Люминесцентный анализ - Шлезингер М.А.
Скачать (прямая ссылка):
1 : 10 000; 1 : 50 000; 1 : 100 000, принимаются за стандарты.
Подлежащую испытанию пробу грунта, взятую из водоема и содержащую меченые зерна песка, отмывают от примесей растворимых в воде солей, обрабатывают щелочным раствором, фильтруют и промывают водой; по интенсивности люминесценции полученного фильтрата определяют количество меченых зерен. Чувствительность предлагаемого способа достаточно высока и позволяет открывать меченые зерна грунта при их содержании даже столь малом, как 1 : 100 000.
5. Прием VI. Люминесцентная микроскопия
Возможность наблюдать люминесценцию веществ при ничтожно малом их содержании позволяет чрезвычайно эффективно использовать люминесцентную микроскопию, т. е. наблюдения люминесценции интересующих объектов при больших увеличениях с применением микроскопа. При этом не только обнаруживаются отдельные люминесцирующие компо-
"]
ПРИЕМ VII. ПРИМЕНЕНИЕ ЛЮМИНЕСЦЕНТНЫХ ЭКРАНОВ
75
ненты микрообъекта, но и Выявляется их локализация в нем. Если довольствоваться малым увеличением (в 80-100 раз), то можно возбуждать люминесценцию препарата, лежащего на столике микроскопа, освещая его ультрафиолетовыми лучами сверху-сбоку. При больших увеличениях объектив настолько приближен к объекту наблюдения, что необходимо наблюдать флуоресценцию при ее возбуждении не сверху, а снизу, как в обычном микроскопе. Для этого конденсор микроскопа должен быть прозрачен для ультрафиолетовых лучей, т. е. он должен быть сделан из увиолевого стекла или из иного, но обладающего в этом отношении такими же оптическими свойствами.
Стекло многих наших отечественных ходовых микроскопов вполне удовлетворяет этому условию и они с успехом могут быть использованы для люминесцентной микроскопии.
Для получения флуоресценции большей интенсивности необходимо, чтобы (как и во всякой оптической установке) вся система была хорошо собрана и прочно смонтирована. Обычно установка люминесцентного микроскопа слагается, помимо микроскопа, из следующих элементов: из источника, возбуждающего излучение, из светофильтра - черного стекла,- который поглощает видимую часть возбуждающего света, из прозрачной для ультрафиолетового излучения линзы, которая концентрирует падающий свет на нижнее зеркало-рефлектор микроскопа или на столик микроскопа, и из бледно-желтого светофильтра, надеваемого на окуляр; его назначение - предохранять глаз от фиолетовых лучей, которые проходят через вудовский светофильтр, если он для них немного прозрачен. Как ясно из вышесказанного, предметные стекла тоже должны быть прозрачны для ультрафиолетовых лучей, на покровные же это требование не распространяется.
Источники излучения, возбуждающего люминесценцию, подбирают применительно к длинам волн, которые лучше всего возбуждают исследуемый препарат. Так, в случае флуорохромированных биологических препаратов нередко пользуются видимым - синим и фиолетовым - светом {ср. гл. XVIII, стр. 311); для возбуждения некоторых неорганических веществ необходимо коротковолновое ультрафиолетовое излучение - искра (ср. гл. XIV, стр. 257). В большинстве случаев пользуются ртутными лампами (гл. VII). Для получения наибольшей яркости свечения надо, чтобы облученность достигала больших значений на небольшом участке - в точке наблюдения; для этого должен быть мал размер светящегося тела источника, как это имеет место у ртутных ламп сверхвысокого давления (ср. гл. VII, стр. 104).
Благодаря применению флуорохромов возможности использования люминесцентной микроскопии значительно расширились. В настоящее время ею пользуются во многих областях науки, практики и особенно успешно в биологии и медицине (см. гл. XVIII). Люминесцентную микроскопию с использованием наблюдений не только фото-, но и катодолюмине-сценции начали применять при исследовании минералов.
6. Прием VII. Применение люминесцентных экранов и кристаллофосфоров
Остановимся прежде всего на применении специально изготовляемых люминесцентных экранов для обнаружения ультрафиолетовых лучей; в зависимости от их длины волны они возбуждают те или иные компоненты, различающиеся по цвету свечения; таким образом, по цвету люминесцен-
76 СИСТЕМАТИЗАЦИЯ МЕТОДОВ ЛЮМИНЕСЦЕНТНОГО АНАЛИЗА [ГЛ. V
ции можно судить о длине волны ультрафиолетового света, попавшего-на данный участок экрана. Этот принцип цветовой трансформации использован Брумбергом [34] в успешно развиваемой им ультрафиолетовой мик~ роскопии, основанной на установлении различия в поглощении отдельных структурных элементов (химических компонентов) исследуемых микрообъектов: свечение экрана вызывается только тем ультрафиолетовым светом, который остался непоглощенным при прохождении через микропрепарат. Этот же прием лежит в основе и ряда других приборов, сконструированных Брумбергом, как-то: ультрахимископа для исследования хроматограмм, ультрафиолетового колориметра для определения поглощения раствором ультрафиолетового света и др.
Люминесцентные экраны используют для контроля отливок из легких металлов: свечение экрана возбуждается рентгеновскими лучами, проходящими через детали. Детали двигаются по конвейеру и автоматически вращаются, пока проходят над рентгеновской трубкой. Контролер через смотровое окно из свинцового стекла, расположенное над экраном, по свечению экрана обнаруживает дефекты в деталях [35].
