Введение в методы микроскопического исследования - Аппельт Г.
Скачать (прямая ссылка):
Рис. 254. Специальный фазовый конденсор фирмы Вильд в Хеербругге в Швейцарии с большим рабочим расстоянием. Диафрагмы насадки для различных объективов насаживаются на центрируемый конденсор. Конденсор с большим рабочим расстоянием делает возможным проводить исследования объектов, которые лежат выше столика микроскопа на расстоянии до 2 см, что, например, возможно при исследовании культур клеток тканей.
Рис. 255. Фазовоконтрастный микроскоп фирмы Ватсон в Лондоне. Кольцевая диафрагма установлена непосредственно на коллекторе осветителя.
Каким образом осуществляется многостороннее применение конденсора Гейне, становится ясным из рис. 263 и прилагаемого к нему текста.
Рисунок и текст были любезно представлены нам фирмой Лейтц.
Рис. 256. Живые возбудители сибирской язвы (слева — при освещении по методу светлого поля, справа — по методу фазового контраста). Масштаб изображения 250 : 1 с последующим увеличением 750 : 1 (по снимку Народного предприятия Карл Цейсс в Йене)
В фазовоконтрастное устройство Лейтца в настоящее время входят следующие части (см. рис. 262).
1. Конденсор Гейне (1) с зеркальным приспособлением (Sk), которое перемещается по высоте при помощи кремальеры (Тг) и центрируется двумя винтами (S).
2. Два ахроматических (2, 3) и два апохроматичееких (4, 5) объектива.
3. Насаживающаяся иммерсионная приставка для объективов с небольшим увеличением, которые благодаря этому уравниваются с масляной иммерсией (сравни главу 2) таким образом, что с легкостью можно переключать с масляной иммерсии на сухие (обзорные) объективы. При этом контуры изображения остаются легко распознаваемыми.
4. Иммерсионная насадка для конденсора (1а), когда он употребляется с объективом с масляной иммерсией.
5. Фильтродержатель (6) и светофильтры (6а).
Рис. 257. Срез селезенки, сделанный на замораживающем микротоме, неокрашенный, по методу фазового контраста ^ величе-ние 610 - 1 (по снимку фирмы Лейтц).
Рис 258 Вертикальный фазовый иллюминатор фирмы Бекк в Лондоне. 15*
Рис. 260. Микроскоп Лейтца для падающего света «Металлюкс» с фазовоконтрастным устройством. Опакиллюминатор скомбинирован с револьвером на пять объективов и барабаном для установки фазовоконтрастного освещения и освещения по методу светлого поля. На тубус может быть установлена наса-
дочная камера.
Рис. 261 Четыре установки фазы конденсора Гейне фирмы Лейтц Рисунки изображают сублимацию желтой краски Ганза с поверхности куска бумаги для художественной печати. 118 : 1 Установки . вверху слева II; вверху справа I, внизу слева III и внизу справа IV Из статьи Брилля «С фазовым контрастом», «Фотография и наука», год издания 2-и, в. I, стр. 32.
Рис 262 Фазовоконтрастное устройство Лейтца (объяснение
в тексте)
6. Установочная лупа (7), которая соответствует вспомогательному микроскопу (см. рис. 251) и служит для рассматривания задней линзы объектива.
В последнее время сконструировано фазовоконтрастное приспособление для микроскопии в падающем свете.
На рис. 258 показано устройство вертикального фазового иллюминатора фирмы Бекк в Лондоне. Кольцевая фазовая диафрагма, так же как и в фазовоконтрастном микроскопе проходящего света, имеет различную величину для каждого объектива падающего света, и ее изображение после отражения объектом совмещается с фазовым кольцом в объективе.
Опак-иллюминатор в системе Бекка работает с плоско-лараллельной стеклянной пластинкой, расположенной на пути светового потока.
Фирма Цейсс в Йене остроумно разрешила проблему фазовоконтрастной микроскопии в падающем свете. Удалось обойтись без особых фазовых объективов и использовать обыкновенные объективы для наблюдения в падающем свете. Кольцевая диафрагма расположена на месте апертурной кольцевой диафрагмы вертикального иллюминатора; револьвер с фазовыми кольцами, подходящими к различным объективам, —¦ в направляющих салазках анализатора.
Рис. 263. Различные виды освещения в зависимости от положения зеркального приспособления объектив Pv 20/0,45 (из каталога Микро А № 8308 фирмы Лейтц)
I. В нижнем положении I зеркального приспособления 5к узкое кольцо света L, полученное с помощью конденсора, изображается в U внутри фазовых колец Цернике Z'. Наблюдение производигся при освещении
по методу светлого поля.
II. При подъеме зеркального приспособления 5к изображение Z' светового кольца расширяется до тех пор, пока оно полностью не покроется темным фазовым кольцом Z. При II установке наблюдение производится по
методу фазового контраста Цернике.
III. При дальнейшем подъеме зеркального приспособления 5к изображение светящегося кольца расширяется до тех пор, пока на него не перестанет влиять фазовое кольцо. Эта III установка дает очень контрастные изображения с освещением по методу светлого поля.
IV. При последующем подъеме изображение светового кольца уходит за ободок А апертурной диафрагмы. В этом IV положении достигается освещение по методу темного поля с кольцом L в качестве источника света, при котором по сравнению с нормальным освещением по методу темного поля во многих случаях отчетливо
