Вирусология: В 3-х т. Том 1 - Филдс Б.Н.
ISBN 5-03-000283-9
Скачать (прямая ссылка):
Гомологичная интерференция наблюдается не только с деле-ционными мутантами, но и с мутантами других типов. На ряде вирусных систем показано, что /s-мутанты интерферируют с ростом вируса дикого типа как при пермиссивной, так и при непер-миссивной температурах [14, 74, 174]. Кроме того, /s-мутанты способны к интерференции с другими /s-мутантами [18], что может влиять на урожай при смешанном заражении в тесте на комплементацию. Интерференция /s-мутантов с ростом вируса цикого типа может также влиять на рекомбинационный тест, снижая урожай рекомбинантов, что в свою очередь сказывается на частоте рекомбинаций [14].
Супрессия
Подавление мутантного фенотипа супрессорной мутацией хорошо изучено у бактериофагов и в других системах [50, 51, 55]. В этих системах фенотип вирусной мутации подавляется второй мутацией либо в вирусе, либо в клетке, приводя к реверсии фенотипа вируса, по-прежнему содержащего 'Исходную мутацию (псевдоревертант). У вирусов животных супрессия в достаточной степени не изучена.
Реверсия может происходить по одному из трех путей: а) за счет обратной мутации в том же самом нуклеотиде, что и исходная мутация с полным восстановлением исходной последовательности (истинная реверсия); б) в результате какого-либо события во втором сайте в том же самом гене, что и исходная мутация, например при сдвиге рамки может восстанавливаться
правильная рамка считывания (интрагенная супрессия); в) за счет супрессорной мутации в гене, отличном от гена, содержащего исходную мутацию (экстрагенная супрессия). Два последних варианта составляют генетическую супрессию.
Супрессорная мутация приводит к преодолению дефекта исходной мутации и к восстановлению дикого фенотипа вируса с мутантным генотипом. Супрессию можно доказать возвратным скрещиванием подозреваемого псевдоревертанта с диким типом (оба партнера с диким фенотипом), изучая потомство от скрещивания на присутствие исходных мутаций (мутантного фенотипа). /s-Фенотип восстанавливается у части потомства /s-мутантов, поскольку /s-дефект отделяется от супрессирующей мутации за счет рекомбинации. У вирусов, которые рекомбинируют за счет внутримолекулярного механизма, может наблюдаться как интрагенная, так и экстрагенная супрессия, в то время как у вирусов, рекомбинирующих за счет обмена сегментами, из-за сцепления маркеров в одном сегменте обнаруживается только экстрагенная супрессия. Таким образом, у сегментированных вирусов, для которых супрессия изучена лучше всего, -найденные супрессорные мутации принадлежат к экстрагенному типу.
Супрессия /s-фенотипа ts-мутации впервые обнаружена у реовируса [114]. Возвратное скрещивание необычного ревертан-та с диким типом (ts+) дало высокую частоту потомства, обладавшего /s-фенотипом. Кроме того, спасенные /s-мутанты были генетически идентичны /s-мутанту, из которого этот псевдоре-вертант был получен. Систематическое исследование ревертан-тов /s-мутантов реовируса из всех групп мутантов показало, что основной причиной появления ревертаятного фенотипа была реверсия путем экстрагенной супрессии, поскольку более 90% ре-вертантов содержало эвстрагенно еупрессировавные /s-мутации
[110]. В этих исследованиях не удалось обнаружить никаких проявлений супрессорных мутаций помимо супрессорного фенотипа й ничего нового о механизме супрессии у реовируса. Сходная супрессия /s-фенотипа наблюдалась у вируса гриппа [97]. Есть сообщение также о подавлении /s-повреждений в одном штамме вируса гриппа супрессорной мутацией другого штамма [47, 130]. У HSV описан один случай супрессии [54], когда супрессорная мутация очень тесно сцеплена с подавляемой ts-мутацией. Это свидетельствует о том, что обе мутации расположены в одном гене и что супрессия относится к интрагенному типу. Явления, напоминающие супрессию, наблюдаются у ревертаятов вируса осповакцины [92] и вируса ящура [76], однако пока эти псевдоревёртаиты не были исследованы генетически.
Супрессия мутантного фенотипа очевидно представляет собой феномен, имеющий биологическое значение для вирусов животных. Высокая частота экстрагенной супрессии, наблюдаемая
у реовирусов, указывает на то, что супрессия может представлять собой общий механизм, благодаря которому РНК-содержа-щие вирусы, не имеющие промежуточных стадий ДНК в жизненном цикле, могут обойти эффекты нежелательных мутаций {108, 110]. Этот механизм позволяет обходить эффекты спонтанно накапливаемых вредных мутаций, которые не могут быть элиминированы (или элиминируются очень неэффективно) за счет рекомбинации РНК-геномов. Вакцина против вируса гриппа, которая была аттенуирована за счет ^s-мутаций, при испытании обнаружила способность давать супрессированные псевдоре-вертанты [97]. Испытания на добровольцах показали, что псевдо-ревертанты восстановили вирулентный фенотип, очевидно в результате супрессии аттенуирующей мутации [152].
Фенотипическое смешивание
Фенотипическим смешиванием называют процесс, в результате которого индивидуальная вирусная частица, образовавшаяся при смешанной инфекции, получает структурные белки (кап-сида или оболочки), происходящие от обоих родительских вирусов. В крайнем варианте дочерний геном, генотипически идентичный геному одного из родителей, упаковывается в капсид или оболочку, определяемую другим родителем. Смешивание геномов и структурных белков приводит к образованию вирусных частиц, в которых фенотипические свойства вирусов не отражают фенотипических потенций генома. Тем не менее при последующем заражении экспрессия генома приводит к образованию потомства, в котором фенотип соответствует генотипу. Таким образом, фенотипическое смешивание представляет собой преходящий феномен.
