Высокоэффективная жидкостная хроматография в биохимии - Хеншен А.
ISBN 5-03-001337-7
Скачать (прямая ссылка):
3-Сульфат эстра- 6,02 17-Сульфат эстра
эстрадиола-17р гидроэквилина нина
диола-17а диола-17р
3-Сульфат эстра- 5,53 17-Сульфат эстра 6,04 17-Сульфат эстра- 3,04
3-Сульфат эстра 6,77 3-Сульфат эквиле-
днола-17а диола-17р диола-17р
диола- 17fi нина
3-Сульфат эстра 6,06 3,17-Дисульфат 6,70 3-Сульфат 17а-ди- 3,56
3-Сульфат эквили- 6,82 3-Сульфат 17а-ди-
диола-170 эстриола гндроэквиленнна
на гидроэквнленина
3-Сульфат 17а-ди- 6,98 17-Фосфат эстра- 6,74 3-Сульфат 17-p-D- 4,97
17-Сульфат эстра- 7,38 3-Сульфат-17-p-D-
гидроэквилина диола-17Р глюкуронид эст-
диола-17р глюкуронид эстра-
радиола-17р
диола-17р
17-Сульфат эстра- 7,04 3-Фосфат эстрона 7,95 17-Фосфат эстра 5,25
3-Сульфат 17-p-D- 7,47 3,17-Дисульфат
диола-17^ диола- 17р
глюкуронид эст- эстрвола
раднола-17(5
З-Сульфат-17-^-D- 7,09 3,17-Днфосфат 9,04 3-Фосфат эстрона 6,46
3-Сульфат 17а-ди- 7,78 3,17-Дифосфат
глюкуронид эст- эстрадиола-17^
гидроэквилииа эстрадиола-17^
раднола-17р
3-Сульфат эквиле- 9,04 3-Фосфат эстра- 9,17 3,17-Дисульфат 6,97
3-Сульфат эквнле- 12,40 16,17-Дисульфат
нииа днола-17^ эстриола
нина эстриола
3,17-Дисульфат 10,90 3-Сульфат эквиле- 9,23 3,17-Дифосфат эст- 8,51
3,17-Дисульфат 13,75 3,17-Днсульфат
эстриола нина радиола-17р
эстриола-17Р эстрадиола-17р
3-Сульфат 17а-дн- 13,25 3-Сульфат 17а-ди 10,75 3,17-Днсульфат 8,51
3-Сульфат 17а-ди- 13,90 3-Фосфат эстрона
гидроэквиленина гидроэквиленина эстрадиола-17р
гидроэквилепина
16,17-Дисульфат 16,30 3,17-Дисульфат 12,90 3-Фосфат эстра- 8,71
16,17-Днсульфат 18,10 3,17-Дифосфат
эстриола эстрадиола-17р диола-17Р
эстриола эстрадиола-17р
3,17-Дисульфат 16,80 16,17-Дисульфат 16,15 16,17-Дисульфат 13,00
3,17-Дисульфат 20,65 3-Фосфат эстра
эстрадиола-17Р эстриола эстриола
эстрадиола-17Р диола- 17?
4,50
4,94
5,01
5,32
5,70
6,91
7,88
9,17
9,86
13,50
14,10
14,35
16,00
19,20
19,60
t.MH.H -
Рис. 11.6. Разделение
конъюгатов эстрогена [33].
Колонка: 250X3 мм (внутр. диаметр); неподвижная фаза: целлскс Т (14
мкм);
элюент: 0,25 моль/л перхло-рата+0.01 моль/л фосфата, pH 6,8; обнаружение:
прн
220 нм; температура: 75 °С.
/ - p-D-глюкуронид тестостерона; 2 - P-D-глгокуронид эстрона; 3-3-сульфат
эст-риола; 4 - 3-сульфат эстрона.
Рис. 11.7. Разделение 3-сульфата эстрадиола-17а (1) н 17-сульфата
эстрадиола-17р (2) [33].
Колонка: 250X3 мм (внутр.
днаметр); подвижная фаза: целлекс АЕ (14 мкм); элюент: 0,025 моль/л
перхлората-1-0,01 моль/л фосфата, pH 6,8; обнаружение; прн 220 нм;
температура: 70 °С.
V
1__1-1 ! I
0 2 4 6 8 t, мин-------
Рнс. 11.8. Разделение
3-сульфата эстриола {1) и 3-сульфата эстрона (2) [331.
Колонка: 250X3 мм (внутр.
диаметр); неподвижная фаза: целлекс PEI (И мкм); элюент: 0,25 моль/л
перхло-рата+0,01 моль/л фосфата, pH 8,5; обнаружение! при 220 нм;
температура: 50 °С.
В табл. 11.4 показано влияние некоторых типов целлюлозных
ионообменников на коэффициент емкости. Исходя из приведенных в таблице
данных, можно сделать следующие выводы.
При разделении конъюгатов эстрогенов соединение, использованное для
получения конъюгата, играет большую роль, чем сам стероид.
Конъюгаты по кольцу А элюируются раньше конъюгатов по кольцу D.
Зависимость порядка элюирования от типа стероида иллюстрирует
следующий ряд: эстриол, эстрон, эквилин, эстрадиол, эквиленин.
Сульфаты имеют самый большой коэффициент емкости; глю-курониды обычно
элюируются раньше фосфатов.
Средний размер частиц dp целлюлозного ионообменника оказывает
относительно малое влияние на коэффициент емкости, тогда как изменение
ионообменных свойств целлюлозы сказывается весьма ощутимо.
Стероидные гормоны 539
Таблица 11.5. Зависимость коэффициента емкости k от типа и размера частиц
ECTEOLA-целлюлозы [33]
Колонка: 250X3 мм (виутр. диаметр); элюеит: 0,025 М перхлорат+0,0125 М
