Генная инженерия растений. Лабораторное руководство - Дрейпер Дж.
ISBN 5-03-001854-9
Скачать (прямая ссылка):
Концевое мечение маркеров, полученных иа основе ДНК фага
Приложение 5 [III] ....... '....................
Определение включения метки в ДНК.........................
Литература.................................................. "
Глава 6. Анализ организации и экспрессии геиов растений. Р. Скотт
Дж. Дрейпер, Р. Джефферсон, Г. Дьюри, J1. Джэкоб .
6.1. Введение................................................
6.1.1. Принцип организации геиов растений .
6.1.2. Строение мРНК.....................................
6.1.3. Перенос продуктов генов в клетке......................
6.1.4. Использование генетической трансформации для изучения
экспрессии генов растений ..............................
6.1.5. Использование траисгенных растений для изучения
последовательностей, регулирующих транскрипцию
6.1.6. Изучение регуляторных последовательностей с помощью
индикаторных генов...........................
6.2. Изучение организации Т-ДНК методом блоттинг-гибридизации
по Саузериу...............................................
6.2.1. Общие положения ...........................
6.2.2. Организация последовательностей чужеродной ДНК
тканях растений ....................................
6.2.3. Изучение организации Т-ДНК в трансгенных растениях
моркови методом блоттинг-гибридизации
6.3. Анализ экспрессии генов методом точечного нозери-блоттинга
6.3.1. Регуляция транскрипции гена Cab в этиолированном рас
тении гороха под действием фитохрома ....
6.4. Использование CAT в качестве индикаторного гена дли изуче
иия контроля экспрессии геиов в различных органах и при из
менении условий среды.................................. .
6.4.1. Общие положения...................................
6.4.2. Определение активности хлорамфениколацетилтрансфе
разы (CAT)..........................................
6.4.3. Примеры использования cat в качестве индикатор
ного гена для изучения контроля экспрессии гена Cab cat в
различных органах и в зависимости от условш среды
...................................
6.5. Применение неомицинфосфотрансферазы-11 (NPT-II) в качестве
индикаторного белка для изучения роли последовательно стей, участвующих в
переносе белков (транзитных пептидов
6.5.1. Общие положения ... ..................
6.6. Выделение интактных хлоропластов табака ....
6.6.1. Общие положения................................
6.6.2. Обеспечение.......................................
6.6.3. Методика..........................................
.6.7. Определение активности NPT-II in situ................
6.7.1. Общие положения...................................
6.7.2. Неденатурирующий электрофорез в полиакриламидном
геле................................................
6.7.3. Определение NPT-II in situ после электрофореза
6.8. Определение NPT-I1 методом вестери-блоттинга
6.8.1. Общие положения ..................................
6.9. Получение химерных генов с последовательностями, кодирую щими
индикаторный фермент: система слияния с геном GUS
6.9.1. Общие положения .... ..............
6.9.2. Слияние с геном GUS...............................
6.9.3. Определение активности GUS в экстрактах растений
6.9.4. Выделение GUS из тканей растений . . • . ,
6.9.5. Флуориметрическое определение активности GUS
6.9.6. Выявление GUS in situ с использованием денатурирую
щего полиакриламидного геля.........................
6.9.7. Гистохимическое выявление GUS на срезах тканей рас
тений........................................
6.10. Определение нопалина в трансформированных растительных тканях
........................................................
6.10.1. Общие положения...................................
6.10.2. Обеспечение.......................................
6.10.3. Методика..........................................
Приложение 6 [1]...................................................
Нозерн-блоттинг . ................................
Приложение 6 [11]...........................................
Выделение NPT-II и CAT из бактерий........................
Приложение 6 [111].................................................
Определение концентрации белка по Бредфорду
Приложение 6 [IV] . ......................................
Определение агропииа и маниопииа..........................
Литература.........................................................
Список фирм, поставщиков реактивов и оборудования ....
