Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Аппельт Г. -> "Введение в методы микроскопического исследования" -> 68

Введение в методы микроскопического исследования - Аппельт Г.

Аппельт Г. Введение в методы микроскопического исследования — МЕДГИЗ, 1959. — 429 c.
Скачать (прямая ссылка): vvedenievmetodimikro1959.djv
Предыдущая << 1 .. 62 63 64 65 66 67 < 68 > 69 70 71 72 73 74 .. 120 >> Следующая

Цветной фазовый контраст наступает тогда, когда вместо светопроницаемой частнГ кольцевой диафрагмы конденсора приспособлен зеленый” фильтр в форме кольца, а вместо, черной светонепроницаемой частя кольцевой диафрагмы конденсора, введен красный фильтр. Возникает зеленое кольцо на красном поле.
В отличие от черного поля обыкновенной кольцевой диафрагмы конденсора, красное поле пропускает свет. Естественно, что комбинация цветных фильтров не ограничена красным и зеленым цветом. Однако применяющиеся цвета должны быть дополнительными.
Сейлор, Брайс и Цернике в 1950 г. открыли способ цветного фазового контраста, но он имеет тот недостаток, что полученные цветовые сочетания спектральных цветов изменяются при изменениях температуры.
В фокальную плоскость объектива вводят кольцевую фазовую пластинку, так же как и при негативном фазовом контрасте, но с показателем преломления, который резко меняется с изменением длины волны света. На остальную часть фокальной плоскости, так же как и при позитивном фазовом контрасте, накладывается фазовая пластинка, показатель преломления которой лишь незначительно изменяется с длиной волны света. Благодаря различной толщине обе пластинки устанавливаются так, что в середине видимого спектра, в его желто-зеленой части, исчезают позитивный и негативный фазовые контрасты. Тогда в желто-зеленой части мы получаем обыкновенное светлое поле.
Напротив, в красной части спектра преобладает позитивный, а в синей части —негативный фазовый контраст.
Так как исследуемые объекты вызывают различный сдвиг фазы проходящего сквозь них света, они выглядят цветными, а именно синими при сдвиге фазы выше среднего и красными, когда сдвиг ее ниже среднего.
Довольно просто получить цветное фазовоконтрастное изображение, подобно представленному на рис. 270. Как показали собственные изыскания, для этой цели следует класть в держатель диафрагмы конденсора два цветных полудиска, которые выглядят так, как изображено на рис. 197.
Одна половина диаметра держателя диафрагмы содержит красный полудиск, а другая — зеленый.
Структуры в фазовоконтрастном изображении видны в чередующихся сочетаниях зеленого и красного. При этом
хорошо зарекомендовали себя спектральные фильтры Агфа в Вольфене.
Само собой резумеется, что вместо красного и зеленого можно также выбирать другие цвета, но они должны быть д ополнительными.
По Клейссу из Мерида (Венесуэла), улучшение контрастного эффекта при наблюдении окрашенных препаратов в фазовоконтрастном микроскопе происходит тогда, когда в держатель диафрагмы под конденсором кладут цветные фильтры, дополнительные к цветам препарата.
НЕКОТОРЫЕ СПЕЦИАЛЬНЫЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
13.1. ИНТЕРФЕРЕНЦИОННАЯ МИКРОСКОПИЯ
Интерференционная микроскопия служит для того, чтобы сделать видимыми мельчайшие различия в показателях преломления в неокрашенных микроскопических препаратах.
Для исследования особенно пригодны препараты клеток, в которых должны быть выявлены мельчайшие структуры.
Явления интерференции наступают тогда, когда отдельные серии световых волн испытывают при распространении через среду такое замедление относительно соседних, что максимум одной волны попадает на максимум или минимум соседней волны. В первом случае это дает сложение, а во втором — вычитание амплитуд волнообразного движения.
В одноцветном свете благодаря этому появляются посвет-ления и потемнения, а в белом свете — интерференционные цвета, как мы уже писали об этом в главе о поляризационной микроскопии.
Интерференция световых волн при интерференционной микроскопии (по Фредериксу) создается с помощью двух покровных стекол. Нижнее, большее, служит предметным стеклом. Его верхняя поверхность посеребрена несколько сильнее, чем нижняя поверхность верхнего покровного стекла, но так, чтобы еще можно было свободно видеть сквозьнего.
Между обеими тонкими стеклянными пластинками, расстояние между которыми не должно превышать 0,02 мм, в воде помещается объект. Чем тоньше слой объекта, тем сильнее проявления интерференции.
Рис. 271. Принцип интерференционной микроскопии с полупосеребренными покровными стеклами.
1 ¦— интерферир\ юшие лучи , 2 — покровное стек ю с серебряным слоем (заштриховано); 3 — покровное стекло с серебряным слоем (заштриховано) в качестве предметного стекла; 4 — дважды отраженный луч; 5 -— луч, лишь лре"томленный.
Рис. 272. Интерференционный микроскоп фирмы ч Бекер из Холборна в Лондоне.
-4*
Часть поступающих от конденсора лучей света лишь преломляется стеклянными пластинками, а часть лучей дважды отражается от посеребренных поверхностей. Лучи, дважды отраженные, приобретают разность в ходе относительно лучей, лишь преломленных, и интерферируют с ними.
Если лучи света сильно преломляются структурами объекта, то тогда видны все клеточные включения, ядрышки и т. д. в различных цветах. В качестве источника света пригодны лишь лампы большой яркости. Ирисовая диафрагма конденсора сильно затягивается.
Предыдущая << 1 .. 62 63 64 65 66 67 < 68 > 69 70 71 72 73 74 .. 120 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed