Клетки в морфогенезе - Исаева В.В.
ISBN 5-02-005760-6
Скачать (прямая ссылка):
ппрпгушествовавшей спикулы (рис. 79), по-ви-граиулы кальцита вблизи предсущ синцитиальН0Г0 анСамбля.
димому, вследствие фрагмен а ной мезенхимы in vitro в раство
Постоянное пребывание кле пхш1ИНа (ю-20 мкг/мл) ингибирует
ре колцемида (5-10 мкг/мл) или ^ ^ пояностью подавляет процесс
движение клеток, слияние их в в концентрации 5 мкг/мл с
спикулогенеза. Применение еПОЛНому подавлению спикулогенеза
начала культивирования ведет к н гранул кальцита. Обработка
и появлению немногочисленных о P ^ ^ течение 5_7 ч) культур с уже колхицином (5-10 мкг/мл через ^ потере расчлененности синци-
начавшимся спикулогенезом ПРНВ0Д агментаиии и коллапса. Продуци-тиапьных ансамблей вследствие их ^ ые спикулы чаще всего имеют руемые такими симпластами грану / с go).
сферическую или многогранную форму CTaJ1J10B кальцита, продуци-
Сферические и многогранные Ф Г' йствии ингибиторов, сходны с
Руемых в клеточной культуре Р я> возникающими в морской
Формами кристаллов углекислою > льтатС реакции между
воде пРи неорганической кристэлли ^ 81^ п обработке
Углекислым калием и хлористым кальцием VP
97
• /Оши
Рис. 82. Аберрантная морфология спикул после обработки клеточной культуры кол-хициком
о, б - 10 мкг/мл, С 21 по 27 ч; о, г - 5 мкг/мл, с 19 по 26 ч (Исаева. Чуриков, 19886)
а
stsktгных к”етм,« -
применение «носитель™ Еой Ko.nlT™1"0 Ф°РМ>'- Л""™лы.ос приводило к росту предсуществовапп. Л к°лхицина (5 мкг/мл)
виде причудливых образований гL ° клеточнь1х агрегатах спикул в
После длительной обработки ^ожественными отростками (рис. 82). ные трехлучевые спикулы в спикулогпи™™ ИЛИ КоЛхицином правиль-тогда как в контрольных необпяПп *Ь1Х кУЛьтУРах были редкостью, лучевые спикулы, сходные со с п и к ул а м и * *УЛЬТурах преобладали трех-Ь тех же культурах при любой !! эмбриона »а стадии гаструлы.
начала культивирования) цитохалазина^?0™ ,обработК11 (с самого
5 I j мгк/мл) наблюдалась лисЬЛрпр. М1<г/мл) или колхицином
83), для которых и в норме весьма Р циа^ия пигментных клеток (рис.
весьма обычна близкая к сферической форма.
Рис 83. Пигментные клетки в культуре, дифференцировавшиеся при непрерывной инкубации в растворе цитохалазина В (2 мгк/мл) в течение 24 ч с начала культивирования
Маркером пигментогенеза служило появление и накопление красного пигмента эхинохрома. Применение более высоких концентрации ингибиторов (5-10 мкг/мл цитохалазина или 20-50 мкг/мл колхицина) лишь несколько снижало долю пигментных клеток по сравнению с контрольными культурами.
Как известно, цитохалазины нарушают нормальную организацию актиновых филаментов путем подавления полимеризации их ка быстрорастущем конце (см. гл. I). Микрофиламенты и их пучки (или сети) найдены в отростках клеток первичной мезенхимы и синцитиев (Tilney, Gibbins, 1969- Katow Solursh, 1980). Показано, что обработка цитохалазином вызывает быстрое (в течение нескольких минут) исчезновение филопо-дий, с помошью которых клетки первичной мезенхимы прикрепляются к субстрату, перемещаются по нему и устанавливают межклеточные соединения (Karp, Solurch, 1985 b). Обнаружено, что экспрессия гена цитоплазматического актина происходит во время выселения клеток первичной мезенхимы в бластоцель (см.: Angerer, Davidson, 19 , aw son, , синтез этими клетками ряда специфических и неспецифических белков, в том числе актина, - во время цитодифференцировки (Harkey, »v hiteley, 1982), причем диссоциация клеток не изменяет качественного паттерна синтезируемых белков, модифицируя его лишь количественно, и в част кости усиливая синтез актина (Maglot, 1985). Обработанные иитохалази-ном синцитиальные ансамбли теряли свою расчлененную М°РФ°”°Г1 ’ превращаясь в компактные симпласты неправильной формы. НаЬлюда мая иногда подвижность обработанных цитохалазином и затем отмыт. от него симпластов, как мы предполагаем, обусловлена разр Ригидной цитоскелетной сети актиновых филаментов и их с миозином - подобно вызываемой воздействием цитох -амебоидной подвижности яиц морского ежа (см. гл. ).
Колхицин и колцемид, вызывающие, как известно, разрушение микпл. тгубочек путем подавления их полимеризации, оказывали сходке с
эффектом цитохалазина воздействие на морфологию спикулогенных
синцитиев. Микротрубочки клеток первичном мезенхимы (Katow, Solursh. 19S0) и спикулогенных синцитиев эмбрионов морского ежа, По-види* мому, обеспечивают поддержание сложной трехмерной архитектоники спикулогенных ансамблей и процессы направленного внутриклеточного транспорта в ходе спикулогенеза (Gibbins et al., 1969). Колхицин (Ц)'2^ l(f* М), как и высокое гидростатическое давление, вызывал исчезновение микротрубочек.и потерю прежней расчлененной морфологии, коллапс и фрагментацию синцития первичной мезенхимы в организме эмбриона
