Клетки в морфогенезе - Исаева В.В.
ISBN 5-02-005760-6
Скачать (прямая ссылка):
Зависимость морфогенетических событий в раннем развитии морского ежа от взаимодействий клетка-клетка и клетка-субстрат предполагали уже Густафсон и Уолперт (Gustafson, Wolpert, 1963, 1967). С тех пор механизмы таких взаимодействий в развитии морского ежа и других животных стали яснее. Клетки первичной мехенхимы зародыша морского ежа начинают синтезировать специфический набор белков, в том числе белков поверхности (Anstrom et al., 1987; Farach et al., 1987; Shimizu et al., 1988), что определяет изменение их реакций на клеточное и внеклеточное окружение. Как уже упоминалось, выселение клеток первичной мезенхимы У 3м?ГШ^ГК0Г0 ежа к°РРелиРУет с потерей сродства к гиалину (Fink. пГлпл lu М) j также эхинонектину - другому компоненту гиалиновои оболочки (BMfal е, al., 1991) - „ приобретением сродства к фиброид У, ^ лящему в состав базальной пластинки, которая служит субстрз* л°мг,птГР^™ГРаЦИИ пеРВНЧН0мезенхимных клеток. Применение антител к fKatow 1 <зопwПОД!авПЯЛ0 мигРацию клеток первичной мезенхимы г,» „ Гаким образом, функции фибронектина в морфогенетичес-
схГпн?Л поГгИ1Ш- КЛеТ°К спикУлогенной мезенхимы морского ежа
бнои ролью фибронектина и других компонентов внекле-
78
Рис. 58. Аиархизация расположения спикул в ренегатах эмбриональных
S. nudus in vitro
клеток
=='«E‘“=S=3s-
"ТмТмене"сведения об анизотрошш внеклеточного материала базальной пластинки,
„ии, определяющей пространственное
ной мезенхимы относительно двух основных коор... неожиданную
дыша - анимально-вегетативнои и дорсовентральнои. Неожидан**»
визуализацию такого рода позиционных координат мож^
четкой анизотропии генной экспрессии вдоль анимальновег^тивнои
оси зародыша морского ежа. Такая пространствешшя
дена п экспрессии некоторых генов на стадии бластулы. обла™’ 3*
смые транскриптами этих генов и их белковых прод^ов гоВДИ*
областью презумптивной эктодермы; один из этих reHoe(JAN)
ет белок, сходный с продуктом гена tolloid, » ко. ггро ct а1 1992 a>b;
тральную полярность в развитии дрозофилы tLeP 6 к белковому Reynolds е» al., 1992). Наиболее поразительно, что а^итела ^ ^
продукту этого гена морского ежа вызывают Реализацию лич _
скелета (Lepage et al., 1992 а), т-е-»ару^С,'^а^Р“^т7 расположение ности зародыша морского ежа. Можно д ’ ODCKOro ежа на на-
кольца клеток первичной мезенхимы у эм р ^
этапах спикулогенеза примерно соответствует границе между пвотштивной эктодермой и энтомеэодермой. Поэтому вполне вероятно, ™ белковый продукт гена SpAN и (или) подобных дифференциально
экспрессируемых вдоль анзакшьнснгегетативнои оси генов зародыша
мопского ежа вовлечен не только в экспрессию анимально-вегетативной
полярности; но и дорсовентральной (как белок tolloid дрозофилы), а ™кже в детерминацию пространственного паттерна клеток спикулоген-
ной мезенхимы.
МОДУЛЯЦИИ ПИТОАРХИТЕКТОНИКИ СПИКУЛОГЕННОЙ МЕЗЕНХИМЫ
И МОРФОЛОГИИ СПИКУЛ IN VITRO
В культурах диссоциированных клеток ранних эмирионов морских ежей в зависимости от условий культивирования возможна либо реконструкция из смеси бластомеров целых эмбрионов (Giudicc, 1962, Giudice, Mutolo, 1970; Millonig, 1975; Spiegel, Spiegel, 1975, 1986), способных мета-морфизировать в молодых ежей (Hinegardner, 1975), либо цитодифферен-цировка отдельных типов клеток без воссоздания целого организма.
Неоднократно предпринимались попытки культивирования в морской воде микромеров (т.е. бластомеров - предшественников первичной мезенхимы), изолированных на стадии 16 бластомеров (Pucci-Minafra et al., 1968; Hagstrom, Lonnig, 1969; Sano, 1977); в таких условиях культивирования спикулогенез не наблюдался. Не было найдено образования спикул личиночного скелета и при культивировании в морской воде клеток бластулы Strongylocentrotue purpuratus и Lytechinus pictus (Timou-rian, Watchmaker, 1975). Лишь Оказаки (Okazaki, 1975a) удалось создать подходящие условия для спикулогенеза в клеточной культуре, используя для культивирования изолированных микромеров Hemicentrotus pulcherrimus и Anthocidaris crassipina морскую воду с добавлением сыворотки; тем самым была доказана детерминированность на 16-клеточной стадии развития микромеров как будущего спикулогенного материала. Позже среда Оказаки была использована для получения спикулогенных культур клеток тех же и других (Arbacia punctulata, Strongylocentrotus purpuratus) видов морских ежей из микромеров (Rosenspire et al., 1976; Chamberlain, 1977; Kobayashi, 1977; Harkey, Whiteley, 1980; Kinoshita, Okazaki, 1984; Kitajima, 1986; Matsuda el al., 1988; Shimizu et al., 1988; Benson et al., 1990; Kiyomoto, Tsukahara, 1991), клеток первичной мезенхимы стадии мезенхимной бластулы (Mintz et al., 1981; Carson ct al., 1985; Decker et al 1987) и из первичномезенхимных синцитиев стадии гаструлы
(Harkey, Whiteley, 1980).
клеточная культура, обладающая четкими маркерам» ит,т г, лифференцировки (синцитиальность и минерализация). _ ':,TL ИСП0ПЬ30ва,,а ДЛЯ исследования особенностей экспрессии
