Люминесцентный анализ - Шлезингер М.А.
Скачать (прямая ссылка):
Использование флуоресценции для выявления "пятен" делает метод бумажной хроматографии (как хроматографии вообще) особенно удобным и чувствительным. Фронт продвижения растворенного вещества всегда отстает от фронта растворителя, а отношение расстояний от места нанесения до фронтов продвижения растворенного вещества, с одной стороны, и растворителя - с другой, остается практически постоянным для каждого отдельного компонента, разумеется, при условии осуществления хро-
*) Zn2Si04-Mn возбуждается коротковолновым ультрафиолетовым излучением (Х = 254 ммк), ZnS-Mn- длинноволновым (^. = 366 ммк).
64
СИСТЕМАТИЗАЦИЯ МЕТОДОВ ЛЮМИНЕСЦЕНТНОГО АНАЛИЗА
[ГЛ. V
матографирования на одной и той же бумаге с использованием одних и тех же растворителей, постоянной температуры и т. д. Отношение это обозначают Rf. Как ясно из сказанного, Rf компонента тем меньше, чем больше он отстает от растворителя в своем продвижении по бумаге; для компонента, нерастворимого в продвигающейся жидкости, Rf равно, очевидно, нулю.
Если первоначально нанесенные капли содержат смесь нескольких веществ, то на хроматограмме они располагаются в соответствии со значениями их Rf, и это дает возможность идентифицировать по Rf компоненты, образовавшие обнаруженные на хроматограмме "пятна".
Если вещество в "пятне" не окрашено и не флуоресцирует, то для его выявления хроматограмму обрабатывают (например, обрызгивают) соответствующим реактивом, и "пятна" начинают люминесцировать, или при другом варианте реактив вызывает свечение бумаги, и "пятна" выделяются на ней, как темные места на ярко флуоресцирующем фоне [10]. Для выявления терпенов с реакционнос'пособными двойными связями применен следующий метод: готовую хроматограмму опрыскивали 0,05%-ным раствором флуоресцеина и затем держали в парах брома. "Пятна" терпенов связывают бром быстрее флуоресцеина; светятся они желтым светом и отчетливо выявляются на фоне розовой флуоресценции эозина, образовавшегося из флуоресцеина [11].
Для количественных определений иногда вырезают "пятна", элюируют (извлекают) вещества и определяют их содержание в растворе. Заманчивее другой путь: весь световой поток флуоресцирующего "пятна" улавливают на фотоэлемент [12, 13] и тем самым одновременно учитывают и размер "пятна", и интенсивность его свечения, т. е. оба параметра "пятна", на которых сказывается количество люминесцирующего вещества в нем.
Мы попытались возможно полнее очертить сферу и методы целесообразного использования рассматриваемого приема люминесцентного анализа в целях идентификации или обнаружения веществ по флуоресценции, так как в недавнем прошлом отсутствие ясности в этом вопросе нередко приводило к тому, что при помощи люминесцентного анализа пытались разрешать задачи, заведомо этим методом неразрешимые. Так, например, в немецкой работе, опубликованной в 1940 г. [14], в статье, озаглавленной "Люминесценция пахучих веществ", автор описывает свечение 252 (!) просмотренных им органических соединений (спиртов, альдегидов, кето-нов, простых и сложных эфиров) и в конечном счете приходит к выводу, что флуоресценция - свойство настолько атипичное, что не годится для целей распознавания веществ. Разумеется, автор прав: нельзя решить, посмотрев люминесценцию жидкости, какое вещество она собой представляет. Однако неправильно поставлена сама задача; невозможность ее решения этим путем с очевидностью вытекает из самой природы явления и не требует подтверждения экспериментом.
Рассматриваемая работа грешит, по-видимому, еще и такой методической ошибкой: чувствительность люминесцентного метода анализа является той особенностью, которая определяет сферу целесообразного его применения; между тем при наблюдении флуоресценции жидкого вещества чувствительность метода не только не используется, но даже играет роль отрицательного фактора, так как чрезвычайно сильно должно сказываться влияние флуоресцирующих загрязнений. В самом деле, если жидкое вещество загрязнено флуоресцирующей примесью в количестве хотя бы 0,01 %, то оно представляет собой раствор этой примеси концентрации 10~4 г/мл3, т. е. концентрации, оптимальной с точки зрения наблю-
ПРИЕМ I. НАБЛЮДЕНИЕ СОБСТВЕННОЙ ЛЮМИНЕСЦЕНЦИИ
6Ь
дения флуоресценции примеси, тогда как флуоресценция самого жидкого вещества потушена и искажена его высокой концентрацией.
Обнаружение и идентификация веществ не являются единственной задачей, разрешимой методом наблюдения собственной флуоресценции вещества. Использование этого же приема позволяет выявлять некоторые общие данные относительно химической структуры интересующего вещества. Например, можно с уверенностью сказать, что вещество не является углеводородом, если его флуоресценция изменяется в зависимости от pH среды, или что оно не является простейшим производным бензола, если обладает флуоресценцией красного цвета, и т. д.
Каутский и Хон по флуоресценции гидразида 3-аминофталевой кислоты в адсорбированном состоянии выявляют наличие определенных тауто-мерных форм гидразида в адсорбатах, получаемых при различных условиях [15].
