Вирусология: В 3-х т. Том 1 - Филдс Б.Н.
ISBN 5-03-000283-9
Скачать (прямая ссылка):
да, нм 1 45 45 55 80 1001 42
3. Клетка-хозяин
а. продуктивная Мышь Африканс Нет Человек Человек, Нет
инфекция кая зеленая хомяк,
мартышка кролик
б. трансформация Хо Мышь, Мышь Крыса, Хомяк 2, Нет
мяк, человек, хомяк мышь
крыса хомяк
1 Диаметр капсида — это то же самое, что диаметр вириона для всех онкогенных ДНК-вирусов, кроме герпесвирусов.
HSV-2 деталей для клеток большинства млекопитающих. Чтобы выявить трансформирующую способность HSV-2, необходимо подавить его ннфекционность.
ка имеется только .у хервеевирушЕи По размеру генома опухолеродные ДНК-вирусы сильно различаются. Полиома- и папилло-мавирусы содержат небольшую кольцевую сверхспиральную молекулу ДНК длиной около 5,3 и 7,9 kb соответственно. Размер генома адено- и герпесвирусов гораздо больше. Эти вирусы содержат линейную двухцепочечную ДНК размером 30—38 и 140— 240 kb соответственно. Геном HBV-подобных вирусов — самых мелких из опухолеродных ДНК-вирусов — имеет уникальную структуру. Он представлен двухцепочечной молекулой ДНК длиной около 3,2 kb, содержащей одноцепочечный пробел. Кольцевая конфигурация молекулы стабилизируется благодаря спариванию 300 оснований, расположенных на 5'-конце каждой цепи. Г~ Полиома-, адено- и герпесвирусы обладают способностью к / двум видам деятельности: а) продуктивной инфекции клеток,
пермиссивных для вирусной репликации (обычно клеток природЛ ных хозяев: например, клеток мыши в случае Ру или клеток человека в случае Ad), которая сопровождается репликацией вируса и гибелью клетки; б) трансформации (с низкой эффективностью) небольшой доли клеток, непермиссивных или полупер-миссивных для вирусной репликации (обычно клеток других животных; табл. 12.2). Некоторые герпесвирусы, например HSV-1 и 2, ведут себя нетипично: они вызывают продуктивную инфекцию и гибель клеток большинства млекопитающих; чтобы обнаружить трансформирующую активность этих вирусов, их пряхо-дится инактивировать. В клетках, продуктивно инфицированных полиома-, адено- или герпесвирусами, осуществляется экспрессия всего вирусного генома, а в клетках, трансформированных этими вирусами или папилломавирусами, экспрессируется лишь va часть вирусного генома, которая содержит трансформирующие гены. К сожалению, пока не существует культуры клеток, на которой можно было бы изучать процесс продуктивной инфекции, вызванной папилломавирусами. Поэтому мы не располагаем достаточной информацией о жизненном цикле этих интереснейших вирусов. Точно так же отсутствуют культуры, пригодные для изучения продуктивной инфекции клеток HBV-подобными вирусами, и пока не удалось трансформировать культивируемые клетки вирусами этого семейства.
Трансформация клеток
Размер генома опухолеродных ДНК-вирусов сильно варьирует (табл. 12.2), но та часть генома, которая кодирует вирусные трансформирующие гены, невелика. Трансформирующие области геномов полиома-, папиллома- и аденовирусов составляют примерно 3 kb. Адено- и полиомавирусы часто используют в качестве моделей для исследования молекулярной биологии клеточной трансформации, а также организации и экспрессии генов эукариот. За последние семь лет мы узнали много нового о трансформирующих областях Ру, SV40 и аденовирусов групп А, В и С человека. Трансформация осуществляется в результате стабильной интеграции вирусной ДНК в клеточный геном и экспрессии специфических вирусных генов, кодируемых трансформирующей областью. Пока не удалось идентифицировать какие-либо специфические участки интеграции в геноме клетки-хозяина или вирусном геноме. Проведено картирование трансформирующих хе-нов SV40, Ру и Ad, а также идентифицированы и изучены их трансформирующие белки (часто называемые опухолевыми антигенами или Т-антигенами). Перед исследователями стоят сейчас следующие вопросы: какие вирусные белки нужны для трансформации, каковы их биологические функции в процессе
трансформации и что является молекулярной основой их активности? В данной главе изложены сведения о членах каждого семейства опухолеродных ДНК-вирусов.
Полиомавирусы
SV40, Ру, BKV и JCV трансформируют клетки в культуре и индуцируют опухоли у лабораторных животных, но не вызывают рак у своих природных хозяев. Трансформирующие области SV40 и Ру представляют собой единое семейство перекрывающихся генов Т-антигенов. SV40 кодирует большой и малый Т-ан-тигены мол. массой 94К и 17К соответственно. Экспрессия большого Т-антигена SV40 инициирует трансформацию клетки, а постоянная его экспрессия обеспечивает сохранение у клетки фенотипических признаков трансформированного состояния. Трансформация клеток вирусами SV40, Ру и Ad — это сложный многоступенчатый процесс, включающий по крайней мере два класса кодируемых вирусом функций: а) функцию «стабилизации», или «иммортализации» клеток (превращение клеток в «бессмертные») и б) функцию «трансформации», необходимую для перехода клетки в полностью трансформированное состояние. Чтобы обеспечить неограниченный рост клеток в культуре, достаточно экспрессии N-концевого домена большого Т-антигена, но для индукции всех фенотипических признаков трансформации необходима экспрессия оставшейся части большого Т-антигена SV40. Малый Т-антиген для трансформации клеток не нужен, но при определенных условиях он может играть роль усилителя.
