Вирусология: В 3-х т. Том 1 - Филдс Б.Н.
ISBN 5-03-000283-9
Скачать (прямая ссылка):
тивного цикла вируса, однако роль продукта гена А в трансформаций пока до конца не выяснена. Для трансформации с помощью SV40 требуются также клеточные функции. Хозяйские клетки могут быть пермиссивны для литического -роста вируса, разрешая экспрессию всех вирусных генов, приводящую к образованию вируса и лизису клетки. Они могут быть также полностью непер мисс ивными, допускающими только временную экспрессию некоторых вирусных генов; эти клетки выживают и могут быть трансформированы. Некоторые популяции хозяйских клеток, состоящие из пермиссивной и непермиссивной субпопуляций, называют полупермисоивными. Блокирование репликации SV40 в непермисстшных клетках снимается при слиянии трансформированных клеток с пермиссивными клетками, что свидетельствует о существовании диффундирующего генного продукта хозяйской клетки, определяющего пермиссивность для репликации SV40. В настоящее время основа пермиссивности остается загадкой. Вместе с тем стабильная связь пермиосивного или непермиссив-ного фенотипа с определенными клеточными линиями указывает на генетическую основу этого фенотипа. Трансформация ДНК-со-держащими вирусами подробно рассмотрена в обзоре [154].
РНК-геномные вирусы из группы ретровирусов также способны трансформировать клетки, лричем механизм этой трансформации был предметом пристального интереса. У ретровирусов две функции — трансформация и репликация — не являются взаимоисключающими, поскольку многие трансформированные клетки способны также продуцировать вирус. Тем не менее ни репликация вируса не нужна для трансформации, ни трансформация не нужна для репликации [149]. Наиболее изученная группа ретровирусов — вирусы типа С — может быть разделена на две большие подгруппы саркомных и лейкозных вирусов. Трансформация под действием вирусов этих двух групп происходит с помощью разных механизмов. Саркомные вирусы — «острые» трансформирующие вирусы, вызывающие опухоли у животных после короткого латентного периода. Они содержат особый ген (one), вызывающий трансформацию. Это доказано неспособностью /s-мутантов по этому гену трансформировать клетки при непермиссивной температуре [88]. Сравнительный анализ структуры ряда онкогенов «острых» трансформирующих ретровирусов выявил присутствие около 20 генов one, которые не родственны между собой, но близкородственны разным клеточным генам или генным семействам (см. обзор [157]). Считают, что эти вирусные онкогены представляют собой клеточные геиы, захваченные вирусом, однако механизм этого захвата остается неясным. Вирусы лейкозов не содержат генов one в геноме и трансформируют клетки только после длительного латентного периода. В общем вирусы, продуцируемые этими трансфор-
мированными клетками, не приобретают гена one. Одна из современных моделей трансформации этими вирусами предполагает, что при интеграции провируса с клеточной ДНК (см. ниже) клеточный онкоген попадает под контроль промотора транскрипции, расположенного в провирусе {56].
В дополнение к описанным выше взаимодействиям между ретровирусными и клеточными геномами некоторые хозяева и клетки имеют специфическую способность к трансформации определенными штаммами ретровирусов, а также способность поддерживать репликацию этих штаммов. Одним из хорошо изученных примеров является локус FV-1 мышей, определяющий резистентность или чувствительность к некоторым мышиным вирусам лейкозов. Аллели локуса FV-1 наследуются простым менде-левским образом [15]. Различные аспекты трансформации ретровирусами подробно рассмотрены в обзоре [167].
Интеграция
Геномы трансформирующих вирусов обычно интегрируют с геномом трансформируемой клетки. Среди ДНК-содержащих опухолеродных вирусов лучше других изучена интеграция SV40. В частности, показано, что ДНК SV40 ковалентно связана с ДНК клетки-хозяина. Количество интегрированной ДНК варьирует в пределах от <1 до >10 геномных эквивалентов на диплоидный хозяйский геном [7]. Трансформация может осуществляться при помощи субгеномных фрагментов SV40, и эти фрагменты также интегрируют с клеточной ДНК. Место интеграции непостоянно как для вирусного, так и для клеточного геномов [126]. Предложены два механизма интеграции: один из них — обычная рекомбинация между частично гомологичными вирусными и хозяйскими последовательностями, другой —незаконная рекомбинация между негомологичными участками. Имеющиеся данные позволяют отдать предпочтение второму механизму [155].
Геномы ретровирусов обнаруживаются в интегрированном-провирусном состоянии в зараженных и трансформированных клетках. РНК-геном ретровирусов подвергается обратной транскрипции с образованием ДНК на начальном этапе репликативного цикла, после чего образованная ДНК (провирус) интегрирует с геномом клетки-хозяина. Механизм интеграции ретровирусов имеет три отличительные особенности [157]: а) место включения в хозяйскую хромосому неспецифично и не имеет гомологии с вирусными последовательностями, что указывает на интеграцию посредством незаконной рекомбинации; б) короткая нуклеотидная последовательность в участке интеграции дуплицируется, что приводит к образованию прямых повторов нескольких оснований ДНК хозяина, фланкирующих провирус; в) уча-
