Люминесцентный анализ - Шлезингер М.А.
Скачать (прямая ссылка):
Ильиной установлена возможность использовать в спектрально-аналитических целях не только флуоресценцию, но и длительное свечение - фосфоресценцию, обнаруженную ею у полициклических ароматических соединений в замороженном состоянии и длящуюся в некоторых случаях свыше 1 сек [2]. К аналогичному выводу приходят авторы работы 1957 г. [5].
На примере двух изомерных соединений Ильина показала, что спектры их фосфоресценции отчетливо различаются, хотя спектры флуоресценции почти одинаковы. Фосфоресценцию представляется возможным использовать для аналитических целей и в тех случаях, когда на фоне- люминесценции смеси не удается выявить интересующий компонент по его флуоресценции, но это оказывается осуществимым при наблюдении послесвечения компонента, выявляющегося на темном фоне нефосфоресцирующей анализируемой смеси.
В некоторых случаях целесообразно усложнять первый прием применением для возбуждения люминесценции узких спектральных участков разной длины волны (см. гл. VI и XV).
Наконец, отметим, что применение светофильтров, позволяющих вырезать из суммарного люминесцентного излучения только интересующий спектральный участок, делает иногда возможным определять нужный компонент, несмотря на присутствие флуоресцирующих примесей.
Рассмотрим теперь усложнение методик, связанное с разделением многокомпонентных систем.
Во многих случаях разделение осуществляется обычными химическими приемами извлечения нужных компонентов или удаления примесей: методами экстрагирования, адсорбирования, соосаждения и т. д.
Для ориентировочного суждения о люминесцирующих компонентах смеси нередко применяют капиллярный анализ: на подвешенной полоске бумаги, погруженной концом в исследуемый раствор, вещества выявляются по образующимся на полосе люминесцирующим зонам.
Еще более эффективно применение хроматографии М. С. Цвета 16], в частности люминесцентной хроматографии, с последующим изучением выделяемых зон экспресс-реакциями.
Конкретизируем сказанное примером [71. Если несколько миллилитров вытяжки из растений, содержащих антраглюкозиды, просасывать через трубку, набитую адсорбентом - окисью магния, то образуется ряд зон; например, для вытяжки из ревеня легко получить до 9 зон, различающихся по флуоресценции и по цвету. Если разрезать трубку и осторожно выделить отдельные зоны, то легко в достаточной мере точно охарактеризовать шесть из них *) по совокупности следующих признаков: 1) по адсорбционной способности (т. е. по месту в хроматограмме); 2) по цвету и флуоресценции адсорбатов; 3) по их изменению под влиянием кислот и щелочей; 4) по характеру элюирования (извлечения) адсорбированного вещества.
*) Три зоны были настолько малы, что отделить их не удалось.
1] ПРИЕМ I. НАБЛЮДЕНИЕ СОБСТВЕННОЙ ЛЮМИНЕСЦЕНЦИИ 63
эфиром; по цвету и флуоресценции получающихся растворов, если элюция имела место; 5) по изменению флуоресценции эфирного раствора под влиянием кислот и щелочей и 6) по распределению флуоресцирующего вещества между водной и эфирной фазой и по флуоресценции последней. Как видно из приведенного перечня поверочных операций, все они являются экспресс-реакциями.
Отметим, что подобного рода дополнительными реакциями вообще целесообразно проверять выводы из наблюдений люминесценции вещества. Для хроматографирования бесцветных и нелюминесцирующих веществ предложено применять адсорбенты-неорганические люминофоры (Zn2Si04-Mn и ZnS-Mn). Если вещество, образующее зону, поглощает ультрафиолетовое излучение, которым возбуждается люминофор *), то зона обнаруживается как темная полоса на светящемся фоне. (О получении люминесцентных адсорбентов покраской см. стр. 74.)
В методическом отношении заслуживает внимания метод хроматографирования (на колонке силикагеля), позволивший его авторам 181 с точностью до 1 % определять в горючем содержание трех типов углеводородов: ароматических, олефиновых и насыщенных. Границы между зонами обнаруживались путем добавления к анализируемому образцу смеси красителей; малорастворимый нефлуоресцирующий краситель окрашивает в красный цвет границу спирт - углеводороды; краситель, флуоресцирующий синим светом, отчетливо выявляет границу между аромати-кой и олефинами, а флуоресцирующий желтым светом - между олефинами и насыщенными углеводородами.
В пятидесятых годах предложен и нашел широкое применение исключительно чувствительный и эффективный метод хроматографирования на бумаге. Осуществляется оно следующим образом: на бумажную полосу на некотором расстоянии от ее нижнего (или верхнего) края наносят каплю раствора, содержащего те или иные вещества; подсушив каплю, погружают полосу ее нижним (или загнутым верхним) концом в растворитель; всю систему помещают в плотно закрытый сосуд для избежания испарения растворителя. При таких условиях начинается восходящий (или нисходящий) ток жидкости по бумаге, и если первоначально нанесенные на нее вещества растворимы в примененном растворителе, то они вместе с ним тоже продвигаются по бумаге, но с различной скоростью.
Обычно при бумажной хроматографии применяют растворители, состоящие из нескольких жидкостей с неодинаковой способностью продвигаться по бумаге. Компоненты хроматографируемой смеси по-разному распределяются между жидкостями растворителя и водноцеллулозным комплексом; отсюда название "разделительной" хроматографии [9]. На хроматограмме получаются зоны ("пятна"), соответствующие отдельным компонентам смеси.
