Высокоэффективная жидкостная хроматография в биохимии - Хеншен А.
ISBN 5-03-001337-7
Скачать (прямая ссылка):
и протопорфиринов. Очень важный диагностический признак - высокая
концентрация б-амино-левулиновой кислоты в моче.
10.5.2. Рекомендации для выбора метода лабораторного диагностирования
Клинические симптомы порфирий различного вида чрезвычайно неустойчивы,
поэтому решающую роль при выявлении этих заболеваний играют результаты
определения качественного и количественного состава порфиринов в крови,
моче и (или) кале. Проведение исследования методом ВЭЖХ всех
разновидностей проб не рекомендуется из-за относительно высокой стоимости
таких исследований и довольно высокой вероятности получения отрицательных
результатов. Наиболее целесообразной мы считаем следующую методику.
Проведение скрининга мочи пациентов с целью выявления проб с
повышенным содержанием порфиринов и их предшественников с использованием
ионообменной хроматографии нли УФ-спектроскопии по вторым производным
(полосы поглощения Соре). Последующий анализ образцов мочи с повышенным
содержанием порфиринов при помощи ВЭЖХ. Количественное обнаружение
порфиринов и их предшественников. И наконец, анализ проб крови и кала при
помощи ВЭЖХ, который необходим только в тех случаях, когда требуется
уточнить диагноз или подтвердить заболевание редкой формой порфирии
(например, porphyria variegata или erythrohepatic protoporhyria). При
обоснованных подозрениях на отравление свинцом необходим анализ
порфиринов эритроцитов.
Помимо того что ВЭЖХ может использоваться как один из диагностических
приемов, она позволяет следить за течением болезни и эффективностью ее
лечения. Возможность наблюдения за состоянием больного на основе данных
хроматографического разделения порфиринов мочи демонстрирует рис. 10.21
(наблюдение проводили в течение трех месяцев). Больной по его желанию в
этот период лечению не подвергался. Абсолютное количество порфиринов в
моче больного менялось в зависимости от объема выделяемой в течение суток
мочи и интенсивности процесса. Однако их относительное содержание
оставалось постоянным.
Следует подчеркнуть, что для диагноза заболеваний порфн-риями важно
установить не абсолютное содержание порфири-
Порфирииы 52Г.
на того или иного вида, а относительное изменение состава их смеси.
Поэтому нет необходимости определять абсолютное количество индивидуальных
порфиринов, выделяемых с мочой в течение суток.
Определение при помощи ВЭЖХ состава порфиринов, содержащихся в
экскрементах человека и биологических жидкостях, позволяет получить
воспроизводимые и точные данные. Можнс ожидать, что методика подготовки
проб к анализу в скором времени будет усовершенствована, условия
разделения оптимизированы, а качество хроматографического оборудования и
колонок повышено. Все это приведет к тому, что хроматографический метод
анализа порфиринов найдет самое широкое применение в клинической химии и
биохимии.
Литература
1. Hoppe-Seyler F., Hoppe-Seyler's Z. Physiol. Chem., 4, 193 (1879).
2. Treibs A. (ed.): Das Lebens und Wirken von Hans Fischer. Hans
Fischer Gesellschaft, Miinchen (1971).
3. Rimington C., Roets G. C. S., Fourie P. J. J. Onderstepoort J. Vet.
Sci. Anim Ind., 10, 421 (1938).
4. Rimington C., Sveinsson S. L. Scand. J. Clin. Lab. Invest., 2, 209
(1950).
5. Schwartz S.. Zieve L., Watson C. J. J. Lab. Clin. Med., 37, 843
(1951).
6. Grinstein М., Schwartz S., Watson C. J. J. Biol. Chem., 157, 323
(1945).
7. With Т. K. Clin. Biochem. (Montreal), 1, 30 (1967).
8. Doss M. Klin. Wochenschr., 47, 1280 (1969),
9. Seubert A., Seubert S., Ippen Drsch. Med. Wochenschr., 104, 1459
(1979)
10. Nacht S., San Martin De Viale L. C., Grinstein M. Clin. Chim. Acta,
27, 445 (1970).
11. Lockwood W. H" Davis J. L. Clin. Chim. Acta, 7, 301 (1962).
12. Falk J. E., Dresel E. L. B. Biochim. Biophys. Acta, 39, 458 (1960).
13. Schmitt A. J. Clin. Chem. Clin. Biochem., 15, 303 (1977).
14. Scheer H., Katz J. J., in: Smith К. M. (Ed.): Porphyrins and
Metalloporphy rins, p. 399. Elsevier, Amsterdam 1975.
15. Evans N., Games D. E., Jackson A. //., Matlin S. A. J. Chromatogr.,
115. 325 (1975).
16. Willstatter R., Fischer M. Hoppe-Seyler's Z. Physiol. Chem., 87, 423
(1913)
17. Soret J.-L. Arch. Sci. Phys. Nat., 10, 430 (1883).
18. Evans N., Jackson A. H., Matlin S. A., Towill R. J. Chromatogr.,
125, 34.r>
(1976).
19. Gray С. H., Lim С. K., Nicholson D. C. Clin. Chim. Acta, 77, 167
(1977).
20. Christersen N. G., Romslo /. Scand. J. Clin. Lab. Invest., 39,
223 (1979).
21. Matlin S. A., Jackson A. H., Evans N., in: Reid E. (Ed.):
Methodological
Development in Biochemistry, v. 5, p. 45, North Holland, Amsterdam,
1976
22. Wilson J. H. P., Van Den Berg J. W. O., Edixhoven-Bosdijk A., Van
Gastel Quist L. H. M. Clin, Chim. Acta, 89, 165 (1978).
23. With Т. K. Scand. J. Clin. Lab. Invest. Suppl., 32, 134 (1973).
24. Petryka Z. J., Pierach C. A. J. Chromatogr. Sci., 10, 103 (1979).
25. Petryka Z. J" Watson C. J. Anal. Biochem., 84, 173 (1978).
