Генная инженерия растений. Лабораторное руководство - Дрейпер Дж.
ISBN 5-03-001854-9
Скачать (прямая ссылка):
140
2.6.2. Разработка систем совместного культивирования .
141
2.7. Выделение мезофильных протопластов табака ....
143
2.7.1. Оснонные положения ... ..................143
2.7.2. Обеспечение..........................................145
2.7.3. Методика.............................................146
2.8. Культивирование мезофильных протопластов табака . . .
149
2.8.1. Основные положения...................................149
2.8.2. Обеспечение..........................................150
2.8.3. Методика.............................................150
2.9. Трансформация протопластов путем совместного культивирования с
агробактериями.....................................151
2.9.1. Основные положения...................................151
2.9.2. Обеспечение..........................................152
2.9.3. Методика.............................................153
2.10. Трансформация клеток суспензионной культуры моркови .
160
2.10.1. Основные положения...................................160
2.10.2. Инициация проэмбриогеиных суспензионных клеточных
культур моркови, приготовление фидерных чашек н высев на
переносные диски................................165
2.10.3. Инокуляция клеток моркови агробактериями, селекция
трансформантов и регенерация путем соматического
эмбриогенеза ............................................167
Приложение 2 [I]...................... .........................170
Обычные материалы для работы с культурой тканей . . .
170
Приложение 2 [11].....................................................171
Среда для культуры растительных клеток и тканей . , .
171
Приложение 2 [111]....................................................175
Антибиотики, добавляемые в среды для культур растительных
клеток.......................................................175
Приложение 2 [IV] ....
................................176-
Подготовка эксплантатов для инокуляции агробактериями .
176
Приложение 2
[V]......................................................178-
Растворы для выделения протопластов табака . . .
178
Приложение 2 [VI].....................................................179
Выделение протопластов из измельченных кусочков листа , .
179
Приложение 2 [VII]....................................................180
Методы флуоресцентного окрашивания для контроля развития
растительных протопластов................................. .
180
Приложение 2 [VIII]...................................................181
Примеры процедур генетической трансформации растений, основанных
на системе переноса генов агробактерий ... 181
Литература..................................................
181
Глава 3. Трансформация растительных клеток путем трансфекции ДНК
Дж. Дрейпер, Р, Скотт, А. Кумар, Г. Дьюри ,
3.1. Введение................................................
3.1.1. Ограничения системы трансформации с помощью агробак
терий...............................................
3.1.2. Трансформация растительных протопластов изолирован
ной векторной ДНК...................................
3.1.3. Разработка стратегий трансформации протопластов путем
трансфекции ДНК....................... • • • •
3.1.4. Векторы для переноса генов посредством ДНК.
(DMGT-векторы)...............................
3.1.5. Трансформация интактных растительных тканей DMGT
векторами ..........................................
3.2. Трансфекция протопластов с помощью полиэтиленгликоля
3.2.1. Основные положения................................
3.2.2. Стимулируемое ПЭГ поглощение ДНК протопластами
3.2.3. Выделение ДНК из протопластов и дот-блоттинг-гибри
дизация..........................................
3.3. Трансформация протопластов с помощью электропорации
3.3.1. Основные положения................................
3.3.2. Оптимизация методик электропорации с помощью вре
менной экспрессии ..................................
3.4. Трансформация растительных клеток путем микроииъекций
3.4.1. Основные положения . .....................
3.4.2. Трансформация растений путем микроинъекций ,
Приложение 3 [I]...................................................
Выделение протопластов из клеток суспензионной альбинотиче ской
культуры Petunia hybrida (сорт Blue Lace) . . "
Литература.........................................................
