Практикум по физиологии растений - Третьяков Н.Н.
ISBN 5-10-001653-1
Скачать (прямая ссылка):
На основании полученпых данных делают заключение о разной степени раскрытия устьиц, исходя из того, что при инфильтрации только ксилолом они открыты слабо, ксилолом и бензолом — средне, ксилолом, бензолом и спиртом — сильно.
Результаты опыта записывают по следующей форме:
Проникновение Степень
Условия спирта бешола ксилола
опыта
|
Материалы и оборудование. Десятп-пятпадцатидисвныс растения подсолнечника, капельницы, спирт, бензол, ксилол.
Работа 30. ОПРЕДЕЛЕНИЕ СТЕПЕНИ РАСКРЫТИЯ УСТЬИЦ НА ФИКСИРОВАННОМ ЭПИДЕРМИСЕ ПО ЛЛОЙДУ
Вводные пояснения. Метод заключается в быстром обезвоживании и фиксации снятого эпидермиса в абсолютном спирте и последующем его исследовании иод микроскопом.
Порядок работы. Наблюдают за движением устьиц у десятидневных проростков злаков при переносе их из светлого помещения в темную камеру. Наблюдение вы-
полняют сначала на свету, а затем после пребывания растений в темной камере 30 мин и 2 ч.
На нижней стороне листа под прямым углом к центральной жилке делают неглубокие надрезы бритвой через 2.. .3 мм и срезают в этом направлении полоску эпидермиса. Помещают ее в склянку с абсолютным спиртом, который быстро фиксирует снятый эпидермис и предохраняет его от дальнейшей деформации. Материал молено хранить в спирте долгое время.
Просматривают фиксированный эпидермис под микроскопом, измеряют ширину устьичных щелей не менее чем у 20 устьиц и вычисляют среднюю величину степени их открытия. Измерения выполняют при помощи окуляра-микрометра, который представляет со'бой круглую стеклянную пластинку с нанесенной шкалой. Окуляр-микрометр вставляют в окуляр. Перемещают объект препаратоводителе'м и шкалу микрометра поворотом окуляра так, чтобы можно было измерить объект в делениях окуляра-микрометра.
Для выражения ширины устьичных щелей в микрометрах необходимо определить цену деления окуляра-микрометра. Для этого на столик микроскопа помещают объект-микрометр со шкалой длиной 1 мм и величиной одного деления—-100 мкм. Совмещают направление и нулевые точки шкалы окуляра-микрометра и объекта-микрометра. Находят количество делений объекта-микрометра (А), точно соответствующее количеству делений окуляра-микрометра (В). Вычисляют цену деления окуляра-микрометра:
С=*10А/В.
Для получения истинных размеров устьичных щелей умножают их ширину в делениях окуляра-микрометра на цену деления. Результаты опыта записывают по форме (табл. 17).
17. Определение степени раскрытия устьиц
Цена деле Ширина устьичных щелей
Вариант ния окуля в делениях в микро
ра-микро
метра, мкм окуляра-мик метрах
рометра
На свету
После пребывания растений в темной камере в течение: 30 мин 2 ч
Делают вывод о влиянии света на устьичный аппарат растений.
Материалы и оборудование. Десятидневные проростки овса или пшеницы, абсолютный спирт.
Микроскопы, окуляры-микрометры, объекты-микрометры, предметные н покровные стекла, пинцеты, препаровальные иглы, маленькие склянки с притертыми пробками или бюксы, лезвия.
Работа 31. ИЗУЧЕНИЕ СОСТОЯНИЯ УСТЬИЦ МЕТОДОМ ОТПЕЧАТКОВ ПО ПОЛАЧЧИ
Вводные пояснения. Метод основан на получении тонкой прозрачной пленки с отпечатками (репликами) устьиц. Рассматривая их под микроскопом, можно определить число устьиц на единице листовой поверхности и их размер. Для изготовления реплик применяют вещества, образующие пленку при испарении растворителя или в результате полимеризации. Действие самих органических растворителей и охлаждение листа в результате их испарения могут влиять на апертуру устьиц. Использование полимеров снижает артефакты.
Порядок работы. На нижнюю поверхность листа стеклянной палочкой наносят тонкий слой раствора силиконового каучука, смешанного с катализатором, и оставляют для полимеризации на 2.. .3 мин. «Негатив» снимают с листа пинцетом, покрывают бесцветным лакам и дают высохнуть. Таким образом на лаковой пленке, которая легко снимается со слепка, получают позитивное изображение листа. Пленку помещают в каплю воды на предметное стекло, накрывают покровным и рассматривают под микроскопом с объективом Х40. Определяют среднее число устьиц в поле зрения микроскопа, исследовав несколько полей зрения в разных участках препарата.
Затем при помощи окуляра-микрометра (см. работу 30) находят среднюю площадь устьичной щели и площадь поля зрения микроскопа. Для этого измеряют ширину и длину устьичной щели не менее чем у 20 устьиц и устанавливают среднюю величину. Площадь устьичной щели вычисляют по формуле
S = nab,
где а и Ь — малая и большая полуоси эллипса, т. е, половина ширины и длины устьичной щели.
По числу устьиц и средней площади устьичной щели рассчитывают общую площадь устьичных отверстий в поле зрения микроскопа. Измеряют диаметр поля зрения, вычисляют радиус и определяют площадь поля по формуле: S = nr2. Рассчитывают площадь, занимаемую всеми устьичиыми отверстиями, в процентах общей поверхности листа.
