline et al., 1983; Schroeder, 1986); подобный же эффект оказывает латрункулин (Schatten, Schatten, 1986; Schatten et al., 1986b). Цитохалазин подавляет и амебоидную подвижность яйцевых клеток, что было показано при исследованиях подвижности ооцитов моллюска Spisula (Rebhun, 1975; Carroll, Eckberg, 1986). Мы применили обработку цитохалазином В с иной целью: индукции амебоидной подвижности яиц морского ежа; предполагалось, что нарушение цитохалазином нормальной организации ригидного кортикального цитоскелета может привести после отмывки ингибитора к двигательной активности яиц, что и наблюдали в действительности наряду с неожиданным эффектом цитохалазина как активирующего агента (Исаева, Чуриков, 1988а). Подобное действие (при некоторой специфичности эффекта) оказывал и цитохалазин D.
В растворах цитохалазина D при концентрациях 5-20 мкг/мл или цитохалазина D (2-5 мкг/мл) через 8-9 мин происходит интенсивное, хорошо заметнре сокращение кортекса и отделение оболочки оплодотворения у
21
iODMfifr
неоплодотворенных яиц морского ежа Strongylocentrorus nudus (рис. 15) ц Echinocardium cordatum. Доля реагирующих таким образом яиц возрастала с увеличением концентрации раствора цитохалазина в указанных пределах. Вскоре яйца приобретали характерную для обработанных цитохалазином яиц грубоструктурированную морфологию кортекса, кортикальная подвижность прекращалась. Более длительное пребывание яиц S nudus в растворах цитохалазина D (в течение 1-2 ч) обычно приводило к появлению хорошо заметных статичных складок поверхности, нередко
радиально расположенных (рис. 16).
Bbi3bZZyZa^6'?3б0ТКа ЯИЦ ИНГИ6ИТ°Р°М с последующей его отмывкой ™движностъ 10-90% яиц (данные о зависимости Исаева Чуриков 198!Ы рПлазк’ои 01 Кончентрации цитохалазина В см.:
ности (периодические ^рда^“ '“* аМеб°ИДН0Й П0ДВИЖ.‘
различного размера и форКбы™ г*Т ’ обр*зование псевдоподии
так и не отделившим оболочку У яВ°ИСТвенны яицам как отделившим, ность либо протекала Енутои 1' отделившИх оболочку, подай»-
СЛОЯ И оболочки оплодотвопримо к Г1риводила к разрыву гиалинового и выползанию ооплазмы ич is, ’ обРазованИ1о большой псевдоподии и оболочка осавалй SSSE* °б°Л°Чек (рис* 17>- Гиалиновый слой том яйца, часто отрывающим™ ^ ° небольшим сферическим фрагти-
