Клетки в морфогенезе - Исаева В.В.
ISBN 5-02-005760-6
Скачать (прямая ссылка):
Наблюдались две основныедСНОВной массы ооплазмы.
скоростью видимых изменений подвижн°сти, различавшиеся
к п°вторному воздействию МоРФ°логии яиц и чувствительностью проявлялась в разнообразных 'J_ltToxaj,a3mia- "Быстрая” подвижность на людении и Фотографирова>ш»МеИениях Ф°РМЫ> регистрируемых при (СМ' рис' 17)- в некотопыу 1!!,,Тервалами от 30 с до несколько сопутствующим видимым пеоетрк-АЛУЧаЯХ заметные изменения формыс
22 Нием эндоплазмы осуществлялись eutf
а
б
\__________________________I
в • 2
Рис. 17. Амебоидная подвижность яйца S. nudus, обработанного цитохалазином В (10 мкг/мл, 10 мин) через 1 ч 30 мин (a)t 1 ч 31 мин (б)% 1 ч 31 мин 30 с (в), 1 ч 32 мин (г) после отмывки (Исаева, Чуриков, 1988а)
а
Рис. 18. Фрагментация яйца S. nudus после обработки цитохалазином В (10 мкг/мл, 10 мин)
через 1 ч 50 мин (а), 1 ч 51 мин (б), 1 ч 52 мин (о) после отмывки (Исаева, Чуриков 1988а)
s f
—...........* \^<*
Рис. 20. Амебоидность ооплазмы яйца S. nudus при непрерывкой инкубации в растворе цитохалазина D (5 мкг/мл) в течение 5 ч (а) и 20 ч (б)
19 Амебоидность ооплазмы че-6 ч после обработки цитохалази-НОМ в с последующей отмывкой Рядом - сферическое неподвижное яйцо S.
бозсрнистой структурой кортекса (Исаева, Чуриков, 1988а)
наиболее выражена через 1-1*5 ^ек^нд’ быстрая подвижность была Длилась в течение 1-2 ч и бло^п обРабот1<и цитохалазинами,
халазина (в концентрации 2 икг/мп1аЛаСЬ ?0втоРным Добавлением цито-
г Итогом фазы быстрой подвижГ' ВЫШе)‘ ыстро прекращавшееся дроблет^ неред^° оказывалось аберрантное,
“ГЯ* В!!Утрн оболочки или Апяг,0 разованием двух-четырех (Ьпяг Чаще же не наблюдалогк .6НТаЦ1Ш ЯИц’ лищенных оболоч-
ла п ,''ента^ии> и быстрая подвижност^3*- аберрантного Дробления или как г/!? «°И™Пподвижности- значит""0 2рекраавлась»либоперехода-часов и расгекание” ооплазмы сопрп И° ее меДленное движение,
Этот тип Р“ВОдившее к возникновению аВШ<кеСЯ R течение нескольких болер тпг 0Движн°сти оказался аме®°°бразных форм (рис. 19).
возникали Непосредстве»но в раствопрУ1ВСТШ1ТеЛЬНЫМ к Цитохалазину;
сначала каплевидные мп итохалазина В или D (5 мкг/мл)
24 моноподиальные формы и через не-
I________I
Рис. 21. Адгезивность к субстрату яиц S. nudus после обработки цитохалазином В с последующей отмывкой (Исаева, Чуриков, 1988а)
Рис. 22. Амебоидная подвижность ооцита S. nudus в растворе цитохалазина D (2 мкг/мг, 1 ч)
сколько часов - амебообразные формы с несколькими ’’лобоподобиями” (рис. 20); доля тех и других форм составляла 5-10% от числа обработанных яиц. После длительного пребывания в растворе цитохалазина D ооплазма каждого яйца принимала причудливую червеобразную форму (пример см. на рис. 20).
Обработанные цитохалазином (2 и 5 мкг/мл) яйца без оболочки оплодотворения отличались от интактных неоплодотворенных яиц адгезив-ностью - они прилипали к субстрату (рис. 21) и друг к другу, что свидетельствует об изменениях поверхности яиц и потере нормальной ригидности кортекса. На "разжижение” ооплазмы яиц, обработанных цитохалазином, указывает также удлинение и уплощение ооплазмы, что наиболее наглядно проявляется в увеличении площади амебообразных форм по сравнению со сферическими (см. рис. 19).
Ооциты морского ежа оказались более чувствительными к действию цитохалазина, чем зрелые яйца; сразу после обработки цитохалазином во всех концентрациях (начиная с 1 мкг/мл) и даже без отмывки от цитохалазина ооциты характерным образом вытягивались, приобретая каплевидную моноподиальную форму, причем ядро смещалось к ’’переднему” концу, располагаясь у самой поверхности (см. рис. 22), и затем иногда выталкивалось. Более длительное (2-7 ч) пребывание ооцитов в растворах цитохалазина приводило к массовому возникновению типичных форм, специфичных дпя каждого из двух примененных цитохалазул'.ов.
Цитохалазин В вызывал появление на поверхности ооцитов множе :твс
округлых протуберанцев, отделяющихся от основной массы ооп;:с*?.мы (рис. 23,а). Обработка же цитохалазином D пела к ”филопо;i0f; трансформации” ооцитов: возникновению филоподиальных отроет :о? по всей поверхности клетки (рис. 23,6). Следует отметить, что исполюо-
25
S0/i«v
a * -----------1
Рис. 23. Типичная морфология ооцигов S. nudus при длительной непрерывной инку
байки в растворе цитохалазина
л - т'ТАх&лазкв В (5 мкг/мл, 5 ч); б - цктохглгзкн D (5 мкг/мл, 7 v)
Рис. 24. Амебоидная подвижность ооплазмы яйца Е. cordatum (рода* минфаллоидин)
“одоросли Pelvetia wrightii после обрабог
26
ванный в этих опытах исходный раствор цитохалазина В или D при разведении до обычно применяемых концентраций (1 и 2 мкг/мл) оказывал типичное для цитохалазина В воздействие на культивируемые клетки (первичной мезенхимы морского ежа), вызывая быстрое втягивание, исчезновение клеточных отростков (филоподий и ламеллоподий).
Подобная амебоидная подвижность ооплазмы в результате обработки цитохалазинами В или D обнаружена у неоплодотворенных яиц Echinc-cardium cordatum. Применение родаминфаллоидина выявило обычную для яиц этого вида диффузную флуоресценцию ооплазмы, несколько более интенсивную в псевдоподиальном выступе ооплазмы (рис. 24).
