Генная инженерия растений. Лабораторное руководство - Дрейпер Дж.
ISBN 5-03-001854-9
Скачать (прямая ссылка):
Cab - ген хлорофилл а/Ь-связывающего белка
10
Список сокращений
cab - шромотор гена хлорофилл а/Ь-связывающего
белка
CaMV - вирус мозаики цветной капусты
CAT - хлорамфениколацетилтрамсфераза
cat - ген хлорамфениколацетилтрансферазы
СЬ - карбенициллин
ссс - ковалентнозамкнутая кольцевая форма ДНК
(от англ. covalently closed circle)
Cm - хлорамфеникол
СТАВ - цетилтриэтиламмоний бромид (от англ. cetyl
triethylammonium bromide)
Cx - цефотаксим
DMGT - перенос генов посредством ДНК (от англ.
DNA-mediated gene transfer)
Gm - гентамицин
GUS - глюкуронидаза
HEPES - N-2-гидроксиэтилпиперазин - №-2-этансульфо-
новая кислота Hm - гигромицин
Km - канамицин
Kmr - устойчивость к канашщину
lux - люцифераза
MOPS - З-морфолинопропансульфоновая кислота
Mt - метотрексат
4-MU - 4-метилумбеллиферон
MUG - метилумбеллиферилглюкуронид
NA - питательный агар (от англ. Nutrient Agar)
NB - питательный бульон (от англ. Nutrient Broth)
Nop - нопалин
nos - ген нопалинсинтазы
nos - промотор гена нопалин-синтазы
NPT-II - неолмщинфосфотрансфераза
npt-II - ген неомицинфосфотрансферазы
ос - открытая кольцевая форма ДНК (от англ.
open circle) ocs - ген октопинсинтазы
Rf - рифампицин
Sm - стрептомицин
Sp - спектиномицин
SSC - стандартный солевой раствор (0,15 М NaCl,
0,015 М цитрат натрия, pH 7,0)
Тс - тетрациклин
TEMED - ^Н№,№-тетраметилэтилендиамин
tzs - транс-зеатинсинтаза
X-GAL - 5-бром-4-хлор-3-индолил-р - D - галактопирано-
зид
Глава 1
Агробактериальные трансформирующие векторы растений
Ф. Армитидж, Р. Уолден, Дж. Дрейпер
1.1. Введение
1.1.1. Индукция опухолей агробактериями
Agrobacterium tumefaciens и A. rhizogenes представляют собой почвенные
бактерии, которые в участках поранения двудольных растений вызывают
заболевания, называемые соответственно "корончатым галлом" и "косматым
корнем". Среди однодольных растений только некоторые представители
семейств ЫИасеае и Amaryllidaceae оказались в слабой степени восприимчивы
к заболеванию корончатых галлов (обзорные данные приведены ниже). Причины
подобного ограничения круга хозяев в настоящее время не раскрыты. Однажды
начавшись, опухолевый рост может продолжаться и в отсутствие бактерий, а
опухолевая ткань способна расти в аксеничных условиях в культуре на
питательной среде, не содержащей экзогенных ауксинов и цитокининов,
которые в норме необходимы для стимуляции роста растительных тканей in
vitro.
Опухолевые ткани синтезируют новые производные аминокислот и сахаров,
известные как опины. Тип опина, синтезируемого в опухоли (например,
нопалин, октопин, агроцинопин, ман-нопин и агропин), зависит от штамма
агробактерий, вызвавшего ее образование. Октопин и нопалин - опины,
образующиеся из аргинина; их легче всего обнаружить в ткани корончатых
галлов. В соответствии с этим многие широко распространенные штаммы
Agrobacterium tumefaciens классифицируют как штаммы октопинового или
нопалинового типа. В опухолях косматого корня, вызываемых A. rhizogenes,
как правило, обнаруживается агропин - производное одного из сахаров.
Штаммы агробактерий, вызывающие образование опухолей, способны к
избирательному катаболизму опинов того типа, синтез которых индуцируют,
используя последние в качестве источников углерода и азота.
Как индукция опухолей, так и синтез опинов обусловлены бактериальными
мегаплазмидами - Ti-плазмидами (от англ. Tumour inducing) в случае A.
tumefaciens и Ri-плазмидами (от англ. Root inducing) в случае A.
rhizogenes. Молекулярно-биологические основы опухолеобразования подробно
рассмотрены в обзорах [33, 13, 22, 50].
12
Глава I
Нопалинввадт-обласгь (24 т.П.Н.) tmsi
1ms f tmr По?
aa шшшт ш т
. ^ 2 14 _ 3 >
ь
в
ш ш
13 D
Октолиновая Т-облаеть tms 2 tms 1 tmr
TL 1Мт.п.н.]
[H| Основные Функциональные области
|§Щ Области гвмслогии
Тд 17 т.П.Н.}
Рис. 1.1. Общая организация и экспрессия Ti-плазмид октопинового и
иопали-
нового типов.
А. Карты Ti-плазмид октопинового (pTiAch5) и нопалинового (pTiC58) типов,
показывающие относительное расположение и размеры основных функциональных
