Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Филдс Б.Н. -> "Вирусология: В 3-х т. Том 1 " -> 82

Вирусология: В 3-х т. Том 1 - Филдс Б.Н.

Филдс Б.Н., Найп Д.М., Мэрфи Ф.А., Харрисон С. Вирусология: В 3-х т. Том 1 — М.: Мир, 1989. — 492 c.
ISBN 5-03-000283-9
Скачать (прямая ссылка): virusologiyat11989.djvu
Предыдущая << 1 .. 76 77 78 79 80 81 < 82 > 83 84 85 86 87 88 .. 224 >> Следующая

fsJ(l28) ---
О Частоты рекомбинаций представляют собой центр , ^+-рекомбинаитов без i коррекции
на двойные мутанты.
комбинаций десяти исследованных рекомбинантов варьируют от 0,93 до 10,99%. Хотя наблюдается градиент частот, мутанты нельзя упорядочить в единую самосогласованную аддитивную линейную карту. Кроме того, статистический анализ повторных скрещиваний некоторых из этих мутантов показал, что они не имеют взаимного сцепления [38]. Отсутствие сцепления ожидалось для рекомбинации по механизму обмена сегментами. Однако частоты /s+'рекомбинантов значительно ниже теоретических 25%, ожидаемых для системы со свободным обменом сегментами. Причина низких частот рекомбинантов у обменивающихся сегментами вирусов пока не выяснена; не исключено, что это связано с другими свойствами мутантов (см. ниже).
Трехфакторные скрещивания
Трехфакторные скрещивания полезны для определения сцепления между мутантами и для установления порядка тесно сцепленных мутаций у однохромосомных вирусов, рекомбинирующих по механизму разрыв — воссоединение. Когда маркеры очень далеки или очень близки, аддитивность рекомбинации нарушается, и генетик часто вынужден обратиться к трехфакторному скрещиванию для выяснения неточностей на карте. Как следует из названия, трехфакторное скрещивание предполагает использование трех мутаций, причем рекомбинантов отбирают по двум из них и не отбирают по третьей. В случае вирусов животных два селектируемых мутанта обычно принадлежат к /s-типу, а третьим маркером является такой, по которому или
А. Неселектируемый маркер справа отУ
tsX Y+
----1---------------j--------
__/ V —h--------- - [--------
X+ tsY
Y+
ZV<Z-
¦4-
tsY
В. Неселектируемый маркео между ХиУ
tsX Z* Y+
Z+*Z~
—h--------------------1-------------------1---
X+ Z~ tsY
Рис. 7.2. Схема трехфакторного скрещивания для определения взаимного порядка близких маркеров и выявления сцепления между отдаленными маркерами. Схемы Л, ? и В показывают рекомбинационные события при трех возможных ориентациях маркеров в скрещивании tsXY^Z+XX+isYZ-. Родительские геномы показаны жирной линией. Рекомбинационные события, отбираемые у Ь+-потомства, показаны более тонкой сплошной линией, а рекомбинационные события, влияющие на аллели неселектируемого локуса Z, — пунктиром.Спра-ва от каждого варианта показаны ожидаемые распределения неселектируемого маркера 2.
против которого отбор в ходе селекции ^-рекомбинантов не ведется. Таким образом проводят скрещивание типа tsXtsY+Z+X XtsX+tsYZ~. Отбирают рекомбинанты tsX+tsY+, не обращая внимания на маркер Z. Затем определяют характер распределения Z+ и Z- у ^-рекомбинантов. Соотношение Z+/Z- используют для определения порядка близких маркеров и сцепления между отдаленными маркерами. Три возможных результата скрещивания tsXtsY+Z+XtsX+tsYZ~ схематично представлены на рис. 7.2.
Б. Неселектируемый маркер слева от X
Z+
Z+>Z"
Г
Распределение маркера Z у ^Х+^У+-рекомбинантов определяется его положением по отношению к локусам X и У. Если Z расположен слева 'или справа от обоих маркеров X я У, то среди рекомбинантов ^+-типа будет преобладать один тип маркера Z. Величина неравномерности распределения Z+ и Z~ зависит ог расстояния (сцепления) локуса Z от ближайшего te-лакуса (tsX или tsY). Например, в случае А, когда локус Z расположен справа от обоих локусов X и Y, доля Z+ -в ^-рекомбинантах будет увеличиваться по мере приближения Z к Y, поскольку физическое расстояние, на котором может произойти второй перекрест (обозначенный пунктиром), становится меньше. Наоборот, по мере удаления Z от Y вероятность второго перекреста увеличивается, и 'преобладание Z+ над Z- становится меньше. Однако, даже если Z очень удален от Y, слабое сцепление остается, и в г^+-рекомбинантах Z+ будет представлен чуть больше, чем Z-. Обычно маркер Z выбирают так, что он лежит вне маркеров X и У. Однако если локус Z расположен между X и У, то распределение Z+ и Z- будет приблизительно равномерное в силу примерного равенства шансов на перекрест между локус-ами Z и X и между локусами Z я У. Однако если Z расположен между X и У и находится ближе к одному из них, то распределение Z+ и Z~ становится неравномерным. В этом случае постановка скрещиваний tsXtsY+Z~XtsX+tsYZ+ может прояснить, находится ли Z между, левее, либо правее ^s-маркеров. В идеальном случае при проведении трехфакторных скрещиваний неселектируемый маркер помещают в оба возможных положения по отношению к /s-маркерам. Такая реципрокная ориентация маркеров дает однозначные результаты.
Предыдущая << 1 .. 76 77 78 79 80 81 < 82 > 83 84 85 86 87 88 .. 224 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed